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1.
用切割法采集卵泡液,收集卵丘一卵母细胞复合体（Cumulus oocytes comlexs,COCs）和自然裸卵,将部分COCs去除卵丘细胞获得机械裸卵,COCs放入体外成熟培养液中培养为成熟卵母细胞,加入获能的精子液,进行体外受精。结果表明：卵母细胞的体外成熟率和卵裂率与卵泡直径密切相关,大卵泡（80．95％,P〈0．01）和中等卵泡（75．50％,P〈0．05）的卵母细胞成熟率高于小卵泡（50．27％）;犬卯泡（53．53％）和中等卵泡（47．13％）的卵裂率显著高于小卵泡的32．26％（P〈0．05）。COCs、机械裸卵和自然裸卵的体外成熟率分别为75．0％、54．2％和10．5％,差异极显著（P〈0．01）,卵裂率分别为53．8％、10．8％和0％,差异极显著（P〈0．01）。对照组和1×10^5、1×10^6个／mL颗粒细胞组卵母细胞体外成熟率分别为68．6％、69．6％和67．8％,无显著差异（P〉0．05）,但均显著高于1×10^7个／mL（51．5％,P〈0．05）和1×10^10个／mL（35．5％,P〈0．05）颗粒细胞组,但各组间的体外受精率无显著差异（P〉0．05）。结果提示,大卵泡和中卵泡的卵母细胞的体外成熟率和卵裂率显著高于小卵泡,体外成熟培养液中添加高浓度的颗粒细胞能显著抑制卵母细胞的体外成熟。 相似文献
2.
不同因素对牛卵母细胞体外成熟培养效果的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
文章主要从采集方法、性周期阶段以及培养液中FBS浓度3个方面对牛卵母细胞体外成熟的影响进行了分析。结果表明：①不同采卵方法的采卵效果存在差异,但成熟培养和体外受精情况差异不显著（P〉0．05）;②从卵泡期和黄体期卵巢采集到的卵母细胞的体外成熟率和卵裂率分别,为59.7%,56．6％和39．5％、36．6％,没有显著差异（P〉0．05）;③培养液中添加20％FBS组的卵母细胞成熟率和卵裂率显著高于10%FBS和30%FBS组（P〈0．05）. 相似文献
3.
不同细胞因子对山羊卵母细胞体外成熟与早期胚胎发育的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
研究在培养液中添加不同浓度的GDNF、LIF、SCF及其不同组合对山羊卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响。结果表明：SCF、LIF、GDNF对山羊卵母细胞体外成熟有显著影响（62．0％、75．5％、63．7％vs53．0％,P〈0．05）,不同浓度间无显著影响（P〉0．05）,添加LIF、GDNF对卵裂率有显著影响（48．1％、43．3％vs26．2％,P〈0．05）,SCF对卵裂率无显著影响（37．6％vs26．2％P〉0．05）,不同细胞因子都能显著提高囊胚率（21．6％、27．3％、26．2％vs6．3％,P〈0．05）。10IU·mL^-1的LIF、15Iu·mL^-1的GDNF和15IU·mL^-1的SCF对山羊胚胎体外生产最好;GDNF＋LIF＋SCF组和GDNF＋LIF组卵母细胞成熟率显著高于LIF＋SCF,GDNF＋SCF,GDNF和LIF组（83．3％、80．3％vs72．8％、65．4％、63．3％、77．9％,P〈0．05）,GDNF＋SCF和LIF＋SCF添加组间对卵母细胞体外成熟无差异（72．8％vs65．4％,P〉0．05）,早期胚胎发育上GDNF＋LIF＋SCF组优于GDNF＋LIF、LIF＋SCF和GDNF＋SCF组,且均能显著提高卵裂率（50．2％、48．9％、47．9％、43．7％vs21．4％,P〈0．05）和囊胚率（31．3％、27．6％、25．5％、24．3％vs13．6％,P〈0．05）。可见GDNF、LIF和SCF能提高卵母细胞的成熟率,早期胚胎的卵裂率和囊胚率,LIF和GDNF对卵母细胞体外成熟有协同作用。 相似文献
4.
