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抗鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的研制及在诊断上的应用 总被引：2，自引：1，他引：1
鸡传染性喉气管炎王岗株病毒（ＩＬＴＶ）经ＳＰＦ鸡肾细胞增殖，差速离心及蔗糖密度梯度离心纯化；电镜观察，以纯化的病毒４次免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，按常规方法进行细胞融合，采用有限稀释法克隆，经ＥＬＩＳＡ筛选出３株（８Ｅ２、１３Ｇ６，９Ｃ４）分泌抗ＩＬＴＶ特异ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞，特异性试验表明经闪与鸡的传染性支气管炎，痘病毒，新城疫病毒马立克氏病病毒，白血病病毒及鸡肾细胞均无交叉反应。在获得三株单抗建立单 相似文献
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用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。 相似文献
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鸡传染性喉气管炎ＥＬＩＳＡ诊断方法的研究──ＳＰＡ—ＥＬＩＳＡ检测室内外ＩＬＴＶ病鸡效果黄承锋，吕敏娜，彭万强，孔庆飞，朱治远，幸桂香，杨海金（广东省农科院兽医研究所广州５１０６４０）用ＳＰＡ—ＥＬＩＳＡ诊断方法，在室内检测ＩＬＴＶ人工接种鸡胚尿囊膜... 相似文献
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应用杂交瘤技术获得了３株抗传染性法氏囊病病毒（ＣＪ８０１株）的单克隆抗体。３株单抗与鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡马立克氏病病毒均无交叉反应。ＣｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅＥＬＩＳＡ表明、３株单抗所对应的抗原位点互不重叠。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明、３株单抗所对应的抗原位点都位于ＶＰ２ｂ上。 相似文献
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本文提出了硝酸纤维作固相载体，辣根过氧化物酶标记的抗传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ），邻苯二胺为底物，检测了ＩＬＴＶ抗体的免疫斑点试验方法（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。该方法较常规方法敏感，特异，省时，该方法的建立为鸡群疫监测，免疫鸡群抗体水平的检测提供了新的可靠方法。 相似文献
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鸡传染性喉气管炎ＥＬＩＳＡ诊断方法研究──ＳＰＡ─ＥＬＩＳＡ检测ＩＬＴＶ抗原方法的初步建立彭万强，黄承锋，吕敏娜，孔庆飞，朱治远，幸桂香，杨海金（广东省农科院兽医研究所广州．５１０６４０）葡萄球菌Ａ蛋白（ＳａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓＰｒｏｔｅｉｎＡ─Ｓ... 相似文献
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用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
用传染性支气管炎病毒Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒，减蛋综合症病毒等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７Ｃ孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗，进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＴＢＤＶ、ＩＬＴ 相似文献
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利用常规法建立分泌抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的单抗细胞株，选其中特异性强、稳定性好、分泌抗体效价高的两株单抗２（１）和２（４），用于建立单抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＢＶ，该方法仅与ＩＢＶ，呈阳性反应，而与鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊炎病毒、禽腺病毒、鸡传染性喉气管炎、鸡支原体等病原体均呈阴性反应。１４日龄ＳＰＦ鸡接种ＩＢＶ后，用本方法对其两周内的口腔棉拭样品进行跟踪检测，结果检出率为８０％。将 相似文献
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鸡白血病病毒抗原ELISA试剂盒的研制和应用 总被引：5，自引：2，他引：3
以双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）为基本原理，成功地研制出鸡白血病病毒抗原ＥＬＩＳＡ试剂盒，该试剂盒与国外同类试剂盒相比，具备相同的特异性和敏感性，对ＲＡＶ－１纯化样品的最小检出量可达０．７８ｕｇ／ｍｌ，且敏感性高于直接补体结合试验。经初步应用发现，我国商品种鸡群ＡＬＶ阳性率为０．７－１４％，在部分ＳＰＦ鸡群中未检出阳性鸡。 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒中国王岗株gX基因的克隆及鉴定 总被引：4，自引：1，他引：3
