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刘立华 《畜牧兽医科技信息》2003,19(8):61-61
2002年,上海市科技兴农重点攻关项目立项招标,攻克猪肉瘦肉精检测难题。由上海市畜牧兽医站联合上海市农科院、上海普飞生物技术有限公司组成的攻关团队中标。目前已开发出了国产瘦肉精检测试剂盒,经过近5000份样品的实样检测, 相似文献
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根据乙型肝炎S基因序列,设计套式PCR引物,通过优化建立了以PCR为基础,高效快速检测奶牛乙型肝炎的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为500bp、250bp的特异性DNA片段,建立的奶牛HBV病毒套式PCR能检测到初始模板69.8个拷贝的病毒,在-20℃至少可保存12个月,重复性良好,快速、准确、特异。应用奶牛乙型肝炎PCR快速诊断试剂盒对100份奶牛血清样本进行了检测,结果显示,其中的9个样本奶牛乙型肝炎病毒DNA阳性。 相似文献
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为快速获得高质量的柑橘黄龙病（HLB）植物样品DNA,本研究在传统CTAB法基础上,结合热萃取技术,建立了一种简便、快速提取HLB植物样品DNA的CTAB简化法。与Solarbio植物基因组DNA提取试剂盒和传统CTAB提取法相比,该方法所需时间短,1~2 h即可完成整个提取过程,获得的HLB植物样品DNA质量高、产量多。同时比较了三种方法制备模板时黄龙病病原菌和其他柑橘病原菌的PCR检出率,CTAB简化法和传统CTAB法检出率一致,试剂盒稍低,表明本研究建立的CTAB简化法可用于柑橘DNA病害PCR检测DNA模板的制备。本研究研发的HLB植物样品DNA提取方法优势明显,适用于大量病样的快速检测。 相似文献
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转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)设计奶牛内源性基因引物,根据外源基因人溶菌酶基因(human lysozyme,hLY)及标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。结果表明,建立的方法灵敏、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。 相似文献
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实验在大肠杆菌产生的志贺样毒素2型变异体(Shiga-like toxin Ⅱ e,Stx2e)研究的基础上,设计了一对特异性引物,通过优化,建立了以PCR为基础,高效快速检测猪水肿病的PCR试剂盒.该试剂盒扩增的阳性条带为172 bp的特异性DNA片段,最低检出菌体量为120 CFU,在-20℃至少可保存12个月,重复性良好.应用猪水肿病PCR快速检测试剂盒对22份新鲜样本进行了检测,结果显示,其中的5个样本含Stx2e阳性大肠杆菌,PCR检测结果与剖检、细菌学和生化检验结果相一致. 相似文献
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实时荧光定量PCR检测畜禽肉制品中鸭源性成分 总被引：3，自引：0，他引：3
根据鸭mtDNA COX基因上的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR用于检测畜禽肉制品中的鸭源性成分。结果表明,建立的方法特异性强,与鹅、鸡、羊、牛等15种动物DNA无非特异性扩增;灵敏度高,可检测1.0pg/μL鸭源DNA的存在;重复性好,同DNA浓度所测得Ct值的变异系数均小于3%;应用该法对模拟混合样品进行检测,结果与预期相符,且常见肉类DNA的存在并不影响该法对鸭源性成分检测的灵敏度。说明本试验建立的鸭源性成分实时荧光定量PCR法特异、敏感、稳定,可快速准确检测畜禽肉制品中含有的鸭源性成分。 相似文献
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转基因小鼠的多重PCR快速检测技术 总被引：3，自引：0，他引：3
转基因检测技术的标准化可以为转基因法规的制定和转基因产品的标识提供技术支持.采用碱裂解法快速提取鼠尾基因组DNA,用PCR方法检测其中的外源基因结构如cytomegalovirus(CMV)启动子、hGH polyA终止子及目的基因跨膜蛋白66(Transmembrane protein 66,Tmem66),筛选到阳性样品.优化了多重PCR引物退火温度及缓冲液浓度,并探讨了扩增速率对多重PCR的影响.结果表明,此多重PCR方法可得到很好的扩增效果,可用于转基因小鼠外源基因的检测,同时为哺乳动物检测标准的建立提供参考. 相似文献
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《上海畜牧兽医通讯》2018,(3)
正由上海市农业科学院生物技术研究所研发的PCV2LAMP可视化快速检测和荧光定量PCR检测方法获得了国家发明专利(图1),所在项目获得了上海市科技进步三等奖(图2)。现在该技术完成了实验室阶段测试,已组装成试剂盒(图3,4),目前正在申报药证。现准备转让,或联合申报。有意向者请联系:地址:上海市闵行区北翟路2901号上海市农业科学院生物所101室联系人:赵凯联系方式:13611934873 相似文献
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《国外畜牧学(猪与禽)》2018,(3)
正由上海市农业科学院生物技术研究所研发的PCV2LAMP可视化快速检测和荧光定量PCR检测方法获得了国家发明专利(图1),所在项目获得了上海市科技进步三等奖(图2)。现在该技术完成了实验室阶段测试,已组装成试剂盒(图3,4),目前正在申报药证。现准备转让,或联合申报。该技术的详细信息请见下面附文。 相似文献
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《畜牧与兽医》2017,(9):88-91
选择商品化的3种细胞裂解液(RNAiso Plus、TRNzol Plus和RNAOUT)和2种DNA/RNA共提试剂盒(RNA-DNA双提试剂盒、快速DNA/RNA共提试剂盒),分别提取猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1-R株、猪瘟病毒(CSFV)HCLV株和乙型脑炎病毒(JEV)SA-14-14-2株的RNA,通过RNA直接定量和Real-time PCR间接评价了抽提的RNA的质量。RNA直接检测结果表明,RNAiso Plus、TRNzol Plus和RNAOUT 3种细胞裂解液抽提获得的RNA浓度相对较高;Real-time PCR间接检测结果表明,快速DNA/RNA共提试剂盒组RNA相对水平最高,RNAiso Plus和TRNzol Plus 2种细胞裂解液组其次。研究表明,RNAiso Plus、TRNzol Plus和RNAOUT 3种试剂可用于临床RNA病毒检测以及定量分析。 相似文献
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Taqman-LNA荧光PCR快速检测肉制品中马源性成分的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]建立快速检测肉制品中马源性成分的Taqman-LNA荧光PCR方法。[方法]基于马的种属保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立可快速检测肉制品中马源性成分的Taqman-LNA荧光PCR检测方法。通过对特异性、灵敏度、重复性的检测,对建立的方法进行评价。[结果]建立的Taqman-LNA荧光PCR方法灵敏,可检测到马肉DNA最低限为1.4 pg;特异,与猪、牛、羊、鹿、驴、兔、鸡、鸭、鹅、虾无非特异性反应;可重复,批内和批间的变异系数均小于2%;准确,应用该法检测人为掺入马肉的肉制品,检测结果与预期相符。[结论]本研究建立的方法具有灵敏度高,特异性强,重复性好等优点,适合于肉制品中马源性成分检测。 相似文献
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