共查询到19条相似文献，搜索用时 109 毫秒
1.
中国结东地区猪生殖—呼吸道综合征病毒（S1株）ORF5—7基因特？… 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒分离株Ｓ１主要结构蛋白基因进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐ ＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５，ＯＲＦ６和ＯＲＦ７，ＯＲＦ５和ＯＲＦ６及ＯＲＦ６和ＯＲＦ７间有部分碱基重叠，且与欧洲一美洲型ＰＲＲＳＶ相似。 相似文献
2.
猪生殖—呼吸道综合征病毒CH—1al株ORF2～7序列测定 总被引：2，自引：0，他引：2
新近发现的猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）是单股ＲＮＡ病毒，属不久前成立的动脉炎病毒科。为了比较从国内分离的ＰＲＲＳＶ与欧美ＰＲＲＳＶ毒株的分子遗传学关系，本文扩增并克隆了ＰＲＲＳＶ ＣＨ－１ａ株ＯＲＦ２￣７，测定了其核苷酸序列。与北美洲型代表株ＶＲ－２３３２遗传距离最近，可能来自同一祖先。 相似文献
3.
4.
猪繁殖与呼吸综合征病毒北京分离株的ORF7克隆与序列分析 总被引：4，自引：0，他引：4
将北京地区猪系列与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离ＢＪ－２和ＢＪ０４的ＯＲＦ７及部分３端编码区（ＵＴＲ）的ＲＴ＿ＰＣＲ扩增产物克隆连接于ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ质粒载体上,重组质粒经ＥｃｏＲⅠ酶切鉴定后进行了双链测序。测定垢基因序列与欧已知序列比较发现,ＢＪ－２和ＢＪ－４株与美洲ＶＲ－２３３２株非常接近,在其长度为５５５ｂｐ的ｃＤＮＡ序列中,仅与ＶＲ－２３３２株分别相差１和２个核苷酸,其中ＯＲＦ７的核 相似文献
5.
用反转录—聚合酶链反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究 总被引：6，自引：1，他引：5
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型标准毒株的ＯＲＦ６及部分ＯＲＦ７的序列,设计合成了一对引物２６３７４ ＰＳ／２６３７５ＰＲ,用反转录－聚合酶链反应技术对６株ＰＲＲＳＶ北京分离株进行了检测。结果该引物对６株病毒均能扩增出与预期大小相符的ＲＴ－ＰＣＲ产物,并与ＡＴＣＣ ＶＲ－２３３２株扩增产物的大小相当,而欧洲型标准毒株未获扩增片段。 相似文献
6.
测定了猪生殖－－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）魁北克ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株基因组３我的ｃ－ＤＮＡ序列，并与欧洲（Ｌｅｌｙｓｔａｄ病毒ＬＶ）和美国（ＡＴＣＣＶＲ２３８５，ＭＮ－１６）参考株序列进行了比较，魁北克株与Ｌｅｌｙ－ｓｔａｄ病毒之间，包含ＯＲＦ３７序列（２８３４个核苷酸）出现广泛的基因组变异，迪是由于大量碱基置换和增删引起的。ＯＲＦ５、３和７似乎最不稳定，魁北克株与Ｌｅｌｙｓｔａｄ病毒的推测编 相似文献
7.
本研究对猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）的非结构基因,包括ＯＲＦ１基因、５’端非编码区基因（Ｎｏｎ－ＣｏｄｉｎｇＲｉｇｏｎ,ＮＣＲ）和３’端非编码区基因（ＮＣＲ）分别进行了分子克隆和测序,并对其基因特征作了研究分析。结果表明,ＰＲＲＳＶ－ＣＨ－１ａ株ＯＲＦ１ａ起始密码子上游是由保守序列５’ＵＵＡＡＣＣ３’连接的５’ＮＣＲ,在该区附近的约４３个碱基有较高的保守性,其余核苷酸的变异较大。ＯＲＦ１ａ编码的多聚蛋白又可切割生成六个非结构蛋白（Ｎｓｐ１ａ、Ｎｓｐ１β、Ｎｓｐ２－５）,其中Ｎｓｐ２可能具有型特异性,在不同基因型的ＰＲＲＳＶ分离株之间表现出较大的变异,和ＶＲ２３３２株的ＮｓＰ２的编码基因相比有８６％的同源性,同ＬＶ株只有４５％的同源性;ＯＲＦ１ｂ所编码的聚合蛋白经切割后形成四个非结构蛋白（ＲｄＲｐ、ＣＰ２－４）,同 ＯＲＦ１ａ所编码的蛋白相比较为保守,但是,在ＣＰ４的Ｃ端仍有较大的变异,其编码区和ＶＲ２３３２株相比有８８．７％的同源性,而和ＬＶ株只有５３．４％的同源性。ＣＨ－１ａ株的ＯＲＦ１ａ－ＯＲＦ１ｂ的衔接区为核糖体移码区,在所有的ＰＲＲＳＶ分离株中高度保守,具有保守的５’ＵＵＵＡＡＡＣ３’序列和 相似文献
8.
