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RAPD技术及其在桑树上的应用 总被引：3，自引：1，他引：2
ＲＡＰＤ技术及其在桑树上的应用浙江农业大学蚕学系楼程富，张有做随着分子生物学技术的迅猛发展，新的研究手段和方法不断涌现，ｇｏ年代初在ＰＣＲ（聚合酶链式反应）基础上发展起来的ＲＡＰＤ．（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｌｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｌｉｃＤＮＡ）就... 相似文献
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中国旋毛虫猫分离株SW种类归属的进一步鉴定 总被引：9，自引：0，他引：9
通过生物学特性测定及随意扩增的ＤＮＡ多态性（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）技术,对中国旋毛虫猫分离株进行了进一步鉴定。结果显示：中国的猫分离株ＳＷ为Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａｎａｔｉｖａ种,而非Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ种。 相似文献
3.
本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＮＤＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体──Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后,即成ＮＤＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＮＤＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ,而不与ＩＢＤｖ－ｄｓＲＮＡ、ＡＩＢｖ－ｓｓＲＮＡ、ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ－ｄｓＤＮＡ,ＦＰＶ－ｄｓＲＮＡ及ＡＩＬＶ－ｄｓＤＮＡ发生交叉杂交反应。试验结果表明：尽管该探钎含有编码Ｆｏ蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把ＮＤＶ的强、弱毒株区分开。这说明ＮＤＶ强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对ＮＤＶ来说具有特异性,这就为ＮＤＶ的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。 相似文献
4.
RAPD技术及其在动物育种中的应用 总被引：2，自引：0，他引：2
ＲＡＰＤ技术的兴起,使ＤＮＡ指纹技术的应用走向了一个新的发展阶段。此技术已成功应用到群体遗传关系分析、跟踪选育进展,基因定位等领域。本文系统论述了ＲＡＰＤ的技术原理、特点及近年来国内的研究概况,并探讨了这一新的分子遗传标记在动物育种中的应用及其发展前景。 相似文献
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不同种、株鸡球虫DNA多态性的比较研究 总被引：7，自引：0，他引：7
对鸡的４种球虫（Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ、Ｅ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ、Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ、Ｅ．ｍａｘｉｍａ）基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ（Ｒａｎｄｏｍ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ）比较分析，发现多数引物能使不同种球虫产生完全不同的谱带，因此证明ＲＡＰＤ技术完全可用于同宿主艾耳球虫虫种的分类鉴定。并应用ＲＡＰＤ技术对Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ早熟株、鸡胚株、亲本毒株和Ｅ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ早熟 相似文献
6.
本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＤＮＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体－Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐ ｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后，即成ＤＮＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＤＮＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ，而不与ＩＢＤＶ－ｄｓＲＮＡ，ＡＩＢＶ－ｓｓＲＮＡ，ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ０ｄｓＤＮＡ、Ｆ 相似文献
