江西省猪圆环病毒病流行病学调查及PCR法诊断     

刘烈发  李麟  尚宏华  谌南辉 《江西农业大学学报》2005,27(2):285-287

对江西省养猪场猪圆环病毒2型(PCV-2)感染发病猪群进行临床发病情况调查,并采用PCR方法对所收集的组织病料进行PCV-2的检测,结果表明,PCV-2感染在江西省养猪场已普遍存在。PCR法具有高度特异性,敏感性,简便易操作的特点,是检测中一种比较可靠的方法。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪Ⅱ型圆环病毒混合感染的诊断   总被引：1，自引：0，他引：1  

孙艳永  刘智俊  王泽  连海  高丰  夏志平 《吉林农业大学学报》2009,31(6)

采用病理学、PCR等实验室检测方法对采自吉林省某猪场的发病猪组织病料进行PRRSV、PCV2检测,结果表明该猪场的发病猪存在PRRSV和PCV2混合感染。对PRRSV和PCR扩增结果进行克隆分析,该基因序列与模板(EF112445.1)碱基序列有很高的同源性。  相似文献   

猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法的建立     

潘群兴  何孔旺  段治涛  黄克和 《江苏农业学报》2007,23(6):588-592

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列设计特异性引物,进行PCR反应,回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,再定向克隆到表达载体pET-32a中并转化大肠杆菌Rosetta,进行原核表达.表达产物经His-Bind蛋白纯化试剂盒纯化,平均浓度为1.10 mg/ml.以1.8 μg/ml蛋白包被酶标板,建立ELISA检测方法.建立的ELISA方法与北京世纪元亨公司试剂盒比较,两者检测结果符合率达85%以上.用该方法对常州某猪场36份母猪和156份10～160日龄猪群血清样品进行了检测,检测结果显示母猪阳性率为81.4%,仔猪阳性率随着日龄的增加而逐渐降低,之后由于受PCV-2的感染,阳性率逐渐升高.本试验建立的ELISA方法,具有较好的特异性、重复性和敏感性,可用于猪群PCV-2抗体的大规模检测.  相似文献   

广西规模猪场主要疫病的流行病学调查与防治     

黄夏  陈义强  覃芳芸  磨龙春  胡杰  黄胜斌  胡丽萍 《广西农业科学》2006,37(2):200-202

结合流行病学、临床症状、病理变化,采用PCR技术,对2005年1~6月间广西36个发生疫病的规模猪场提供的肝、脾、淋巴结、脑等84份组织病料进行猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)、猪瘟(CSFV)、猪伪狂犬病(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)检测。结果,检出PRRS阳性病料37份,阳性率44%,阳性场17个,场阳性率47%;CSFV阳性病料16份,阳性率11.9%,阳性场6个,场阳性率22.2%;PRV阳性病料27份,阳性率32.1%,阳性场12个,场阳性率33.3%;PCV-2阳性病料44份,阳性率52.3%,阳性场21个,场阳性率58.3%。同时还发现组织病料和发病猪场中存在猪繁殖与呼吸综合症、猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型不同程度的混合感染现象,其中PRRS、PCV-2混合感染最为严重,样品阳性率33.3%,场阳性率25%。表明广西规模猪场主要疫病十分复杂,混合感染现象比较普遍,对广西养猪业带来巨大威胁,应加强疫病的防控工作。  相似文献   

华南地区猪输血传播病毒流行病学调查与分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

南文金  娄高明  黄健强  冯顺胜 《河南农业科学》2011,40(12):145-148

为了解华南地区规模化猪场猪输血传播病毒(TTV)感染状况,采用PCR方法对2005-2007年间来自广东、江西、湖南、福建和广西五省44个规模化猪场193份病料进行检测.结果显示,TTV1型阳性率为41.5％,TTV2型阳性率为21.8％,TTV1型和TTV2型共同感染阳性率为13.0％.TTV1型阳性猪场占72.7％...  相似文献   

