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1.
为明确地克珠利耐药虫株与敏感虫株在基因水平的差异,进而解析地克珠利耐药性产生的分子机制,本研究以实验室保存的2株柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药虫株和2株柔嫩艾美耳球虫地克珠利敏感虫株为研究对象,将4个虫株进行全基因组重测序(NGS),通过单核苷酸多态性(SNP)密度分布解析耐药株与敏感株之间的差异。结果显示,与敏感株相比,耐药株在第13号染色体0.1～1 Mb区间内的SNP比较富集。本研究结果为解析鸡球虫14条染色体上抗原变异位点和耐药性位点等的研究提供了科学依据。 相似文献
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鸡球虫病是由艾美耳球虫引起的一种危害严重的肠道寄生虫病,每年都会给世界各地的养禽业带来巨大的经济损失。目前,该病主要依靠抗球虫药物进行防治,但由于药物的长期及不合理使用导致鸡球虫几乎对所有使用过的抗球虫药均产生耐药性。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫含HD域蛋白（EtHDCP）在耐药株中上调表达。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆出EtHDCP基因,构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-EtHDCP,并成功诱导表达了重组蛋白rEtHDCP。利用qRT-PCR和Western blot对柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段的转录和翻译水平进行分析,结果显示,EtHDCP在第二代裂殖子的转录和翻译水平高于其他三个阶段（未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子）。同时利用Western blot分析了EtHDCP在柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株中的翻译水平,结果显示,EtHDCP在耐药株中的蛋白翻译水平显著高于敏感株。间接免疫荧光定位结果显示,该蛋白主要定位在子孢子和裂殖子的表面以及裂殖子的胞质内。入侵抑制试验表明,抗rEtHDCP多克隆抗体可有效抑制子孢子对宿主细胞的入侵。这些结果说明该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育、耐药性的产生以及子孢子入侵宿主细胞的过程。 相似文献
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柔嫩艾美耳球虫是一种重要的寄生于鸡盲肠细胞内的寄生原虫,可引起危害严重的鸡球虫病。目前,对鸡球虫病的预防和治疗主要依靠抗球虫药,而药物的广泛使用使球虫产生了严重的耐药性。为研究球虫耐药性产生的机制,本实验室前期对诱导的地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株和亲本敏感株进行转录组测序,经分析发现TCP-1亚基α为耐药株和敏感株的差异表达基因且在耐药株上调表达。本文以柔嫩艾美耳球虫敏感株为模板,成功克隆出TCP-1亚基α基因,构建了原核表达重组质粒p ET-Et TCP-1α,并成功诱导表达了重组蛋白r Et TCP-1α,用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔和BALB/C小鼠获得多克隆抗体。用荧光定量PCR和Western blot方法检测柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株和马杜拉霉素耐药株TCP-1亚基α基因的m RNA转录和翻译水平,同时检测了该基因在球虫不同发育阶段的转录水平和翻译水平。结果显示,Et TCP-1α在2个耐药株的m RNA转录和蛋白翻译水平明显高于敏感株,而且该蛋白在第二代裂殖子的表达最高;间接免疫荧光实验显示该蛋白主要位于子孢子和第二代裂殖子表面,当虫体入侵DF-1细胞进行裂殖生殖后,该蛋白分布于整个虫体,且表达量明显升高。因此,推测Et TCP-1α在柔嫩艾美耳球虫细胞内的生长发育和耐药性的产生过程中发挥了一定的作用。 相似文献
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《中国动物传染病学报》2016,(6)
为检测实验室长期保存的柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株的遗传稳定性,采用鸡体试验法,以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量4项指标,评价2个抗药株对地克珠利、癸氧喹酯、马杜拉霉素等3种抗球虫药物的抗药性,并以柔嫩艾美耳球虫敏感株为对照。结果显示,柔嫩艾美耳球虫敏感株对3种抗球虫药物均无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株对马杜拉霉素为完全耐药,4项指标全部阳性;对地克珠利、癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株对地克珠利表现为完全耐药,4项指标全部阳性;对马杜拉霉素表现为中度耐药,2项指标阳性;对癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。结果表明,在实验室已繁殖保存10余年的柔嫩艾美耳球虫2个抗药虫株对其诱导药物具有明显抗药性,实验室保种繁殖方法可行,虫株遗传稳定性良好,为利用该虫株进行球虫抗药性机制等相关研究奠定了基础。 相似文献
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目的检测三株柔嫩艾美耳球虫对六种药物的耐药性,为防治球虫病制定临床用药方案提供依据。方法鸡体实验法检测巢湖、六安、肥东三株柔嫩艾美耳球虫对马杜拉霉素、盐霉素、莫能菌素、磺胺喹嗯啉钠、地克珠利、妥曲珠利的耐药性,以抗球虫指数（ACI）、病变记分减少率（RLS）、相对盲肠卵囊产量（ROP）和最适抗球虫活性百分率（POAA）四项指标综合判定。结果巢湖株对地克珠利,盐霉素与莫能菌素轻度耐药,对马杜拉霉素中度耐药,对托曲株利和磺胺喹嗯啉钠重度耐药,六安株对地克株利与托曲株利重度耐药,对磺胺喹嗯啉钠中度耐药,对盐霉素轻度耐药,对马杜霉素敏感,肥东株对磺胺喹嗯啉钠完全耐药,对莫能菌素重度耐药,对马杜霉素与盐霉素轻度耐药,对地克珠利与托曲珠利中度耐药。结论3个地区的柔嫩艾美耳球虫对供试药物已产生不同程度的耐药性。 相似文献
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安徽3株柔嫩艾美耳球虫对5种抗球虫药的耐药性检测 总被引：1，自引：0，他引：1
《中国兽医学报》2015,(10):1614-1621
采用鸡体试验法,以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量4项指标综合判定,安徽庐江县、青阳县和肥西县3个地区鸡柔嫩艾美耳球虫对磺胺氯吡嗪钠、马杜拉霉素、氨丙啉、妥曲珠利、地克珠利的耐药性。结果显示,庐江株对氨丙啉和妥曲珠利敏感,对磺胺氯吡嗪钠和地克珠利完全耐药,对马杜拉霉素中度耐药;青阳株对地克珠利和妥曲珠利敏感,对磺胺氯吡嗪钠和马杜拉霉素完全耐药,对氨丙啉中度耐药;肥西株对磺胺氯吡嗪钠敏感,对妥曲珠利中度耐药,对地克珠利、马杜拉霉素和氨丙啉完全耐药。 相似文献
9.