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随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡＳ,ＲＡＰＤ）是利用含有１０个（或９个）碱基的随机引物（单引物）通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对模板ＤＮＡ进行随机扩增,根据扩增的某一ＤＮＡ片段的有无来比较不同基因组ＤＮ... 相似文献
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应用RAPD技术对中国3品系实验用小型猪进行亲缘关系的分析 总被引：11，自引：0，他引：11
随机扩增多态ＤＮＡ (ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ ,ＲＡＰＤ)技术 ,在动物、植物、微生物种属鉴定 ,亲缘关系的划分及多态性分析中得到广泛应用 ,但应用于小型猪方面的研究报道很少 ,尤其是对我国特有的实验用小型猪的研究 ,目前国内外尚未见报道。贵州小型香猪、广西巴马小型猪及西双版纳近交系小耳猪由于其近交程度高、遗传性稳定以及良好的实验应用效果 ,已引起了国内外相关领域的关注。本实验应用 1 0 0条随机引物对上述 3品系小型猪的基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ研究 ,旨在筛选具有品系间多态性的ＲＡ… 相似文献
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夹心ELISA和斑点杂交试验检测鸭血清中鸭乙型肝炎病毒的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
用单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ和斑点杂交试验分别对４６例鸭血清样品中的鸭乙型肝炎病毒表面抗原（ＤＨＢｓＡｇ）和鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）ＤＮＡ进行平行检测，并根据夹心ＥＬＩＳＡ测定的Ｐ／Ｎ值和斑点杂交试验的反应斑点进行薄层扫描所测定的峰面积值，比较了１９例带毒鸭血清中ＤＨＢｓＡｇ和ＤＨＢＶＤＮＡ的相对含量。结果表明，两种试验的结果判定具有高度一致性。ＤＨＢｓＡｇ与ＤＨＢＶＤＮＡ在带毒鸭血清中呈并存关系，但其含量相关不显著（Ｐ＞０．０５）。 相似文献
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将编码人雄激素受体（ｈＡＲ）的雄素结合区（ＬＢＤ）的ｃＤＮＡ片段（１００５ｂｐ）克隆到由Ｐ１启动子控制的硫氧还蛋白表达载体ｐＴｒｘＦｕｓ上,构建了表达质粒ｐＴｒｘＡＲ,并转化到大肠杆菌Ｇ１７２４中,经色氨酸诱导表达后,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,可观察到一高效表达的融合蛋白产物,此融合蛋白 分子了量与理论值相吻合,氨基酸组分分析证明了ＬＢＤ目的基因的表达。 相似文献
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以PCR为基础的分子生物学方法及其在寄生虫学方面的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
扼要介绍了以聚合酶链反应（ＰＣＲ）为基础的随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）ＰＣＲ连接的限制性酶切片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）扩增片段长度多态性（ＡＦＬＰ）等和ＤＮＡ序列分析在寄生虫学方面的应用及其优势和不足；叙述了检测寄生虫序列变异的几种新方法。 相似文献
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几种小麦族禾草及其杂交后代基因组DNA的RAPD研究 总被引：20，自引：5，他引：15
应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术分析蒙古冰草、航道冰草及其种间杂种Ｆ、ＢＣ１代和加拿大披碱草、野大麦及其属间杂种Ｆ１代的基因组ＤＮＡ差异性。筛选出能检测咯亲本及杂交后代间遗传差宜引物；从ＤＮＡ分子水平验证出亲本加拿大坡碱草和野大麦两属间经亲本蒙古冰草、航道冰草二种间的亲缘关系远；杂种Ｆ１代的ＲＡＰＤ图谱有明显偏母本的倾向，随机扩增多态性ＤＮＡ技术可用于牧草远缘杂种鉴定及遗传育种研究。 相似文献
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AFLP和SSR技术简介及比较 总被引：1，自引：0，他引：1
