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己烯雌酚（Diethylstilbestrol，DES）是人工合成的非甾体雌激素，在兽医临床上，主要用于治疗胎衣不下、子宫内膜炎和排除死胎等。在畜牧生产上。己烯雌酚对雌性动物的生殖、泌乳和产蛋的效应有正负双向调节作用。然而，己烯雌酚的毒副作用也日益凸现。为了寻求一种经济、简便、灵敏、特异性强的测定方法。试验以残留量较高的肝脏为检测对象，分别用高效液相色谱法、荧光分光光度计法、毛细管区带电电泳法对其中的DES含量进行检测，同时以己烯雌酚片剂为参照对3种检测方法的最低检测限进行了比较． 相似文献
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为了建立一种快速、灵敏地检测己烯雌酚(DES)的方法,试验采用胶体化学方法合成了具有强且稳定的电致化学发光(ECL)的Cd S纳米晶,在该纳米晶膜上构建了一种快速、灵敏地检测己烯雌酚的电致化学发光传感平台。结果表明:该传感平台对己烯雌酚的检测线性范围为1~50 pg/m L;当信噪比为3时,电致化学发光免疫传感平台的检测限为1 pg/m L,远远低于水产品的行业标准。将该传感器用于淡水鱼样品的检测,黄鳝与鲫鱼中几乎不含有己烯雌酚,而鲢鱼中有极微量的己烯雌酚残留(5.0 pg/m L)。 相似文献
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己烯雌酚人工抗原的合成及其抗体制备 总被引：5，自引：0，他引：5
以己烯雌酚 (DES)、琥珀酸酐和牛血清白蛋白 (BSA)等为主要原料 ,采用混合酸酐反应 ,首先合成己烯雌酚半琥珀酸酯 (DES- HS) ,经质谱分析鉴定后 ,再将 DES- HS结合到 BSA上 ,并用 SDS- PAGE对 DES- HS- BSA进行测定。以DES- HS- BSA免疫家兔 6次 ,用琼脂双扩散试验测定抗体。试验结果表明 ,高分辨质谱测得合成的 DES- HS分子量为36 8;BSA- HS- DES的 SDS- PAGE图谱经相关软件分析表明 ,单个 BSA上结合有 32个 DES- HS;琼脂扩散试验结果证实 ,免疫兔血清中含有抗 DES的抗体。本试验为下一步研制 DES残留免疫检测试剂盒及抗 DES单抗奠定了基础 相似文献
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己烯雌酚(Diethylstilbestrol,英文缩写为DES)是一种人工合成的二苯乙烯类雌激素药,最初曾作为添加剂被添加在饲料中以促进动物生长。虽然随着其致癌性的发现,我国农业部在1997年以3号文公布禁止使用该药,但当前我国在畜禽产品及水产品中滥用DES现象依然存在,检测工作依然十分必要。目前己烯雌酚的残留检测工作已逐渐简化,而样品的前处理过程越来越成为兽药残留分析过程中的关键[1]。经典的样品前处理方法通常繁琐复杂、操作时间长、选择性差,满足不了兽药残留分析发展的新要求。免疫亲和色谱技术作为一种新的样品前处理技术被逐渐应用到… 相似文献
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用于检测动物性食品中己烯雌酚残留量的常用方法有放射免疫测定(RIA)、酶免疫测定(EIA)、气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)和薄层色谱(TLC)。比较这几种方法,认为RIA法测定的灵敏度较高,测定肝脏中DES的最低检出限可达0.3μg/kg,但对放射防护的要求较高,只能在专门实验室进行。GC法需增加衍生化步骤,检出限为2～10μg/kg。HPLC法用电化学检测器的最低检出限是0.1～0.2μg/kg。TLC法用硅胶作铺板,其最低检出限是0.1μg/kg。EIA法灵敏度高、特异性强,测定中华鳖肌肉中DES的最低检出限0.02μg/kg,是目前用于检测大量样品的首选方法。 相似文献
