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相似文献
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1.
陈京  胡伟贞 《植物检疫》1997,11(2):81-84
番茄环斑病毒(TmRSV),烟草环斑病毒(TRSV),南芥菜花叶病毒(ArMV)的病汁液和PEG粗提纯液,经适宜温度或甲醛处理,均丧失侵染性而有抗原性。TmRSVPEG粗提纯液经60℃(水浴)处理10分钟或28℃7天,TRSV粗提纯液置25℃一个月,Ar-MV在40℃7天条件下均可做为阳性对照的灭活处理的最佳方案。可保存抗原性在7~12月以上。为了防止危险性检疫病毒的侵入,对入境种苗进行检疫,需建立快速、准确、标准化检疫程序,而在血清学快速诊断试验中,提供阳性对照,对提高判断准确率是必要的。因此,为了解决在诊断试剂中提供阳性对照但又不能使其检疫性病毒人为扩散这一重要问题,我们在研究三种外检病毒(TmRSV,TRSV,ArMV)的检验技术的同时,又进行了一些灭活试验,用化学和物理方法钝化病毒,使其失去侵染性而保持抗原性,并应用于酶联诊断试剂盒中,本文报道了初步试验结果  相似文献   

2.
番茄环斑病毒单克隆抗体细胞株的建立及检测方法的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用纯化的番茄环斑病毒(TmRSV)免痊Balb/c小白鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。筛选出6株分泌TmRSV单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。抗体免疫球旦白分属于1gG2a,IgG3和1gM。用免疫电镜诱捕法检测,6个McAb与加拿大分离物反应均为阳性,其中CE3,CG8,9G9不与西德分离物反应。属于1gG3的单抗具有与A旦白结合的特性。  相似文献   

3.
三种ELISA方法检测苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的比较   总被引:19,自引:1,他引:18  
苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎沟病毒(ASGV)是感染苹果和其它一些果树的重要病毒。作者应用PAS-ELISA法成功地检测了苹果组培苗中的这两种病毒。为了简化操作步骤,试验了DAS-ELISA和改良DAS-ELISA法,并与PAS-ELISA的检测结果比较。试验结果表明,DAS-ELISA能检测出ASGV,却不能检测出ACLSV,与此同时,这两种病毒均可用改良DAS-ELISA检测。DAS  相似文献   

4.
RT-PCR检测李坏死环斑病毒的研究   总被引:16,自引:2,他引:14  
为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒9PNRSV),根据该病毒RNA3序列设计引物,对感病和健康组织总RNA进行RT-PCR,结果从感病组织中扩增出了大约450bp的目的片段,而健康组织中无此扩增带。将此PCR产物连接到pGEM-T-easy载体也能转化大肠杆菌DH55α菌株,得到了含有目的片段的重组子。并采用双脱氧终止法进行序列配美国报道的李坏死环斑病毒RNA3序列对应部分核苷酸基本一致,这表  相似文献   

5.
相宁  周雪荣 《植物检疫》1995,9(6):337-339
本文报道应用RT-PCR技术检测烟草环斑病毒(TRSV)的。根据TRSVRNA-2序列3末端非编码区设计,合成引物-1和引物-2;用TRSVRNA作模板,引物-2作引物,反转录合成cDNA,并以此作模板进行PCR扩增,5-6小时内可得到结果,检测粗提液中RNA灵敏度达400pg,并且可以直接从受侵染的叶片汁液中检出TRSV,为口岸快速检测疫推出一个更灵敏、准确的分子生物学新方法。值得推广应用。  相似文献   

6.
棉花枯萎病菌的血清学研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
本研究以棉花枯萎病菌公安菌株为材料,用D.Ianneli法提取菌丝孢子蛋白抗原,按改进的J.E.Devay免疫方案制备抗血清。琼脂双扩散测得效价达1/64,用琼脂双扩散、(比较)对流免疫电泳、间接ELISA及SPA-ELISA测定抗血清的特异性和灵敏度。结果表明4种检测方法基本上均能鉴别到尖孢镰刀菌种的水平,但不能鉴别到种以下的分类单位,4种方法检测所达的灵敏度依次为4.8625×10-2,6.078×10-3,3.799×10-4,3.799×10-4mg×ml-1。除此之外,本研究对琼脂双扩散法在真菌血清学上的应用上作了摸索  相似文献   

7.
RT-PCR检测烟草环斑病毒的研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
本文报道应用RT一PCR技术检测烟草环斑病毒(TRSV)的结果。根据TRSVRNA-2序列3末端非编码区设计、合成引物一1和引物一2;用TRSVRNA作模板,引物一2作引物,反转录合成cDNA,并以此作模板进行PCR扩增,5~6小时内可得到结果,检测粗提液中RNA灵敏度达400pg,并且可以直接从受侵染的叶片汁液中检出TRSV,为口岸快速检疫推出一个更灵敏、准确的分子生物学新方法。值得推广应用。  相似文献   