作者采集了5个不同地区发生球虫病鸡场的粪便,分离柔嫩艾美耳球虫不同地理株,为了检测它们对药物敏感性,选择常用的预防球虫病药物马杜拉霉素、莫能菌素、地克珠利,以ACI作为指标,进行了的药物敏感试验。结果表明,北京-1、潍坊和上海株对饲料中添加5 mg/kg马杜拉霉素产生了部分耐药性,而北京-2和北京-3两个虫株对其则敏感;北京-1、北京-2和潍坊株对100 mg/kg莫能菌素部分耐药,上海株完全耐药,而北京-3株对其敏感;北京-1、北京-2、潍坊株和上海株对1.0 mg/L地克珠利产生了部分耐药性,而北京-3株对它敏感。 相似文献
10.
将 60只 1日龄蛋公鸡于无球虫条件下饲养至 30日龄时随机分为 5组 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组 )。Ⅰ组用地克珠利饮水 (每千克水 1mg) ;Ⅱ组地克珠利混饲 (每千克饲料 2mg) ;Ⅲ组为药物对照组 (每千克饲料克球粉 5mg) ;Ⅳ组为感染不给药 ;Ⅴ组为不感染不给药组。于给药当天 ,除Ⅴ组外 ,其他组鸡每只接种 1× 1 0 5个柔嫩艾美耳球虫凤阳地理株孢子化卵囊。根据各组鸡的存活率 ,相对增重率 ,病变记分 ,血便记分和抗球虫指数来观察药物疗效。试验结果表明 ,地克珠利能有效的控制凤阳地理株柔嫩艾美耳球虫。 相似文献
11.
柔嫩艾美耳球虫对地克珠利和百球清的交叉耐药性检验 总被引：4，自引：0，他引：4
分别采用地克珠利和百球清饮水剂对3株来源和特性不同的柔嫩艾美耳球虫株进行了交叉耐药性检验。结果表明，从未接触过百球清的敏感株和由敏感株诱导而成的地克珠利耐药株均表现出对百球清高度敏感；而曾使用过二种药物的野外分离虫株，则表现出对两种药物高度耐药。由此可见，两种药物并不存在必然的交叉耐药性。 相似文献
12.
《中国家禽》2021,(7)
为了解鸡球虫混合种和柔嫩艾美耳球虫分离株的耐药一致性,验证不同种属球虫耐药性检测方法的可靠性,试验利用抗球虫指数(ACI)、最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变计分减少率(RLS)和相对卵囊产量(ROP)4项指标综合评价了田间分离的山东XYP种,以及利用单卵囊分离技术从中分离的艾美耳球虫D1、D2和D3株,分别进行了11种临床常用抗球虫药的耐药性。结果显示:山东XYP种对11种抗球虫药均表现为完全耐药,而从中分离的柔嫩艾美耳球虫D1、D2和D3株对11种抗球虫药呈现出完全不同的耐药性,说明临床分离的鸡球虫对常用的抗球虫药物都存在严重的耐药性,柔嫩艾美耳球虫分离株与其来源混合种的耐药检测结果存在差异,而且不同分离株之间的耐药性综合评价结果也不一致。提示基于单卵囊分离的不同种属鸡球虫药物敏感性检测方法存在局限性,有待进一步完善。 相似文献
13.
为了进一步验证鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株经本动物(鸡)连续传代后的毒力和遗传稳定性,为虫种种子传代提供依据,试验对鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株(Etpp)用11日龄敏感鸡连续放松传代10次,其潜隐期、排卵囊高峰、卵囊产量、致病性和免疫原性均保持了早熟耐药株(Etpp)的特征,说明所选育的虫株(Etpp)在遗传上具有稳定性。 相似文献
14.