我国猪繁殖和呼吸综合征病毒基因型鉴定 总被引：13，自引：0，他引：13
应用ＲＴ－ＰＣＲ技术,从我国东北和华北地区分离的２个猪繁殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）毒株中扩增获得部分核衣壳蛋白基因。该基因片段长度与美洲型野毒株ＶＲ２３３２ＲＴ－ＰＣＲ扩增片段相同,均为４３３ｂｐ,长于欧洲型Ｌｅｌｙｓｔａｄ毒株扩增片段长度（３９５ｂｐ）。此外,用另１对引物,从这２个分离毒株及ＶＲ２３３２毒株扩增获得部分ＧＰ５蛋白基因,其限制性酶切片段长度多态性分析结果相同或相似。该结果表明,我国不同地区流行的ＰＲＲＳＶ可能属于同一毒株,并且来源于美洲。 相似文献
9.
猪生殖与呼吸综合征病毒ORF6片段的cDNA克隆及鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
根据已发表的ＰＲＲＳＶ基因组序列，设计并合成了１对特异扩增ＡＴＣＣ ＶＲ－２３３２株的ＯＲＦ６的基因的引物，以ＡＴＣＣ ＶＲ－２３３２基因组为模板，通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增出５８６ｂｐ的ｃＤＮＡ产物。将该ｃＤＮＡ片段经Ｔ－Ａ连接插入ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体中，用重组质粒转化大肠埃希氏菌ＪＭ１０９，获得重组质粒转化菌。对重南粒ＤＮＡ进行ＰＣＲ及酶切鉴定，证明插入的ＤＮＡ片段与ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ片段大小相 相似文献
10.
猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较 总被引：7，自引：0，他引：7
在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明,ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应;分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应;而分离株与ＨＣＶ、ＰｒＶ、ＰＰＶ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原。以上试验证明,我们已成功地分离到２株地方性ＰＲＲＳＶ。进一步用六种ＰＲＲＳＶ单抗（Ａ～Ｆ）进行ＩＦＡ试验,结果２个分离株与ＶＲ－２３３２的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。 相似文献
11.
A cold-adapted porcine reproductive and respiratory syndrome virus (CA-VR2332) was generated from the modified live virus strain VR2332. CA-VR2332 showed impaired growth when cultured at 37°C with numerous mutations (S731F, E819D, G975E, and D1014N) in the hypervariable region of the NSP2, in which the mutation S731F might play a vital role in viral replication at 30°C. Conserved amino acid sequences of the GP5 protein suggests that CA-VR2332 is a promising candidate for producing an effective vaccine against PRRSV infection. Further studies on replication and immunogenicity in vivo are required to evaluate the properties of CA-VR2332. 相似文献
12.
根据GenBank中登录的美洲株ATCC VR-2332的MN蛋白基因序列,利用Oligo6.0设计一对特异性引物,以抽提的PRRSV-SCMS病毒感染细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增出长约1.0 kb的基因片段,将其克隆入pMD 18-T载体,测序结果显示SCMS MN基因全长886 bp,包含完整的MN基因的开放阅读框,共编码297个氨基酸。PRRSV-SCMS MN基因序列与VR2332和LV株进行同源性分析结果显示,PRRSV-SCMS与VR2332和LV株之间的核苷酸序列同源性分别为99.7%和61.6%,根据M基因推导的氨基酸序列同源性分别为98.9%和78.7%,根据N基因推导的氨基酸序列同源性分别为100%和52.8%。结果表明,SCMS地方分离株与VR2332株在基因型上具有更近的亲缘关系,推测本次分离的PRRSV属于美洲型。 相似文献
13.