8.
香石竹环斑病毒的分子检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
陈定虎  于顺 《植物检疫》1997,11(5):257-260
试验具体研究了两类不同性质的cDNA探针对香石竹环斑病毒的检测效果。毒源由中国农业大学植物病毒室提供,繁殖于苋色藜Chenopodiumamaranticolor上,提纯该病毒,然后抽提其核酸RNA,将RNA多聚腺苷化后,以Oligo(dT)为引物,反转录合成cDNA,补平后与载体连接,转化大肠杆菌,获得阳性克隆,用32P和光敏生物素分别标记cDNA制作探针,与CRSV及其RNA进行点杂交,结果表明,两类不同性质的探针在检测RNA水平上具有相同的灵敏度,其检测极限均达到1ng/ml,并对二类探针进行了比较。  相似文献   

9.
魏梅生  相宁 《植物检疫》1998,12(1):8-10
选用缸豆黑种三尺作繁殖寄主,接种4周后采收病叶,采用聚乙二醇沉淀,差速离心和10-40%蔗糖梯度离心,得到提纯的香石竹环斑病毒,紫外吸收呈典型核蛋白吸民一,电镜下见到大量球状病毒粒体。采用多咱途径免疫家兔获得的抗血清,琼脂双测得效价为1:16。  相似文献   

10.
宋淑敏 《植物检疫》1994,8(4):202-204
用特异性抗血清制备的抗血清纸片应用于酶联免疫吸咐实验(ELISA),取得了良好的结果。目前已将抗血清纸片用于南芥菜花叶病毒(ArMV)、番茄环斑病毒(TomRSV)、烟草环斑病毒(TRSV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)等进境植物危险性病毒的检测,取得与使用冻干保存抗血清相同的效果。应用抗血清纸片方便、经济、便于保存和邮寄。  相似文献   

11.
A variety of systems of designation has evolved to name pathotypes of plant pathogens. The systems were evaluated to determine those best suited for particular purposes. Virulence and avirulence/virulence formulae of pathotypes have advantage over the use of consecutive numbers or letters given in chronological order of pathotype discovery. As soon as pathotype information exceeds a certain level of complexity, mathematical codes are most advantageous, in particular two codes, octal notation and coded triplets. A more universal adoption of the most appropriate codes is recommended to ease communication and comparisons of results.  相似文献   

12.
The neuropeptide AF2 has a complex set of actions on the dorsal muscle strip of Ascaris suum, including a potentiation of the acetylcholine-stimulated muscle contraction. Caffeine at 100 μm and 5 mm inhibited this potentiation, as did 100 μm theophylline in two out of six studies. The cyclic-AMP-potentiating compounds IBMX, dibutyryl cAMP and forskolin had no effect on the AF2-induced potentiation of the acetylcholine-stimulated muscle contraction. These preliminary data suggest that the potentiating action of AF2 is not mediated by a cAMP pathway.  相似文献   

13.
福寿螺配偶个体大小选择性初步观察   总被引:7,自引:0,他引:7  
通过野外观察与实验研究,掌握了福寿螺的婚配体制及其配偶选择性规律。福寿螺与多数低等动物一样,其婚配属于乱交制,无固定配偶;雌螺对与其交配的雄螺个体大小没有选择性,而雄螺对雌螺的个体大小有选择性,倾向于与较大个的雌螺交配。  相似文献   

14.
15.
Time- and concentration-course studies were conducted to determine the effect of thirteen herbicides on photosynthesis, respiration, RNA synthesis, protein synthesis, and lipid synthesis using isolated single leaf cells. Each herbicide was from a different chemical class. Appropriate 14C-substrates and product purification procedures were used for each process prior to liquid scintillation counting. The most sensitive metabolic site of inhibition was photosynthesis for atrazine, bromacil, dichlobenil, monuron, and paraquat; RNA synthesis for dalapon and dinoseb; protein synthesis for chlorpropham; and lipid synthesis for CDAA, chloramben, 2,4-D, EPTC, and trifluralin. However, with several herbicides, one or more process was almost as sensitive as the one mentioned above. All herbicides inhibited more than one process, and the most sensitive site of inhibition may not be the same process that was inhibited the greatest at the maximum concentration and maximum exposure time used. Therefore, a concept of metabolic sites of action, rather than a primary site of action, appears to be more meaningful for herbicides.  相似文献   

16.
The effects of timing and method of application of Penicillium oxalicum on the control of fusarium wilt of tomato were investigated. Application of P. oxalicum to tomato seedlings in seedbeds reduced disease caused by Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici in a growth chamber by 45–49% and in glasshouse experiments by 22–69%. Disease suppression was maintained for 60–100 days after inoculation with the pathogen in the glasshouse. No disease reduction was observed in tomato plants where P. oxalicum was applied to seeds. Treatment with P. oxalicum did not affect the population of F. oxysporum f.sp. lycopersici in the rhizosphere.  相似文献   