复方地克珠利可溶性粉剂抗鸡球虫病效果试验 总被引：2，自引：0，他引：2
分别以0.5、1.0和1.5mg/L复方地克珠利可溶性粉(以地克珠利有效成分计)饮水,预防鸡柔嫩艾美耳球虫人工感染。并用地克珠利可溶性粉(1.0mg/L)饮水、地克珠利(1.0mg/kg)混饲和硫酸新霉素(50.0mg/L,以效价计)饮水为对照。结果发现,复方地克珠利可溶性粉3种浓度饮水均能有效预防鸡柔嫩艾美耳球虫人工感染,抗球虫指数均在176.46以上,优于地克珠利混饲给药组。 相似文献
15.
为了探究北京地区3种柔嫩艾美耳球虫分离株S1、B4、DZ对磺胺对甲氧嘧啶二甲氧苄啶(预混剂)、磺胺氯吡嗪钠(可溶性粉)、地克珠利(溶液)、托曲珠利(溶液)4种药物的敏感性,从鸡只12日龄时开始,将鸡只分为16组,每组6只鸡,同时开始喂药直至试验结束(攻虫后第8天)。在鸡只14日龄时人工感染球虫4万个孢子化卵囊,该试验重复3次。结果得出S1 E.tenlla对磺胺对甲氧嘧啶二甲氧苄啶、磺胺氯吡嗪钠、地克珠利、托曲珠利4种药物均具有极强的耐药性。B4E.tenlla对磺胺对甲氧嘧啶二甲氧苄啶、磺胺氯吡嗪钠、托曲珠利3种药物敏感;对地克珠利具有耐药性。DZ E.tenlla对磺胺对甲氧嘧啶二甲氧苄啶和托曲珠利两种药物敏感,对磺胺氯吡嗪钠和地克珠利具有耐药性。 相似文献
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柔嫩艾美耳球虫对四种抗球虫药的交叉抗药性试验 总被引：16，自引：4，他引：16
为了测试柔嫩艾美耳球虫的４种抗药虫株（抗地克珠利、抗拉沙里菌素、抗盐霉素和抗克球粉虫株）对４种抗球虫药（地克珠利、拉沙里菌素、盐霉素和克球粉）的敏感性进行了本试验。结果表明：柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药虫株对拉沙里菌素、盐霉素和克球粉均表现敏感,拉沙里菌素抗药虫株、盐霉素抗药虫株和克球粉抗药虫株对地克珠利也表现为高度敏感,因此,柔嫩艾美耳球虫对地克珠利与拉沙里菌素、地克珠利与盐霉素、地克珠利与克球粉３组药物不存在交叉抗药性。 相似文献
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试验选用14日龄健康雏鸡154只,随机分为5个感染药物组、1个阳性组和1个阴性组,每组22只。采用POAA、RLS、ROP和ACI综合评定QHD-08株柔嫩艾美耳球虫的耐药谱。结果显示,QHD-08株柔嫩艾美耳球虫对尼卡巴嗪呈现中度耐药,对克球粉、氨丙啉、马杜霉素和瑞冠球均呈现完全耐药;在2004-2008年期间,QHD株柔嫩艾美耳球虫对氨丙啉的耐药变迁结果为无耐药性→轻度耐药→完全耐药;对尼卡巴嗪的耐药性由2006年轻度耐药转变为2008年中度耐药,而克球粉、马杜霉素、氨丙啉和瑞冠球等4种抗球虫药的耐药性均从2006年的轻度(或中度)耐药转变为2008年的完全耐药。结果表明,QHD株柔嫩艾美耳球虫对常用抗球虫药物的耐药谱宽,且耐药率呈逐年递增的趋势。 相似文献
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四川部分地区鸡球虫分离株对11种抗球虫药物的耐药性调查 总被引：2，自引：0，他引：2
从四川省部分地区分离到6株鸡艾美耳球虫株,为了掌握这些虫株对11种常用抗球虫药物的耐药性情况,采用笼饲试验法(鸡体试验法),以最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标对结果进行综合判定。结果表明,6株鸡艾美耳球虫对癸氧喹酯、拉沙洛西钠、盐酸氯苯胍和莫能菌素为轻度耐药及以上;对尼卡巴嗪、二硝托铵、氯羟吡啶、马度米星铵和甲基盐霉素为中度耐药及以上;对复方磺胺氯达嗪钠均为重度耐药及以上。6株鸡艾美耳球虫四川株对11种受试药物均不敏感,且对大部分试验药物表现为中度或重度耐药。 相似文献
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雏鸡分组后人工感染果洛地区柔嫩艾美耳球虫分离株2.4×105个/只,分别采用地克珠利、氨丙啉、尼卡巴嗪、磺胺氯吡嗪钠、复方磺胺对甲氧嘧啶等5种常用抗球虫药进行治疗观察,以POAA、RLS、ROP、ACI作为评定指标.结果表明,柔嫩艾美耳球虫果洛分离株对氨丙啉、地克珠利高度敏感,对尼卡巴嗪、磺胺氯吡嗪钠均产生不同程度的耐... 相似文献