应用RT PCR方法从实验室分离的两株高致病性PRRSV SX、ZQ株中扩增出ORF6和ORF7,将其分别克隆、测序。用DNAStar 软件分析所测序列,并与VR 2332株、LV株、周边国家及国内分离株进行核苷酸和推导氨基酸同源性比较,并绘制系统进化树,结果ORF6、ORF7核苷酸与北美洲型的同源性为91.1％～100％,与欧洲型的同源性为66.2％～70.7％,推导氨基酸与北美洲型的同源性为91.2％～100％,与欧洲型的同源性为62.3％～82.3％。证明新分离到的PRRSV SX株、ZQ株仍属北美洲型。SX株ORF6、ORF7核苷酸与国内新分离到的高致病性PRRSV JXA1株同源性分别为99.8%、100%;ZQ株ORF6、ORF7核苷酸与国内新分离到的高致病性PRRSV JXA1株同源性分别为99.6%、99.7%。 相似文献
14.
猪繁殖与呼吸综合征病毒GXA株分离及主要结构基因的克隆和序列分析 总被引：3，自引：5，他引：3
近来,广西一些养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊、仔猪呼吸道症状等为特征的流行性传染病,怀疑为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染所致。本研究从病猪中采集材料,经RT-PCR检测为阳性后,接种于Marc-145细胞,经过6代盲传,发现典型的细胞病理变化(CPE),经鉴定为PRRSV,命名为GXA株,其毒价为105.33TCID50/mL。参考VR-2332和CH-1a株基因序列,设计了3对特异性引物,分别对GXA株的E、M、N基因同时进行了RT-PCR扩增、克隆和测序。应用DNAstar生物学软件拼接得到GXA株的E、M和N3个基因片段共长为1473bp。同源性分析表明,GXA株与VR-2332、MLV和BJ-4的同源性为99.7%～100%,而与欧洲型代表株LV的同源性只有66.4%。表明GXA与VR-2332、MLV及BJ-4株亲缘关系比较密切,与欧洲型代表株LV亲缘关系最远,属于美洲型毒株,有可能来源于疫苗株。 相似文献
15.
二株广西猪繁殖与呼吸综合征流行毒M基因的克隆和序列分析 总被引：5，自引：0，他引：5
广西一些养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊等为特征的流行性传染病,怀疑为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)所致.利用针对PRRSV的N基因的特异性引物P1和P2,通过RT-PCR技术对分别从广西贵港市(GXGG)和南宁市(GXNN)收集到的可疑病料进行检测,结果两份为阳性.合成针对M基因的引物M1和M2,分别扩增了GXGG和GXNN两株PRRSV的M基因,并进行克隆和测序,得到长582个核苷酸的目的基因片段.应用DNAStar序列分析软件对所测的两个广西毒株与国内外已发表的ATCC VR-2332、LV和CH-la毒株进行同源性比较.分析表明,GXGG与ATCC VR-2332、LV、CH-la的核苷酸同源性分别为95.6%、69.5%、97.7%;GXNN与ATCC VR-2332、LV、CH-la的核酸同源性分别为94.9%、69.5%、97.3%.对推定的氨基酸序列进行了比较,GXGG与ATCC VR-2332、LV、CH-la的氨基酸同源性分别为97.7%、80.5%、97.7%;GXNN与ATCC VR-2332、LV、CH-la的氨基酸同源性分别为98.3%、79.9%、97.1%.说明广西流行毒株与ATCC VR-2332和CH-la的同源性很高,而与LV毒株的同源性很低.从本研究构建的系统发育树分析,广西流行的PRRSV与ATCC VR-2332株的亲缘关系比较密切. 相似文献
16.
