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乌骨鸡体内鸡肾传染性支气管炎病毒的分离鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
从具有鸡肾型传染性支气管炎临床病变特征的乌骨鸡体内分离到一株病毒。该病毒经鸡胚盲传代后，可引起４０％上鸡胚死亡，并出现典型的侏儒胚；人工感染雏鸡表现为肾肿大和尿酸盐沉积；能干扰新城疫ＬａＳｏｔａ株在鸡胚中的繁殖；病毒对氯仿和乙醚敏感，５６℃水浴３０分钟被灭活，而ＰＨ３和ＰＨ１１；不能直接凝集红细胞，但经１．５％胰酶处理后能凝集鸡红细胞（１；５２），这种血凝性可被传染性支气管炎病毒澳大利亚Ｔ株阳性血 相似文献
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H3N2亚型猪流感病毒中国分离株的克隆纯化及生物学特性 总被引：7，自引：0，他引：7
以有限稀释克隆法对29株H3N2亚型猪流感病毒(SIV)不同地区分离株进行纯化，并对其生物学特性进行了研究。结果，8株对鸡呈现中等致病力，21株对鸡呈现低致病力。不同地区SIV分离株(第5代)的EID50差异较大，以安徽分离株最高，为10^-10.77／0．2mL，其他毒株在10^-5.5～10^-10.56／0．2mL之间。黑龙江省分离株和浙江省分离株的LD50高达10^-2.84／0．1mL，其他分离株在10^-1.17～10^-2.56／0．1mL之间。经鸡胚分离传代后，SIV分离株均能凝集0．7％人“O”型血、绵羊、兔、豚鼠、小鼠、大鼠及鸡的红细胞，其红细胞凝集谱的差异主要表现在对马、牛、驴、猪红细胞的凝集特性上。大部分SIV分离株为热不稳定型，部分毒株表现为中等热稳定型和热稳定型。从其抗原特性看，大部分SIV分离株表现为亲和相，对AIV参考毒株DKUK63和SIV参考毒株SWTN77表现出较高的HI滴度；部分分离株经鸡胚传代后，出现了相别的变异。 相似文献
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用鸡胚培养法和红细胞凝集试验(HA)观察苗药复方提取液在鸡胚中对新城疫病毒的抑制作用。第1组接种病毒尿囊液与苗药复方提取液混合液,鸡胚72 h后存活率为88.9%,HA滴度为0;第1I组接种利巴韦林和病毒尿囊液混合液,鸡胚72 h存活率为47.1%,HA滴度为4log_2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,鸡胚72 h后存活率为0,HA滴度为91og_2;第1V组只接种生理盐水,鸡胚72h存活率为100%,HA滴度0。第1组与第1II组差异极显著(P<0.01),第Ⅰ组与第II组差异显著(P<0.05)。试验表明,苗药复方提取液对鸡胚接种的新城疫病毒有较强的抑制作用。 相似文献
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鸭疱疹病毒Ⅱ型（暂定名）的分离鉴定 总被引：11，自引：3，他引：8
自1990年以来，在福建、浙江和广东等省发生一种以双翅羽毛管淤血呈紫黑色、断裂和脱落以及皮下、脏器（肝脏、胰脏）和肠道（十二指肠、直肠和盲肠）出血为主要特征的新的鸭传染病，暂定名为鸭出血症。我们对从自然感染该病典型病死番鸭脏器中获得的1株含2种病毒粒子（直径大小分别为30－40mm和80－120mm)的分离物，以Ⅰ型雏鸭病毒性肝炎标准阳性血清进行连续4代中和后接种番鸭胚，收集死亡番鸭胚胚液进行病毒纯化、负染、电镜观察和SPF鸡胚接种试验证明获得单一病毒分离株（定名为鸭出血症病毒）。该病毒为不耐酸、不耐碱、不耐热、对氯仿处理敏感、核酸类型为双股DNA的有囊膜病毒，直径为80－150nm；对番鸭胚、鹅胚、麻鸭胚、半番鸭胚、北京鸭胚和SPF鸡胚的致 死率分别为100％、100％、78．3％、60％、82．1％和0％；对10－11日龄番鸭胚的ELD50为10^-7.78/0.2ml；无血凝活性，不凝集“O”型人、鸭、鸡、鹅、家兔、小鼠，豚鼠、猪和绵羊红细胞；经血清中和试验证明该病毒与Ⅰ型雏鸭肝炎病毒、雏番鸭细小病毒、雏鹅细小病毒、鸭瘟病毒无血清学相关性。据以上结果可将该病毒确定为疱疹病毒科成员，但鉴于其与鸭瘟病毒（鸭疱疹病毒Ⅰ型）无血清学相关性，则暂定名为鸭疱疹病毒Ⅱ型，此为国内外首次报道。 相似文献