试验旨在研究不同种类、不同浓度的糖对牦牛卵母细胞体外成熟和发育能力的影响,进一步探索和优化牦牛卵母细胞培养体系,提高卵母细胞体外成熟和胚胎生产效率。在牦牛卵母细胞成熟液中添加不同浓度（0、5和10 mmol/L）的葡萄糖或蔗糖,培养24 h或预培养2 h后移入无糖培养基中继续培养22 h,统计卵母细胞体外成熟率及体外受精（IVF）后的胚胎卵裂率和囊胚率。结果显示,与对照组（0 mmol/L）相比,5和10 mmol/L葡萄糖组牦牛卵母细胞核成熟率和体外受精胚胎卵裂率均显著提高（P<0.05）,10 mmol/L葡萄糖组的囊胚率最高,且与对照组相比差异显著（P<0.05）。添加10 mmol/L蔗糖可以显著提高牦牛卵母细胞核成熟率（P<0.05）,但胚胎囊胚率与对照组相比差异不显著（P>0.05）。此外,用10 mmol/L葡萄糖预处理牦牛卵母细胞后其核成熟率、胚胎卵裂率和囊胚率最高,且均显著高于对照组（P<0.05）。由此可见,糖对牦牛卵母细胞体外成熟和发育有一定的影响,在成熟过程中添加适当浓度的糖能提高卵母细胞成熟率及体外受精胚胎发育能力。 相似文献
5.
EGF和IGF-I对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
本文研究了EGF、IGF-I以及EGF和IGF-I联合对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响,以确立绵羊卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明：50ng／mL的EGF的成熟率和卵裂率分别为71．2％和45．5％,显著高于对照组和10、20、30、40ng／mL组（P〈0．05）,当EGF浓度达到100ng／mL时,成熟率和卵裂率最高,分别为72．9％和45．7％;40ng／mL IGF-1的成熟率和卵裂率分别为70．7％和58．5％,显著高于对照组和10、20、60、80、100ng／mL组（P〈0．05）,当IGF-I的浓度为100ng／mL时,成熟率和卵裂率最低,分别为38．8％和20．0％,与对照组和其它各试验组差异显著（P〈0．05）;50ng／mLEGF和40ng／mLIGF-I联合使用,成熟率和卵裂率分别为85．6％和61．0％,同对照组和50ng／mLEGF组、40ng／mLIGF-I组之间差异显著（P〈0．05）。 相似文献
6.
曲古抑菌素A（Trichostatin A,TSA）是一种组蛋白去乙酰化抑制剂,用TSA处理鼠核移植胚胎可显著提高胚胎的囊胚率。检验TSA对猪卵母细胞体外成熟以及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟液及胚胎培养液中添加TSA,比较不同浓度TSA对卵母细胞成熟的影响,不同浓度TSA对孤雌胚胎发育能力的影响以及TSA处理不同时间对孤雌胚胎发育能力的影响。结果发现：（1）5nmol／LTSA处理对卵母细胞体外核成熟无显著影响,却显著提高了卵母细胞孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率（P〈0．05）;（2）50nmol／LTSA处理显著提高了孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率（P〈0．05）;（3）50nmol／LTSA处理24h能显著提高胚胎的卵裂率及囊胚率（P〈0．05,82．1％±2．6％和37．4％±3．1％）。结果表明TSA对猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎发育具有显著的促进作用。5nmol／L的添加量对卵母细胞的体外胞质成熟具有促进作用;胚胎培养基中添加50nmol／LTSA处理24h能提高孤雌胚胎的发育能力。 相似文献
7.
牛胚胎体外生产技术的简化研究 总被引：2，自引：0，他引：2
利用屠宰牛卵巢分离的卵母细胞，以卵裂率和囊胚发育率为标准，对牛胚胎体外生产过程进行了简化试验。结果显示：不加卵丘细胞的高密度卵母细胞体外成熟（１００￣２００枚／平皿）可代替加卵丘细胞的标准密度（５０枚／平皿）培养，其卵裂率（５７．６％比６２．５％）和囊胚发育率（２３．７％比２９．１％）没有显著差异（Ｐ〉０．０５），体外授精时间可从成熟培养后２２ｈ延长至２７ｈ，卵裂率和囊胚发育率均没有显著变化，卵母 相似文献
8.
从屠宰场采集的卵巢567枚，用抽吸法获COCs2851枚，其中适宜体外成熟培养的A、B级COCs1129枚，获可用COCs2．0枚／卵巢；繁殖季节的卵巢平均回收COCs数、COCs可用率和平均可用卵数分别为5．8枚、49．2％、2．9枚，均较非繁殖季节高（分别为4．7、34．5％、1．6），山羊发情较为集中的秋季卵巢卵母细胞的回收数和可用数均较其他季节高。对2种来源的屠宰场卵母细胞进行体外成熟培养，结果显示来源于“烫毛＋烤皮”屠宰方式的卵母细胞体外成熟率为84．5％；来源于“屠宰＋烫毛”，不经过烤皮处理的屠宰场卵母细胞体外成熟率为90．4％，二者无显著性差异（P〉0．05），说明屠宰时经高温处理羊只的卵巢卵母细胞也能在体外培养中继续发育成熟；试验采用的成熟液和培养体系较适合山羊卵母细胞的体外成熟。 相似文献
9.
氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎体外发育的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
将从绵羊卵巢采集的卵母细胞成熟培养22-24h;成熟卵母细胞去除颗粒细胞,选择排出第一极体的卵母细胞,用5μmol／LA23187（5min）联合2mmol／L 6-DMAP（4h）进行孤雌激活;激活后的卵母细胞在培养液中进行培养。研究氨基酸和半胱胺对绵羊胚胎早期体外发育的影响。结果显示：（1）氨基酸能促进胚胎体外发育,0-24h培养添加抑制卵母细胞的卵裂,24h后培养添加比全过程培养添加更能促进胚胎体外发育;（2）24～72h培养添加必需氨基酸（EAA）,能促进胚胎体外发育;（3）半胱胺添加量0～100μmol／L,随浓度增高各项发育指标呈增高趋势,添加100～200μmol／L,随浓度增高各项发育指标呈下降趋势。 相似文献
10.
犬卵母细胞体外成熟的影响因素 总被引：8，自引：0，他引：8
采集发情期和间情期犬卵巢,回收大腔（直径大于１ｍｍ）卵泡和不可见卵泡的卵母细胞,在４种成熟液（ＴＣＭ１９９＋２０％ＦＣＳ,ＴＣＭ１９９＋２０％ＦＣＳ＋１０ＩＵ／ｍＬＦＳＨ,ＴＣＭ１９９＋２０％ＥＤＳ和ＴＣＭ１９９＋２０％ＥＤＳ＋１０ＩＵ／ｍＬＦＳＨ）中成熟后进行了受精试验。结果：（１）发情期大于２ｍｍ和１～２ｍｍ的大腔卵泡卵母细胞的体外成熟率（４２．５％,３２．５％）显著高于间情期卵母细胞（２０．４％）,但发情犬不可见卵泡卵母细胞的体外成熟率（２８．９％）与间情期卵母细胞差异不显著;（２）在成熟液中添加促性腺激素,能有效地提高卵母细胞成熟率,不可见卵泡的卵母细胞对促性腺激素的依赖性（３０．０％比７．８％）大于大腔卵泡的卵母细胞（４２．５％比２９．０％）;（３）卵丘扩散与卵母细胞成熟存在相关性;（４）ＥＤＳ可诱导卵丘扩散,但不能有效提高卵母细胞的成熟率;（５）发情期卵巢上的大腔卵泡和不可见卵泡的卵母细胞以及间情期卵巢不可见卵泡的卵母细胞体外培养后,与体外获能的精子进行体外受精,其卵裂率分别为１６．０％（４／２５）,０％（０／４０）和２．５％（１／４０）。 相似文献
11.
Thanh Quang DANG‐NGUYEN Tamas SOMFAI Seiki HARAGUCHI Kazuhiro KIKUCHI Atsushi TAJIMA Yukio KANAI Takashi NAGAI 《Animal Science Journal》2011,82(3):374-382
The pig is considered to be a suitable source of cells and organs for xenotransplants, as well as a transgenic animal to produce specific proteins, given the biological similarities it shares with human beings. However, the in vitro embryo production system in pigs is inefficient compared with those in other mammals, such as cattle or mice. Although numerous modifications have been applied to improve the efficiency of in vitro embryo production systems in pigs, not much progress has been made to overcome the problem of polyspermy, and low developmental ability due to insufficient cytoplasmic abilities of in vitro matured oocytes and improper culture conditions for the in vitro produced embryos. Recent achievements, such as the establishment of chemically defined medium and utilization of ‘zona hardening’ technique, have gained some success. However, further research for the reduction of polyspermy and detrimental effects of the culture systems in pigs is still needed. 相似文献
12.
山羊体外受精技术的研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
本文主要阐述了山羊体外受精技术,特别是山羊卵母细胞的采集和体外成熟,体外受精以及胚胎培养过程中的一些研究进展,及其山羊体外受精技术的非常广阔的前景。 相似文献
13.
