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《中国草食动物科学》2017,(3)
为了探讨温度对基因组DNA提取质量的影响,以荷斯坦牛血液为实验材料,采用DNA提取试剂盒法在4℃和常温下提取牛血液DNA。结果表明:在4℃下提取的DNA质量要明显高于常温下所提取的。该研究对于提高DNA提取质量具有一定的参考价值。 相似文献
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运用建立的质量控制图,监控不同实验条件对布鲁氏菌试管凝集实验结果可能造成的影响。在每次日常检测时对标准阳性血清进行试管凝集实验并使用浊度仪测量其上清液的光密度(OD值),在收集足够有效数据后,绘制当前条件下的质量控制图。通过模拟日常实验条件下孵育温度、时间等容易产生偏离的条件,记录不同实验条件下标准阳性血清试管凝集实验后上清液的OD值,绘制控制用控制图。运用绘制的质量控制图对不同实验条件进行监控,发现孵育温度和孵育时间均对实验结果产生较大影响,从而导致失控。采用质量控制图对布鲁氏菌试管凝集实验进行监控,可提高质量监控的有效性、科学性。严格控制实验条件是保证实验结果的重要前提。 相似文献
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猪精子RNA提取的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
实验采用Trizol一次法或试剂盒提取猪精子的总RNA,然后通过RT-PCR扩增的方法,检测精子和睾丸组织中鱼精蛋白(PRM-1)的mRNA;使用不同数量的精子,检测在本实验条件下能扩增出PRM-1带所需要的最小精子数量;通过OD260/280的测算,判断不同提取方法所得RNA的纯度;通过琼脂糖电泳得到精子RNA与睾丸、卵巢组织RNA的电泳图。实验结果表明:在使用RNA沉淀剂时,1.51×107精子可检测到PRM-1的mRNA,不使用沉淀剂则需要3.02×107精子才检测到;使用Trizol一次法提取的精子总RNA纯度较常规Mini试剂盒(W6221)高;本实验首次得到猪精子总RNA的普通琼脂糖凝胶电泳图。初步研究的结果表明,Trizol一次法可用来提取精子总RNA供进一步研究;猪精子RNA的28S和18S片段与睾丸、卵巢组织无明显差异。 相似文献
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鹌鹑血液中小分子RNA表达的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
利用改进的Trizol法首次从鹌鹑血液中提取小分子RNA,比较小分子RNA在组织与血液中的表达差异,为简化小分子RNA的提取程序,提高实验研究效率以及探讨小分子RNA的遗传特性提供可供借鉴的资料.结果发现:①改进Trizol法提取血液中的总RNA,效果显著,条带清晰;②发现血液中只存在一种小分子miRNAs(18～22bp);③影响小分子RNA提取效率的关键因素包括样本的新鲜程度和RNA酶的污染.研究结果表明,通过改进的Trizol法提取血液中小RNA方法是可行的,小分子KNA在家禽血液中的表达具有特异性,snoRNAs,piRNAs在血液中不表达. 相似文献
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米糠植酸提取的优化研究 总被引：4，自引：0，他引：4
实验以米糠为原料,采用盐酸提取法提取米糠中的植酸。研究单因素条件下盐酸浓度、作用时间、温度对植酸提取量的影响,利用正交实验进行优化研究,得到了最佳的提取条件:酸浓度0.6%、时间5h、温度30℃,提取率可达70.10%。 相似文献
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《江西饲料》2020,(2)
为了研究藜蒿叶中总黄酮的提取工艺优化,通过乙醇回流法,采用单因素实验法和正交实验法确定藜蒿叶总黄酮的最佳提取工艺条件。单因素实验结果表明:总黄酮提取率随着液固比的增大逐渐增大,当液固比大于20mL/g时,总黄酮提取率开始减小;总黄酮提取率随着提取温度的增大逐渐增大,在提取温度为70℃时总黄酮得率达到最大值之后开始下降;总黄酮提取率随着提取时间的增大呈现先增大后减小的趋势,在提取时间为1.5h时总黄酮提取率达到最大值。正交实验结果表明:在液固比15mL/g、提取温度60℃、提取时间1.5h的条件下是乙醇回流法提取藜蒿叶中总黄酮的最佳提取工艺条件,此条件下总黄酮提取率为3.960%;在液固比、提取温度、提取时间3个因素对藜蒿叶总黄酮提取率的影响中,液固比的不同对其影响是显著的。 相似文献
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以猪用中草药饲料添加剂浸提工艺中浸膏的水溶性固形物浸出率为质量控制指标,采用正交试验L9(34)对天然中草药饲料添加剂的浸提工艺进行了优选。实验以提取次数、提取温度、提取时间及加水量为因素,每个因素分三个水平。结果表明提取次数对质量控制指标的影响最大,差异较显著(P<0.05),提取温度、提取时间影响次之,加水量影响较小。并得出用10倍加水量在75℃下提取1h,共提取3次为最佳浸提工艺条件。 相似文献