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鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒试验 总被引：1，自引：0，他引：1
为证明鱼腥草抗新城疫病毒的作用效果,通过接种鸡胚方法,对病毒接种前、接种同时、接种后加药三种方式处理的鸡胚尿囊液血凝效价进行测定。结果显示,在三种不同的加药方式中,不同浓度的鱼腥草提取液都能够降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价;鱼腥草提取液和新城疫病毒同时注入鸡胚时,鱼腥草原液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液于新城疫病毒接种后注入鸡胚时,2倍稀释液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液先于新城疫病毒注入鸡胚时,4倍和8倍稀释液抗病毒效果最好。结果表明,鱼腥草提取液能够抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖;鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒活性与其加药方式及浓度有关。 相似文献
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传染性腺胃炎病毒ZJ_(971)株的一些生物学特性 总被引：1，自引：0，他引：1
传染性腺胃炎病毒 (暂定名 )ZJ971毒株经鸡胚传代 ,可致鸡胚矮小并干扰新城疫在鸡胚中的复制。感染胚尿囊液经 1%的胰酶处理后可凝集鸡和鼠的红细胞。电镜观察可见 80～ 190nm大小的冠状病毒粒子。ZJ971毒株对热 (56℃ )、酸 (pH3)、碱 (pH12 )、乙醚和氯仿敏感 ,对反复冻融、胰酶不敏感。ZJ971毒株与传染性支气管炎病毒M4 1、T、Gray、Holte毒株病毒血清交叉中和的抗原相关R值分别为 :0 0 0 13、0 0 0 0 6、0 0 0 0 5、0 0 0 0 3。人工感染鸡生长发育障碍、胸腺萎缩 ,腺胃指数、腺肌胃指数增加 ,囊体指数下降。上述结果初步显示ZJ971毒株是不同于鸡传染性支气管炎病毒的冠状病毒 ,并首次在实验动物感染成功。 相似文献
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1血凝实验(HA)、血凝抑制实验(HI)简介一些禽病病毒如新城疫病毒、流感病毒、传染性支气管炎病毒(经浓缩和酶处理后)、腺病毒127株及几种支原体具有凝集红细胞的活性(血凝素-神经酸酶HN蛋白与红细胞表面受体结合)。这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制,即血凝抑制实验(HI)。用该实验可检测鸡体注苗后抗体应答水平及证实是否曾受感染。HI实验的基本成分是血凝(HA)抗原,系列稀释的血清和红细胞悬液(0·5%~1·0%)。实验可在小试管或微量板(96孔V型板)中进行。生产中一般多用固定抗原稀释血清法(β-法),而很少用固定血清稀释抗原… 相似文献
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为研究板蓝根和黄芪复方提取液对鸡传染性支气管炎病毒（IBV）致鸡胚矮小化的影响,将IBV分别与不同浓度提取液感作后接种于9日龄鸡胚,孵育,分别测定接种病毒、药液和病毒与药液混合液后48h、72h、96h、120h、144h和168h鸡胚的体重与卵重的比值（EE值）和试验组EE值与空白对照组平均EE值的比值（EE指数）的变化。结果表明,浓度为1．00g／ml、0．50g／ml的板蓝根和黄芪提取液对IBV致鸡胚矮小化具有显著的抑制作用。 相似文献
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应用鸡胚法氏囊原代细胞培养鸡IBDV的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