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己烯雌酚的临床应用、毒负作用及其残留检测方法研究进展 总被引：3，自引：0，他引：3
己烯雌酚(Diethylstilbestol，DES)是一种人工合成的非甾体类雌激素，具有酚羟基结构，其与天然雌激素的性质不同，应用之后，易在动物体内残留并产生严重的毒负作用。为此，欧美等许多国家已禁止在动物性饲料中添加己烯雌酚。本文就己烯雌酚的临床应用、毒负作用及其残留检测方法作一综述。 相似文献
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己烯雌酚单克隆抗体细胞株的筛选及间接ELISA法的建立 总被引：4，自引：0，他引：4
以自行合成的己烯雌酚(DES)免疫原免疫BALB／c小鼠，采用细胞融合、显微克隆等单克隆抗体技术，制备了5株抗DES单克隆抗体分泌杂交瘤细胞株(7B6、4B10、1G10、4E4、2C7)；选择其中的7B6株抗体，建立了间接竞争ELISA法(indirect competitive inhibition ELISA)，通过初步优化，其检测限为10pg／孔，与同类二苯乙烯类雌激素的交叉反应高，而与天然雌激素雌二醇几乎无交叉反应性。这项研究为DES残留检测试剂盒的开发打下了基础。 相似文献
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本试验利用己烯雌酚(DES)单克隆抗体,通过优化反应条件,加标回收试验,确定ELISA检测方法相关参数,建立了己烯雌酚残留的酶联免疫吸附(ELISA)检测法。试验结果显示,包被抗原最佳浓度为2μg/mL,DES单克隆抗体最佳稀释倍数为1∶3×104;标准曲线呈线性相关,相关系数R2=0.9956,IC50=1.103 ng/mL,最适检测范围为0.125~128 ng/mL,检测敏感度为0.077 ng/g;批内和批间变异分别为6.14%和7.48%;鳝鱼肌肉组织的加标回收率为77.6%~94.6%;特异性试验结果表明,该单抗与己烯雌酚单羧丙基醚交叉反应率为112.7%,与其它水产禁用药物交叉反应率0.1%。 相似文献
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动物性食品中己烯雌酚残留量检测方法评定 总被引：8，自引：0，他引：8
用于检测动物性食品中己烯雌酚残留量的常用方法有放射免疫测定(RIA)、酶免疫测定(EIA)、气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)和薄层色谱(TLC)。比较这几种方法，认为RIA法测定的灵敏度较高，测定肝脏中DES的最低检出限可达0．3μg／kg，但对放射防护的要求较高，只能在专门实验室进行。GC法需增加衍生化步骤，检出限为2～10μg／kg。HPLC法用电化学检测器的最低检出限是0．1～0．2μg／kg。TLC法用硅胶作铺板，其最低检出限是0．1μg／kg。EIA法灵敏度高、特异性强，测定中华鳖肌肉中DES的最低检出限0．02μg／kg，是目前用于检测大量样品的首选方法。 相似文献
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为了认识己烯雌酚(DES)对幼年雄性香猪睾丸生殖细胞和支持细胞数的影响,将20只20～25日龄幼年雄性香猪分成4组,对照组只注射生理盐水,试验组连续9d(每天1次)经腹腔分别注射不同剂量(0.03、0.3、3mg·kg-1)己烯雌酚后,最后一次注射24h后取左侧睾丸,入40g·L-1多聚甲醛固定24h,常规制备5μm石蜡切片,用免疫组织化学方法对睾丸支持细胞特异性蛋白生长转录因子4(GATA4)进行检测。显微镜下分别计数支持细胞和生殖细胞数,并统计分析。结果发现:己烯雌酚用量为0.3和3mg·kg-1能促使睾丸生殖细胞数显著增多(P0.05);而使睾丸支持细胞数量显著减少(P0.05);首次发现DES能促进幼年香猪睾丸生殖细胞增殖而抑制其支持细胞增殖。DES的作用因细胞类型不同而有所不同,但其机制还需进一步研究。 相似文献