鹿类体外受精技术研究现状 总被引：1，自引：0，他引：1
鹿类体外受精技术研究方面已有新西兰和法国的技术体系,但培养系统尚未建立,还处在起始阶段。作者阐述了鹿卵巢的采集、运输和卵母细胞的采集;卵母细胞的体外成熟培养;精子的体外获能和体外受精及受精卵的体外培养等方面研究报道的一些试验技术和方法。 相似文献
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本文阐述了体外受精技术在牛胚胎工程和育种研究中的意义,介绍了牛体外受精技术的研究历史和目前的研究进展,对牛IVF技术的技术指标现状及经济效益进行了评估,并就牛的体外受精技术当前研究存在的问题作了评述,对其前景做了展望。 相似文献
15.
文章从卵母细胞的来源、精子体外获能、卵母细胞体外成熟、体外受精和体外受精早期胚胎培养五个方面综述了牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展.同时指出了影响精子体外获能的因素、影响卵母细胞成熟培养的因素、体外受精存在的问题及解决办法等.并且对影响该技术的主要因素进行了系统分析. 相似文献
16.
牛卵泡卵母细胞体外受精和发育的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
利用屠宰黄牛卵巢作为供试材料 ,对卵巢表面 2～8mm卵泡卵母细胞体外受精(IVF) -受精卵的体外发育 (IVD)进行了系列研究 ,采用上游法、Percoll法和本实验室沿用的直接洗涤法处理牛冻精 ,观察 3种精子处理方法处理牛冷冻精子对卵母细胞体外受精胚胎发育的影响。实验结果 ,就卵裂率指标 ,采用Percoll法处理的精子进行卵母细胞体外受精 ,和上游法及洗涤法分别比较 ,差异均不显著 (P >0 .0 5 ) ;桑囊率指标 ,只有上游法比洗涤法高 ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ,其余差异均不显著。以FERT -TALP液作为受精液采用常规培养方法 ,精卵作用 18～ 2 0h后分开 ,与精卵作用 6～ 8h后分开卵母细胞受精后的 8-细胞发育率及桑囊率变化不大 (P >0 .0 5 ) ;卵裂率指标 ,18～ 2 0h处理组高于 6～ 8h处理组 ,但两组之间差异也不显著。表明 ,在生产中采用FERT -TALP液做为受精液 ,应用上游法处理精子 ,不需要另购试剂 ,精卵孵育时间由 18～ 2 4h缩短至 6～ 8h是可行的 ,其现实意义是可以简化胚胎体外生产的程序 ,节省人力 ,降低成本 相似文献
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牛的体外受精技术研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
本文阐述了体外受精技术在牛胚胎工程和育种研究中的意义，介绍了牛体外受精技术的研究历史和目前的研究进展，对牛体外受精技术的技术指标现状及经济效益进行了评估，并就牛的体外受精技术当前研究存在的问题作了评述，对其前景做了展望。 相似文献
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通过比较参与受精的卵母细胞颗粒细胞存在与否、精子上浮时间、精卵共孵育时间、不同受精液等4个方面的因素,研究这些因素对猪卵母细胞体外受精后胚胎发育能力的影响,以求找到最佳的猪卵母细胞体外受精体系。将选择带有不同颗粒细胞的卵丘卵母细胞复合体分为3组：含全部颗粒细胞、2~3层颗粒细胞和裸卵;调整精子在受精液里的上浮时间为0、30、60、120min研究其受精能力;比较3、6、20h精卵共孵育时间对体外受精的影响;结果表明：在本试验体系下,在mTBM受精液中,将精子上浮处理60min,与含2~3层颗粒细胞的卵丘-卵母细胞复合体共孵育6h的IVF体系最为有效,其卵裂率为（77.6±2.3）%,囊胚率为（25.7±2.6）%。 相似文献
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牛早期胚胎体外发育条件的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
本试验研究了精卵共育时间和培养液等因素对牛早期胚胎体外发育的影响。精卵共育6～12h能显著提高受精卵的囊胚发育率,受精卵的囊胚发育率为23．2％～25．3％,共育时间为24h时,囊胚发育率降低,但精卵共育6h时卵裂率较低;TCM199、mBECMaa、mSOFaa均能支持体外受精卵的发育,其囊胚发育率分别为18％、30．7％和29．2％。试验结果表明：精卵于BM受精液中共育9h后,将其置于添加5％OCS的mBECMaa或mSOFaa中培养,能得到较高的体外生产胚胎的囊胚发育率。 相似文献