试用鸡胚法氏囊奈代细胞传代，增殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），均不同程度地产生特征性细胞病变效应，采用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ和细胞毒回归鸡试验证实，ＩＢＤＶＨ株组织感毒适应于鸡胚法氏囊细胞，并随传代次数增加，病毒增殖能力增强，而在鸡胚成纤维细胞上盲传２代之后才开始出现细胞病变效应，比较了ＩＢＤＶ在鸡胚法氏囊细胞和鸡胚成纤维细胞上增殖能力的差异，讨论了培养基ＰＨ值，小牛血清浓度对鸡胚法氏囊细胞培 相似文献
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致麻鸭产蛋下降的副粘病毒的分离和鉴定 总被引：16，自引：1，他引：16
从浙江省某麻鸭养殖基地产蛋锐减的病鸭生殖器官分离到1株致产蛋下降、不致鸭死亡的病毒株(YH99V)。该病毒易感蛋鸭，经SPF鸡胚传至第9代时致病性突然增强，第11代出现对鸡红细胞的血凝特性，通常在42～80h致死SPF鸡胚，EF15EID50为10^1.8。经磷钨酸负染电镜观察，YH99V粒子呈现圆形、杆状形、葫芦状形等多形态，直径70～400nm不等，病毒外表有囊膜，囊膜外层有排列整齐的纤突。病毒粒子和包涵体位于细胞浆内。病毒抵抗力由弱到强依次为：0．2%甲醛、24h-56℃、45min→紫外线、1h→乙醚≈氯仿≈37℃、16h—pH9→pH5→1％Try。对人眼结膜易感，鸭眼结膜不易感。接种传代细胞BHK-21、IBRS-2均能引起细胞病变。YH99V株与同样引起鸭产蛋下降的AIV、鸭源EDSV无抗原相关性，而能被禽副粘病毒Ⅰ型阳性血清中和。根据试验结果，初步将YH99V判定为鸭副粘病毒。 相似文献
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本文通过鸡胚接种的方法就蜂胶乙醇浸出物对禽流感H9亚型Shandong／chicken／98株的灭活作用进行了研究。结果表明，常温下3分钟、30分钟，37℃3分钟、30分钟，含蜂胶乙醇浸出物0．1mg/mL的95％乙醇稀释液，含蜂胶乙醇浸出物2．5mg／mL的47．5％乙醇稀释液。含蜂胶乙醇浸出物10mg/mL的生理盐水稀释液，接种鸡胚后病毒HA测定为0。这充分说明以上浓度蜂胶乙醇浸出物对禽流感H9亚型Shandong／chicken／98株具有完全的灭活作用。37℃3分钟、30分钟，含蜂胶乙醇浸出物0．1mg／mL的47．5％乙醇稀释液，含蜂胶乙醇浸出物6．25mg/mL的生理盐水稀释液对禽流感H9株有部分灭活作用。 相似文献
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影响口蹄疫正向间接血凝试验因素的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
对影响口蹄疫正向间接血凝试验的血凝反应板，温度，稀释液的pH值及稀释液中兔血清的加入量进行了反复试验，结果表明血凝反应板只能用V型96孔110°血凝反应板，反应温度以20～25℃为宜，稀释液的pH值可控制在7．4～7．8，兔血清加入量以1％～2％为好。 相似文献
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试用鸡胚法氏囊原代细胞传代、增殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），均不同程度地产生特征性细胞病变效应。采用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ和细胞毒回归鸡试验证实，ＩＢＤ－ＶＨ株组织毒适应于鸡胚法氏囊细胞，并随传代次数增加，病毒增殖能力增强；而在鸡胚成纤维细胞上盲传２代之后才开始出现细胞病变效应。比较了ＩＢＤＶ在鸡胚法氏囊细胞和鸡胚成纤维细胞上增殖能力的差异，讨论了培养基ＰＨ值、小牛血清浓度对鸡胚法氏囊细胞培养及病毒增殖的影响。 相似文献
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鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及其N基因片段的克隆和测序 总被引：4，自引：0，他引：4