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目的：研究Trizol RNA提取法、杭州博日吸附柱RNA提取法、Promega核酸提取仪磁珠RNA提取法、西安天隆核酸提取仪磁珠RNA提取法、Thermo核酸提取仪磁珠RNA提取法等五种不同核酸提取方法对不同含量猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性样品的相对提取效率,为动物疫病监测诊断实验室核酸提取方式的选择提供技术参考。方法用五种不同核酸提取方法对4份10倍梯度稀释的PRRSV阳性血清、2份PRRSV阳性组织悬液及其离心后的上清液共8份样品同时进行核酸提取,用荧光RT-PCR方法进行检测,获取各样品PRRSV荧光RT-PCR结果的CP值,分析五种提取方式的相对提取效率。结果对合适的提取样品,磁珠提取法相对提取效率最高,吸附柱法其次,Trizol提取法相对效率较差;在三种磁珠提取法中,提取效率相差在2个CP值内,差异不明显,但以天隆磁珠提取法提取效率更高。结论预装试剂结合仪器自动化操作的磁珠法提取效果稳定,效率最高;国产仪器国产试剂提取效率不亚于进口仪器和试剂。 相似文献
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以青海玉树产黑青稞为原料,研究了提取剂类型、酸化剂类型、提取剂浓度、提取时间、提取温度等单因素对黑青稞花青素提取率的影响,在此基础上,采用三因素三水平正交试验法优化了花青素提取工艺,并分析了黑青稞花青素的抗氧化活性。试验结果表明,对黑青稞花青素提取率影响最大的是乙醇浓度,其次是提取温度和提取时间,最佳提取工艺为:60%乙醇、提取温度为60℃、提取时间为3.0h,在此条件下,花青素提取率为1.86ug/g;黑青稞花青素质量浓度与羟自由基清除率呈一定量效关系。试验结果可为综合开发利用黑青稞资源,延长黑青稞加工产业链提供一定参考依据。 相似文献
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为研究不同干燥温度和提取方法对1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)提取量的影响,收割新鲜的蛋白桑(Morus alba)在不同温度下干燥后,分别用酸提法、水提法、醇提法提取其中的DNJ。提取液用柱前衍生高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD)测定DNJ含量。测定结果表明,采用盐酸提取法时,蛋白桑最佳干燥温度为90℃,DNJ提取量为3.38mg·g~(-1),显著高于其他温度干燥下的提取量(P0.05);采用水提取法时,蛋白桑最佳干燥温度为80℃,DNJ提取量为1.91mg·g~(-1),显著高于其他温度干燥下的提取量(P0.05);采用乙醇提取法时,蛋白桑最佳干燥温度为100℃,DNJ提取量为3.77mg·g~(-1),显著高于其他温度干燥下的提取量(P0.05);对相同处理的样品,不同提取方法的提取量差异显著(P0.05),乙醇提取法的DNJ提取量最高,盐酸提取法的DNJ提取量较高,水提取法的DNJ提取量最低。 相似文献
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桑枝皮具有多种药用功效,其主要活性成分之一为黄酮类化合物。采用乙醇浸提法提取桑枝皮中的黄酮类化合物,在单因素试验考察提取温度、原料质量浓度、溶剂乙醇的浓度以及提取时间等因素对桑枝皮总黄酮提取效果的影响基础上,采用正交试验优化提取工艺条件。提取工艺条件中各因素对桑枝皮总黄酮提取效果的影响程度依次为乙醇体积分数提取温度提取时间原料质量浓度。确定桑枝皮总黄酮提取的最佳工艺条件为:提取温度80℃,原料质量浓度33g/L,乙醇体积分数70%,提取时间120min。在此条件下,桑枝皮总黄酮的提取率可达1.01%。 相似文献
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一种桑树RNA的提取方法 总被引：3，自引：0，他引：3
核糖核酸(RNA)是分子生物学研究的重要材料之一,Northern杂交分析、cDNA文库构建、离基因和研究基因的转录调控都需要有一定纯度和完整性的RNA。然而,一些高等植物的组织中往往存在大量的多糖类、酚类和一些次生代谢产物物质,对RNA的分离和纯化产生很大干扰,因此能否有效地去除多糖、酚类化合物、Rnase和干扰RNA提取的其它代谢产物,是提取高质量植物组织中RNA的关键。作者以桑树为试验材料,通过某些提取步骤的优化和改进,得到了符合实验要求的总RNA,可提供有关桑树分子生物学实验利用. 相似文献
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以三月红荔枝果皮为试验材料，通过采用改良CTAB法、SDS法、改良SDS法、改良Bugos法和RNAplant plus Reagent试剂盒（TIANGEN公司）提取总RNA，采用浓度检测、纯度检测、RT-PCR等方法进行提取结果检测，进而筛选出最佳的提取方法。结果表明，这五种方法都能从三月红荔枝果皮中提取出总RNA，但总RNA浓度和纯度有明显的差异。其中采用改良Bugos法、改良SDS法和RNAplant plus Reagen试剂盒提取RNA的浓度较高；采用改良CTAB法和RNAplant plus Reagen试剂盒提取的总RNA纯度较高，完整性较好。采用SDS法、改良SDS法和改良Bugos法所提取的荔枝果皮总RNA纯度低，降解严重。经RT-PCR验证，采用改良CTAB法和RNAplant plus Reagen试剂盒均能扩增得到200bp的18sRNA编码基因片段。综合以上各项检测的结果，改良CTAB法为提取荔枝果皮总RNA的最佳方法，总RNA质量和得率满足后续分子生物学实验的需要。 相似文献
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