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为探讨黄芪多糖(APS)对己烯雌酚(DES)诱导的成年小鼠睾丸损伤的保护作用,将40只雄性小鼠分为正常对照(A)、3个黄芪多糖组(B、C、D)和己烯雌酚组(E)。B组、C组、D组分别灌服20、60、100mg/kg的APS,A组每只灌胃0.2mL含量为5g/L的羟甲基纤维素钠,E组每只灌胃0.2mL生理盐水。4h后除A组外,其他4组腹腔注射40mg/kg的DES,A组腹腔注射相同剂量橄榄油。连续给药7d。处理结束后计算睾丸重量及其脏器系数,检测睾丸病理学变化,检测睾丸中超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)的含量;检测血清中睾酮(T)、促黄体素(LH)和促性腺激素释放激素(GnRH)的水平。结果表明,与DES模型组相比较,APS各组睾丸脏器系数变化差异显著,睾丸组织学变化有明显改善。抗氧化结果显示,APS各剂量组睾丸组织中SOD、GSH-Px活力均高于DES组,差异显著,其中100mg/kg组最高。APS各剂量组睾丸组织中MDA含量均低于DES组,差异显著,其中60mg/kg组最低。APS各剂量组血清中T、LH、GnRH的含量均显著增加。结果提示,APS对DES诱导的小鼠睾丸损伤有显著缓解作用。 相似文献
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己烯雌酚在动物食品中残留检测方法简述 总被引：11，自引：1，他引：10
己烯雌酚为一种具有酚羟基结构的人工合成雌激素 ,欧美等许多国家禁止将其用于动物饲料中 ,因此己烯雌酚在动物性食品中的残留普遍受到各国的高度重视。本文就己烯雌酚在动物性食品中的残留检测方法作了综述 ,着重介绍了放射免疫法 ,气相色谱法以及液相色谱法等检测方法。 相似文献
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探讨了在二乙基己烯雌酚（DES）诱发成年动物生精细胞凋亡过程中睾丸一氧化氮（NO）生成和生精细胞一氧化氮合酶（eNOS和iNOs）表达的变化，以期为阐明DES诱发生精细胞凋亡机理的研究提供基础资料。成年雄性仓鼠皮下注射不同剂量DES（分别为0．01、0．1和1mg／kg体重），连续注射7d后取其睾丸，进行NO含量的测定和eNOS、iNOS免疫组化染色。电镜观察生精细胞超微结构的变化，并用TUNEL法检测睾丸中生精细胞凋亡的变化，苏丹Ⅲ染色法检测睾丸生精小管内脂滴分布的变化。结果显示：NO的生成与DES呈剂量依赖性。DES处理后，在1mg／kg体重剂量组，大量生精细胞表达eNOS和iNOS，并出现大量凋亡，退化的生精细胞胞浆内有大量髓样结构，并有大量脂滴分布于生精细胞内和细胞间。eNOS和iNOS阳性生精细胞与凋亡的生精细胞数量和类型基本一致，主要为精母细胞和圆形精子细胞。 相似文献
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酶联免疫法检测饲料中己烯雌酚的探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
己烯雌酚酶联免疫反应测试盒是用于饲料中己烯和其他相关的类固醇残留物如二氢己烯雌酚(hexe-strol)的定量检测。在家禽或鱼类中过量残留会对消费者造成危害,为此己烯雌酚已经被禁止在食品生产中使用。肉类食品中的过量残留,主要是由于被饲喂动物的饲料中含有高含量的己烯雌酚,动物缓慢蓄集所致,所以要想对食品中己烯雌酚得到有效控制,对饲料中的己烯雌酚进行监测至关重要。经实验,酶联免疫法具有操作简单、灵敏度高、时间短、检测成本低廉等优点,检测平均回收率≥98.3%,相关系数(r值)≥0.9992,离散系数(CV值)≤3.4%。 相似文献