以ｐＵＣ１９质粒为载体克隆鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）中国王岗株的ＤＮＡ，构建了鸡传染性喉气管炎病毒ＤＮＡ的ＫｐｎⅠＤＮＡ文库。参考ＩＬＴＶ－ＳＡ２株ｇＸ基因的核酸序列，设计并合成了分别为１２ｂｐ和１３ｂｐ的１对引物。以ＩＬＴＶ中国王岗株ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ方法特异性地扩增出０．８４ｋｂ的ＩＬＴＶ－ｇＸ基因片段。以地高辛标记该０．８４ｋｂ的片段为探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交从ＩＬＴＶ中国王岗株ＫｐｎⅠＤＮＡ文库中筛选出３个含５．２ｋｂ外源ＩＬＴＶＤＮＡ片段的ｇＸ基因阳性重组子。经酶切分析、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＰＣＲ检测和该片段部分酶谱分析表明，ＩＬＴＶ中国王岗株ＤＮＡ５．２ｋｂ的ＫｐｎⅠ片段无论是片段大小还是酶切图谱均与ＩＬＴＶ－ＳＡ２株完全相同，而且Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ检测均为ｇＸ阳性，证明其中含有完整的ｇＸ基因 相似文献
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应用鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）作免疫原建立了８株分泌抗ＩＬＴＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株。这８株ＭｃＡｂ均具有荧光抗体的特性，没有中和病毒的能力，分别属于ＩｇＧ２ａ，ＩｇＧ３和ＩｇＭ，应用异硫氰酸荧光素标记ＭｃＡｂ，建立了直接荧光抗体试验，用其检测ＩＬＴＶ抗原与分离病毒的符合率为９２．８％。 相似文献
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用针对传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）不同抗原表位的４株单抗（ＭｃＡｂ），混合包被Ｅｐｐｅｎ－ｄｏｒｆ管，捕捉ＩＬＴＶ，同时加入包含ＩＬＴＶＴＫ基因的两个引物，建立了能检测ＩＬＴＶ的抗原捕获聚合酶链式反应，得到了与预计大小一致的１２６２ｂｐ的ＰＣＲ产物，用ＴＫ基因内部酶切位点ＥｃｏＲＩ进行酶切，得到了预计大小为５９５ｂｐ和６６７ｂｐ的两个片段，证明了ＰＣＲ的产物的特异性，该方法的建立为传染性喉气管炎的快速确诊打下了基础，对于传染性喉气管炎的防制具有重要意义 相似文献
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鸡传染性喉气管炎ＥＬＩＳＡ诊断方法研究──ＳＰＡ─ＥＬＩＳＡ检测ＩＬＴＶ的特异性试验吕敏娜，黄承锋，彭万强，孔庆飞，朱治远，杨海金（广东省农科院兽医研究所广州５１０６４０）１试验材料固相载体：４×１０凹孔聚苯乙烯微量反应板，上海塑料三厂生产。酶标检测... 相似文献
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斑点酶联免疫吸附试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体方法的建立 总被引：6，自引：0，他引：6
首次建立了斑点－酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ，美洲株）抗体的方法。特异性鉴定表明，ＰＲＲＳＶ不与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒阳性血清反应；与美国进口的ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ诊断试验盒检测结果比较，３５份猪血清的阴、阳性检出总符合率为８２．９％（２９／３５），其中Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性检出率略高于进口试剂盒的检出率。 相似文献
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光生物素标记DNA探针检测传染性喉气管炎病毒感染 总被引：1，自引：0，他引：1
用光生物素标记４．３ｋｂ的传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）ＤＮＡ片段作为探针，检测５只人工接种ＩＬＴＶ的ＳＰＦ鸡在不同时期采集的喉拭子样品或血清，并检测采自自然发病鸡群的喉试子样品。结果表明，用核酸探针点杂交方法在人工感染鸡喉气管中检出ＩＬＴＶ的时间为接种后６～１０天；该法敏感，特异，对诊断ＩＬＴＶ感染有实用价值，特别适用于进出口检疫和ＳＰＦ鸡群的监测。 相似文献
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ELISA检测鸡传染性贫血病病毒抗体中的非特异性反应问题 总被引：2，自引：0，他引：2
为了监测ＣＳＩＲＯＳＰＦ鸡群，经常用商业ＥＬＩＳＡ试剂盒检测鸡群的抗鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）抗体。近来发现个别鸡群的阳性率达１８．２％，占总数的２．７％。但后来采血发现大部分可疑鸡都为阴性，可见前面的结果存在假阳性。 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒形态发生的研究进展黄金华（综述）李成谷守林（审校）鸡传染性喉气管炎（ＩＬＴ）是由ＩＬＴ病毒（ＩＬＴＶ）引起的一种急性传染病，其特征为呼吸困难、喘气、咳出血样渗出物。喉部和气管粘膜肿胀，出血并形成糜烂，感染ＩＬＴＶ可致产蛋下降，死亡... 相似文献
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一种值得高度警惕的疾病——鸡传染性喉气管炎■何孔旺（江苏省农科院畜牧兽医研究所２１００００）鸡传染性喉气管炎（ＩＬＴ）是由鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）引起的鸡的一种急性接触性呼吸道传染病。主要特征是结膜炎、呼吸困难、咳出带血的渗出物，喉部和气管部... 相似文献