17.
厚朴病虫害种类的初步调查   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用标准地法和线路调查法,对湖北恩施市新塘乡双河厚朴基地的厚朴病虫害进行了系统调查,记录主要虫害13种,其中叶部害虫9种,枝干害虫2种,根部害虫2种。厚朴主要病害5种。藤壶蚧、厚朴枝角叶蜂和厚朴新丽斑蚜为湖北省首次报道,小绿叶蝉为厚朴新寄主记录种。同时记录了藤壶蚧的天敌6种,其中寄生小蜂2种,瓢虫4种;厚朴新丽斑蚜的天敌昆虫8种。对藤壶蚧、厚朴枝角叶蜂和厚朴苗木根腐病等重要病虫害的发生规律进行了初步调查,同时提出了防治建议。  相似文献   

18.
为了研究青稞种子外部和内部携带真菌情况,比较不同杀菌剂对青稞种子的带菌消毒效果和对幼苗生长的影响,为青稞种子播前包衣处理和种传真菌病害防控提供依据,采用离体平皿法对云南迪庆‘云青1号’、‘云青2号’和‘短白青稞’3个主栽品种进行带菌检测,并对种子进行拌种或浸种处理测定6种杀菌剂对种子消毒效果,分析杀菌剂对种子发芽和幼苗生长的影响。结果表明:供试青稞种子表面携带的优势菌群为青霉(Penicilliumspp.)、镰刀菌(Fusariumspp.);种子内部寄藏的真菌主要为镰刀菌、核腔菌(Pyrenophoraspp.)、附球菌(Epicoccumspp.)、丝核菌(Rhizoctoniaspp.)、链格孢(Alternariaspp.)和木霉(Trichoderma spp.)。青稞不同品种的种子表面及内部携带的真菌种类差异较大。致病性测定表明,镰刀菌对种子萌发和幼苗生长影响最大,后期出现幼苗坏死现象。45%咪鲜胺EW、75%百菌清WP、50%福美双WP对青稞种子携带真菌均有显著抑制作用和消毒效果,50%福美双WP消毒效果最优,达100%;45%咪鲜胺EW、75%百菌清WP、50%福美双WP处理对青稞种子发芽和幼苗生长均无显著影响。  相似文献   

19.
调查了甘肃省临洮县为害百合的地下害虫种类, 并以主要发生为害种类为供试对象, 采用拌土法测定了几种生物(源)农药对主要害虫的室内毒力和致死中时。调查发现小云斑鳃金龟Polyphylla gracilicornis、棕色鳃金龟Holotrichia titanis为主要发生及为害种类, 不同时间发生种类存在差异, 9月份以小云斑鳃金龟幼虫发生为害为主, 发生量占地下害虫总数的66.16%, 平均种群密度为10.48头/m2, 10月份, 则以棕色鳃金龟幼虫发生为主, 发生量占地下害虫总数的96.86%, 平均种群密度为7.79头/m2, 主要取食百合根系和鳞茎, 造成根系数量减少, 鳞茎出现不规则褐色缺口或凹陷斑。药剂筛选结果表明, 1.8%阿维菌素乳油、200亿孢子/g球孢白僵菌粉剂对两种蛴螬均具有较高的杀虫活性和速效性, 药后7 d时, 校正死亡率在82.22%以上, 对小云斑鳃金龟幼虫和棕色鳃金龟幼虫的LC50分别为0.161、0.060 mg/g和5.558×107、0.362×107孢子/g, LT50分别为2.237 d(2.2 mg/g)、1.393 d(2.2 mg/g)和6.645 d(40.0×107孢子/g)、4.940 d(2.0×107孢子/g), 这两种生物(源)农药对两种蛴螬的LC50和LT50值均略大于两种化学农药25%二嗪磷乳油、40%辛硫磷乳油处理的, 且对小云斑鳃金龟幼虫的杀虫活性均低于对棕色鳃金龟幼虫的杀虫活性, 致死中时则长于对棕色鳃金龟幼虫的致死中时。  相似文献   

20.
棉花黄萎病菌致病型的AFLP分析   总被引:16,自引:0,他引:16  
 选用41个棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)代表菌系,在温室条件下,对4个棉花品种鄂荆1号(感)、中棉所12(耐)、文-5(抗)和唐棉2号(抗)进行致病性测定,结果可将供试菌系分为落叶型与非落叶型2类。选取8对AFLP引物PCR扩增的结果中,统计带型稳定、清晰且有多态性的条带,共169条作系统聚类分析,将上述菌系分为2大类,第一类为非落叶型菌系,包括10个非落叶型菌系和1个过渡菌系;第二类为30个落叶型菌系。根据聚类分析建立树状图,发现菌系与地理来源存在一定的相关性,而依据菌系致病力强弱分类则相关关系不大。选用25对EcoRⅠ和MseⅠ引物组合,对供试的41个V.dahliae进行AFLP扩增,筛选到2对引物E64(GACTGCGTACCAATTCGAC)、M53(GATGAGTCCTGAGTAACCG)和E49(GACTGCGTACCAATTCCAG)、M65(GAT-GAGTCCTGAGTAAGAG),能分别扩增出433bp和110bp2条仅为V.dahliae非落叶型菌系独有的特异片段,可将落叶型与非落叶型菌系分开,这2条特异片段被命名为EM433和EM110。  相似文献   

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