近 1 0多年来 ,随着分子生物学技术的迅速发展 ,ＤＮＡ分子标记的研究和应用十分活跃。目前应用最普遍的ＤＮＡ分子标记还是ＡＦＬＰ、ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＳＳＲ等标记技术。这些技术在品种鉴别、目的基因定位、遗传图谱构建、ＤＮＡ指纹分析等研究中得到广泛的应用。它们不仅推动了生物学的发展 ,而且使相关学科得到飞跃发展。因此分子标记技术有重要的使用价值和广阔的应用前景。本文主要介绍ＡＦＬＰ和ＳＳＲ标记技术。1 微卫星 (Ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ)技术1 .1 微卫星技术的生物基础一般而言 ,在生物的整个基因组中并不是每… 相似文献
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采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍｌｙ ａｍｐｌｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）技术对产气英膜梭菌进行ＰＣＲ扩菌。结果,产气英膜梭菌Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４个型均可扩增出约４３０ｂｐ的条带,Ｂ、Ｃ型还扩增出约２１０ｂｐ的条带,Ｂ、Ｄ型还扩增出约１２１０ｂｐ的条带,Ａ型还扩增出约２４０ｂｐ和６９０ｂｐ的条带,各型之间的条带差别明显。 相似文献
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中国旋毛虫分离株成虫和新生幼虫基因文库的构建及筛选 总被引：21，自引：5，他引：16
利用λＺＡＰⅡ载体构建了中国分离株Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ及Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｎａｔｉｖａ成虫和新生幼虫ｃＤ－ＮＡ基因文库,检测结果表明,所克隆的ｃＤＮＡ片段分布在０．２～２．０ｋｂ之间,表明２个ｃＤＮＡ基因文库对ｍＲＮＡ的覆盖面很大。利用ＲＡＰＤ技术,以肌幼虫基因文库作对照,采用７０个单引物及２０对复合引物对以上２个文库进行筛选扩增,结果：（１）共获得２条Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ及４条Ｔ．ｎａｔｉｖａ的成虫与新生幼虫特异性基因片段,鉴于成虫与新生幼虫是旋毛虫的２个侵袭性阶段,其所特有的特异性基因片段极有可能就是这２个时期虫体的侵袭性因子基因,即所要寻找的强保护性抗原基因,从而为后续研究奠定了基础;（２）发现１条Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ种特有的基因片段,这一特异性基因片段为虫种鉴定提供了物质条件;（３）发现旋毛虫同种不同分离株（中国分离株及法国分离株）间ｃＤＮＡ文库扩增图谱完全相同,进一步证实了旋毛虫种内基因的低流动性 相似文献
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从２型犬腺病毒的ＭＤＣＫ细胞培养物中提取线状双链病毒基因组ＤＮＡ，利用限制性内切酶ＰｓｔＩ、ＢｇｌⅠ和ＨｉｎｄⅢ分别进行酶切，在１％琼脂糖凝胶上电泳，随后Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹到尼龙膜上，利用Ｄｉｇｏｘｉｎ标记的２型犬腺病毒Ｅ３区ＰＣＲ产物与膜上ＤＮＡ杂交，结果发现，Ｅ３区探针分别与病毒ＤＮＡ的ＰｓｔＩＢ片段、ＢｇｌＩＡｌ片段和ＨｉｎｄⅢＡ２、Ｂ２片段呈现阳性杂交反应，该结果为Ｅ３区的克隆及犬腺病毒 相似文献
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原位杂交检测鸡的马立克氏病 总被引：1，自引：0，他引：1
马立克氏病（ Ｍａｒｅｋｓ Ｄｉｓｅａｓｅ, Ｍ Ｄ）是由马立克氏病病毒（ Ｍ Ｄ Ｖ）引起的 Ｔ淋巴细胞肿瘤。本文通过 Ｐ Ｃ Ｒ 方法扩增出长为３３９ｂｐ 的部分ｍ ｅｑ 基因片段,再以随机引物法制备 Ｄｉｇ 标记ｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针,首次采用原位杂交技术对１２ 例 Ｍ Ｄ 自然发病鸡的内脏组织石蜡包埋切片中的ｍ ｅｑ基因ｍ Ｒ Ｎ Ａ 进行检测。结果显示,ｍ ｅｑ 基因ｍ Ｒ Ｎ Ａ 在肿瘤组织中均有分布,这表明ｍ ｅｑ 基因的 Ｒ Ｎ Ａ 转录本可以作为 Ｍ Ｄ肿瘤的特异性分子标志物。 相似文献
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从动物毛发中提取DNA进行RAPD扩增的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
经实验改进了一种快速，简便提取动物毛囊细胞中ＤＮＡ的方法，电泳检测，ＤＮＡ带型整齐集中清晰，无拖尾现象；进行ＲＡＰＤ扩增，扩增带多而清晰，证明改进后的方法简便可行。 相似文献