The primary GP5 neutralization epitope of North American isolates of porcine reproductive and respiratory syndrome virus 总被引：18，自引：0，他引：18
Plagemann PG 《Veterinary immunology and immunopathology》2004,102(3):263-275
I have used indirect ELISA with overlapping synthetic peptides representing the GP5 ectodomain to study the generation and specificity of peptide-binding Abs in pigs that were infected in utero with porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) strain VR2332 and in North American field sera submitted for PRRSV infection diagnosis. Peptide-binding Abs appeared in sera of the VR2332-infected pigs within about 30 days post-farrowing (dpf), reaching maximum titers 100-200 dpf and then decreasing slowly to about half of maximum titer by about 400 dpf. The formation of peptide-binding Abs and of virus neutralizing Abs correlated and their initial appearance coincided with disappearance of virus from the circulation. The Abs were specific for VR2332-specific peptides. In contrast, anti-N-protein Abs as measured by HerdCheck ELISA appeared within 7 dpf, reached maximum levels at about 100 dpf and had decreased below detectable levels by about 200 dpf. Twenty-seven field serum samples with virus neutralizing activity all possessed high levels of peptide binding Abs, but the Abs bound about equally to VR2332 and strain Lelystad virus (LV)-specific peptides. The indirect ELISA results using various large peptides and competition ELISA using small peptides (8 or 9 amino acids long) confirmed that the epitope recognized by the Abs is located in the GP5 ectodomain sequence 37SHLQLIYNL of VR2332. Use of mutated peptides in the competition ELISA showed that 42I to T and 38HL to TY substitutions blocked Ab recognition, whereas deletion of 41L had no effect. In addition, 26 serum samples submitted by two farms for diagnostic tests were found to possess low levels of Abs that bound to GP5 ectodomain peptides, even though the sera were sero-negative in the HerdChek ELISA and lacked neutralizing activity. Competition ELISA showed that the Abs recognized one or more epitopes located downstream of the PRRSV neutralization epitope. An epitope(s) located in the same area was recognized by Abs generated in mice by immunization with a GP5 ectodomain peptide conjugated to BSA. These Abs also lacked neutralizing activity. 相似文献
17.
辽宁省部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒流行株ORF5-7基因遗传变异分析 总被引：1，自引：0，他引：1
根据GenBank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332全基因序列,设计并合成2对引物,采用RT-PCR技术,对辽宁省站送检的病料进行分离扩增,分别获得相应的目的片段,将其分别克隆入pMD18-T载体中,并送上海生工测序。应用DNAStar软件分析所测序列,并与ATCC VR-2332、CH-1a、BJ-4、LV-M96262及疫苗株的ORF567基因进行序列比较,通过核苷酸序列分析表明这5株流行株与VR-2332、CH-1a、BJ-4等代表株的同源性为89.5%～95%,与LV-M96262的同源性为54%～58.3%.氨基酸序列分析表明这5株流行株与VR-2332、CH-1a、BJ-4等代表株的同源性为82.8%～94.7%. 相似文献
18.
参考Genbank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PKRSV）ATCC VR-2332的ORF5基因序列，设计并合成了一对引物．对来自福建、浙江、山东等地的PRRSV分离毒株进行RT-PCR扩增．获得约748bp的DNA片断，将其分别克隆入pMD18-T载体中，并进行测序。应用DNAStar软件分析所测序列，并与ATCCVR-2332、CH-1a、MLV、Lv等毒株的ORF5序列进行比较，结果表明：SHDl与F114、MLV、ATCCVR-2332同源性高达98．5％，与CH-1a同源性为91．0％，与其它毒株同源性为86．6％~88．4％；F114与MLV、ATCCVR-2332同源性为99．3％～99．7％．其余分离毒株在遗传关系上和CH-1a又分为明显的两个群．显示近年来各地PRRSV分离毒株与cH-1a株的遗传差异越来越大。 相似文献
19.
Swine reproductive and respiratory syndrome in Québec: Isolation of an enveloped virus serologically-related to Lelystad virus 
下载免费PDF全文
下载免费PDF全文 Dea S Bilodeau R Athanassious R Sauvageau R Martineau GP 《The Canadian veterinary journal. La revue veterinaire canadienne》1992,33(12):801-808
Sera were collected from convalescent sows and sick piglets from six pig farms in southern Quebec that have experienced outbreaks of the so-called porcine reproductive and respiratory syndrome. By indirect immunoperoxidase, a few of these sera (4 of 14) (28.6%) were found to be positive for antibody to the Lelystad virus, whereas by indirect immunofluorescence 30 of 36 (83.3%) were positive for antibody to the antigenically-related American isolate ATCC-VR2332. Pregnant sows inoculated intranasally with filtered homogenates prepared from the lungs of necropsied piglets obtained from a seropositive farm developed fever, inappetence, and reproductive failure characterized by stillbirths and various stages of mummification. Lesions of interstitial pneumonia were induced in experimentally-infected specific pathogen-free piglets. A virus, having morphological and biological characteristics of viruses assigned to the family Togaviridae, was isolated from lung tissues of experimentally-infected animals; it could only be propagated in primary cultures of porcine alveolar macrophages. Identification of the virus was confirmed by indirect immunofluorescence using a monoclonal antibody directed against the nucleocapsid protein of the ATCC-VR2332 isolate and porcine sera that were found positive for antibody to both the Lelystad and ATCC-VR2332 isolates. 相似文献