通过形态学观察、动物回归试验、鸡胚接种试验、病毒干扰试验以及血凝试验分离鉴定了1株肾型鸡传染性支气管炎病毒(IBV)。在透射电子显微镜下，病毒粒子多呈球形，直径为80～120nm，有囊膜，表面有冠状突起。鸡胚连续盲传至第1～2代，开始出现死亡或出现侏儒胚；分离株可显著干扰NDV在鸡胚中的增殖；病毒尿囊液无凝血活性，但经5g／L胰蛋白酶处理后。能够凝集10mL/L的鸡红细胞。利用RT—PCR技术对分离株的N基因进行了扩增，经克隆、序列测定和分析比较，证实分离株为肾型IBV，命名为AH3—04株。 相似文献
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本试验主要从红细胞凝集谱、凝集解脱情况以及血凝性的影响因素几方面对本室分离的ＥＤＳ－ＢＨ９１毒株和ＥＤＳ－７６ＡＶ１２７毒株进行了比较系统的测定．试验结果表明：两毒株均能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，而且２４小时内无解脱现象；对兔红细胞呈可疑；对人、奶牛、绵羊、猪、小鼠、驴的红细胞不能凝集。血凝反应的最适温度为３７℃；最适红细胞浓度为１％；分别以ｐＨ７．４．浓度为０．ｏ１、０．０４、０．１、０．２Ｍ以及浓度为０．ｏ１Ｍ，ｐＨ为５．８、６．８、７．４和８．０的ＰＢＳ作为稀释液进行血凝试验．其血凝滴度无显著差异；０．０５～０．３％的甲醛溶液４℃下处理病毒７２小时以及反复冻融病毒５次，其处理前后的血凝性均无显著差异。８０℃１０分钟就可以破坏病毒血凝性，而５６℃作用１小时对病毒血凝性无影响。０．１２５～０．５００％的胰酶对血凝性的影响不明显；病毒对氯仿不敏感，属于无囊膜病毒。 相似文献
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为了确定深圳出入境检验检疫局和深圳太太基因工程有限公司联合研制的禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒对H5和H9亚型禽流感的灵敏度，通过测定已知鸡胚半数致死量（ELD50）的标准毒株的进行了定量。利用9～11日龄SPF鸡胚，对深圳出入境检验检疫局保存的H5和H9亚型标准禽流感毒株进行了鸡胚半数致死量（ELD50）的测定，结果为H5亚型禽流感毒株的半数致死量为10^-7.75/0．2mL，H9亚型禽流感毒株的半数致死量为10^-8.5／0．2mL。用所研制的禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒对H5和H9亚型标准禽流感毒株原液进行10倍连续稀释，进行实时荧光RT-PCR灵敏度的测定，结果发现：试剂盒检测H5亚型标准禽流感毒株的灵敏度为标准毒株10^-5倍稀释液，该稀释液含有281ELD50病毒量；检测H9亚型标准禽流感毒株的灵敏度为标准毒株10^-8倍稀释液，该稀释液含有15．8ELD50病毒量。同时检测H5和H9时，试剂盒的灵敏度要比单独检测一个亚型时的灵敏度增加一个数量级。本灵敏度已经能够检测到感染鸡的喉拭子和（或）泄殖腔拭子所采集的病毒量，能够满足检验检疫的实际需要。 相似文献
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采用鸡胚接种和细胞培养的方法，从广西武鸣县某鹅场患病鹅脑、肝、脾中分离获得了2株病毒；经RT-PCR、HA和HI试验等研究，证实其为鹅副黏病毒。经测定，分离毒23-7-F3株的ELD50为10^-7.25／0．1mL。TCID50为10^-6／0．1mL，MDT为38．8h，ICPI为2。将该分离毒10倍稀释，接种鸡胚成纤维细胞，40h后出现细胞病变，证实该分离毒为强毒株。病毒能凝集鸡、番鸭、鸽、猪、山羊、兔、豚鼠、黄鳝及人O型红细胞。56℃10min、60℃10min、pH4溶液处理1h均不能使该病毒灭活，而50mL／L氯仿处理10min、60℃水浴30min能灭活该病毒。人工感染的11日龄雏鸡全部发病和死亡；感染的10日龄雏鹅60％发病，发病鹅全部死亡；感染的30日龄肉鸽发病率达83．3％(5／6)，死亡率100％。对1日龄肉鸭无致病性。 相似文献