四川省某规模化猪场PCV-2感染的诊断     

崔兆连  宋苍浩  黄伟 《北京农业》2012,(15):118

2011年3月底四川省泸州市某猪场暴发疫病,仔猪死亡率近50.0%,种公猪精子质量下降。猪场采集22份血清和1份组织病料,PCV-2经PCR扩增检测,结果显示,23份病料中,6份PCV-2阳性,3份疑似阳性,阳性率为40.1%。  相似文献   

猪圆环病毒2型陕西杨凌株的分离鉴定及全基因组分析          下载免费PDF全文

汤智慧  郭抗抗  张彦明 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2011,39(4):7-13

[目的]分离得到猪圆环病毒2型(PCV-2)陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID50),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据.[方法]从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中、分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、间接免疫荧光试验及电镜观察,对分离病毒进行鉴定;用免疫过氧化物酶细...  相似文献   

新现猪圆环病毒3型及圆环病毒2型双重PCR检测方法的建立与应用     

张帆帆  李龙显  叶昱  李凯  郭楠楠  张敏  黄冬艳  吴琼  何后军  宋德平  唐玉新 《江西农业大学学报》2018,(1)

根据GenBank数据库中的新现猪圆环病毒3型(PCV-3)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的OFR2基因设计了2对扩增PCV-3和PCV-2的特异性引物,通过优化各反应条件,建立同时检测PCV-3和PCV-2的双重PCR方法。敏感性和特异性结果显示,该方法对PCV-3和PCV-2的最低核酸检测量均为1.0×103拷贝/μL,而对猪伪狂犬病毒(PRV)、猪delta冠状病毒(PDCoV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪瘟病毒(CSFV)的扩增结果均为阴性。应用所建立的双重PCR检测了临床上256份样品,结果表明,PCV-3和PCV-2感染的阳性率分别为0.78%(2/256)和86.3%(221/256),仅有1份样品为PCV-3和PCV-2混合感染,混合感染阳性率为0.39%(2/256)。试验结果表明,本研究建立的PCR方法敏感、特异,适于临床样品检测,为猪群中PCV-3和PCV-2的临床快速诊断和流行病学调查提供了一种工具。  相似文献   

检测猪圆环病毒2型PCR方法的建立   总被引：5，自引：0，他引：5  

杭柏林  刘丽艳  王宪文  王丽荣  李银曼  胡建和 《安徽农业科学》2008,36(16):6678-6679

[目的]为快速诊断猪圆环病毒病提供参考。[方法]根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,建立诊断PCV-2地方分离株的PCR方法。[结果]各物质在PCR反应中最佳浓度分别为:dNTP 220 pmol/ml,Taq酶0.1 U/μl,引物20 pmol/μl。从PCV-2阳性病料中提取DNA,在优化条件下进行PCR扩增,获得预期的494 bp特异性条带。用该PCR方法对PCV-2、PRRSV、HCVS、IV、PPV进行检测,PCV-2为阳性,而PRRSV、HCV、SIV、PPV检测均为阴性,未出现交叉反应,说明该PCR方法对PCV-2具有良好的特异性。该PCR方法可检出1.25 ng模板DNA,具备较高的敏感性。[结论]使用该PCR方法检测PCV-2是切实可行的。  相似文献   

猪圆环病毒2型江西樟树株的分离与鉴定     

刘昌林  万培伟  何后军  万根  刘旭杰  邬达敏 《江西农业学报》2013,(7):81-84,90

对江西省樟树市某猪场疑似PCV2感染猪的血液、肺脏和淋巴结等病料进行PCR扩增检测,将PCR检测为PCV2阳性的病料进行PCV2病毒的分离,并将分离纯化的PCV2病毒接种试验猪,获取感染PCV2的试验猪的相关脏器进行荧光定量PCR和免疫组化检测。结果表明:利用间接免疫荧光试验(IFA)和PCR方法可以确定PCV2的存在。利用荧光定量PCR和免疫组化可以检测到人工感染PCV2的试验猪相关脏器有PCV2病毒的存在。  相似文献