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相似文献
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1.
两种克伦特罗ELISA试剂盒的比对试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
应用意大利Tecna公司和德国r-B iopharm公司的克伦特罗酶联免疫(ELISA)试剂盒检测猪尿样和猪肝样品,并对两者的标准曲线线性范围、斜率和B/B0抑制浓度、板内和板间变异系数、阳性检出率、回收率等进行了比对。结果表明,当阳性判定阈值设定在1.0~5.0 ng/mL范围时,2种试剂盒均能满足分析要求,对尿样检测Tecna试剂盒比r-B iopharm试剂盒的检测时间要短;但在检测低浓度克伦特罗的尿样时,r-B iop-harm试剂盒更好,对肝样检测Tecna试剂盒有优势。  相似文献   

2.
三种ELISA法检测猪尿中莱克多巴胺的比较分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
在各种莱克多巴胺检测方法中,适合应用于大批检测样品的是ELISA方法。但目前市场上的大多数检测莱克多巴胺的试剂盒对猪尿样的检测会造成假阳性,有的假阳性率达到33.3%。本实验用三种不同厂家的试剂盒对15份猪尿样进行了检测,通过比较分析得出:对尿样的稀释可以有效的减少阳性的产生,在制备标准曲线时加入尿样背景也可以减少假阳性的产生。方法C的添加回收率在65%以上,可以比较准确的检测猪尿中的莱克多巴胺。  相似文献   

3.
为了寻找适合生产上使用的检测莱克多巴胺残留的试剂盒,本试验对一新型莱克多巴胺试剂盒的标准曲线,变异系数,添加回收率做了测试,并对多批次尿样实测。结果该试剂盒最低检测限为0.1ppb,变异系数在15%左右,添加回收率75%~116%,尿样实测结果与实际情况相符。本试验结果表明,这种试剂盒敏感度符合莱克多巴胺低水平残留检测要求。  相似文献   

4.
为了筛选出高效、低成本、用时短的RNA核酸提取试剂盒,为各级实验室开展动物疫病监测提供参考,试验选择3种常用磁珠法核酸提取试剂盒(病毒DNA/RNA提取试剂盒A、病毒RNA提取试剂盒B及病毒总核酸提取试剂盒C)对临床粪便样品提取猪流行性腹泻病毒RNA、临床组织病料样品提取猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA,通过实时荧光定量反转录(RT)-PCR方法进行检测,以Ct值评价分析提取效率及重复性,同时对不同试剂盒提取时间及价格进行综合比较分析。结果表明:对于粪便样品,B、C试剂盒的RNA提取效率要高于A;3种试剂盒对PRRSV浓度较高的组织样品均具有较好的提取效果,A、B试剂盒的RNA提取效率高于C试剂盒,但B、C试剂盒的重复性优于A试剂盒。其中A试剂盒对于组织样品中高浓度病毒样品提取效率较高,时间最短;B试剂盒对于粪便样品中低浓度RNA病毒提取效率最高,但价格最贵,且时间最长;C试剂盒对粪便中低浓度样品RNA提取效率高于A试剂盒,价格最低。综合提取效率、时间及成本等因素分析认为,试剂盒C性价比较高,可用于大批量临床样品检测。说明不同试剂盒对不同种类样品提取后,提取效率存在差异,实验室可根据实际情况进行选择。  相似文献   

5.
为了评估某些批次的禽白血病病毒(ALV)抗体商品化 ELISA检测试剂盒在检测鸡群中A/B亚群禽白血病病毒(ALV-A/B)抗体阳性率的可靠性,使用同一批次试剂盒,对往年ALV-A/B抗体检测阳性率达标(<1%)的A类鸡场及往年ALV-A/B抗体检测阳性率不达标(>1%)的B类鸡场所送检样品进行初检,在A类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的8份阳性样品,在B类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的40份样品,再使用相同批次的试剂盒将每个初检阳性样品做3个孔的重复检测,并以上述48份样品为一抗同时做间接免疫荧光试验(IFA),系统比较了IFA和ELISA 2种方法检测结果的一致性。结果发现,A类鸡场初检为阳性的8份样品经复检和IFA检测均变为阴性;B类鸡场4份样品(4/40)ELISA复检和IFA结果均变为阴性,36份样品(36/40)ELISA复检仍为阳性,但其中20份呈IFA阳性,16份呈IFA阴性,结果表明某些批次的试剂盒在特异性和稳定性方面存在一定问题。提示,相关企业在进行大批量样本检测时,ELISA阳性样品需结合IFA进行结果判定,以提高检测的准确性。  相似文献   

6.
为快速获得高质量的柑橘黄龙病(HLB)植物样品DNA,本研究在传统CTAB法基础上,结合热萃取技术,建立了一种简便、快速提取HLB植物样品DNA的CTAB简化法。与Solarbio植物基因组DNA提取试剂盒和传统CTAB提取法相比,该方法所需时间短,1~2 h即可完成整个提取过程,获得的HLB植物样品DNA质量高、产量多。同时比较了三种方法制备模板时黄龙病病原菌和其他柑橘病原菌的PCR检出率,CTAB简化法和传统CTAB法检出率一致,试剂盒稍低,表明本研究建立的CTAB简化法可用于柑橘DNA病害PCR检测DNA模板的制备。本研究研发的HLB植物样品DNA提取方法优势明显,适用于大量病样的快速检测。  相似文献   

7.
禽白血病(Avian leukosis)净化要求在较短时间内最大程度检出阳性个体,选择特异性好、灵敏度高的抗原检测试剂盒十分关键。本研究比较了两种进口试剂盒检测1日龄胎粪和ALV-J、ALV-K感染的细胞上清的灵敏性,结果发现,不同试剂盒对不同样品的检测灵敏度具有一定差异。检测胎粪样品时,试剂盒B可检出阳性的最高稀释倍数高于试剂盒A;检测细胞上清时,试剂盒B的最早检出阳性时间晚于试剂盒A。本研究将为疾病净化过程中试剂盒的选择提供方法参考和数据支持。  相似文献   

8.
克伦特罗的检测方法很多.但ELISA法由于灵敏度高、简便快速、易普及等优点.广泛用于批量样品的定性和半定量检测。然而.用ELISA法测定克伦特罗残留.若在试剂盒选用、阳性判定阈值设定、样品前处理、试剂盒操作过程等方面不注意,均有可能引起测定失败。本文基于数万个尿液、饲料和组织等样品的实测情况总结了ELISA法测定克伦特罗残留应注意的技术要点.  相似文献   

9.
研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能扩增出弓形虫特异性基因MIC3片段,与猪球虫、贾第虫、猪旋毛虫和隐孢子虫无交叉反应;该检测方法最低能够检测到10个弓形虫速殖子的DNA,不同批次的试剂盒对同一样品检测和同一批次对不同样品检测,有较高的重复性和稳定性,且常温下可保存1年以上,临床应用效果显著。该检测试剂盒对弓形虫病早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。  相似文献   

10.
禽流感间接ELISA诊断试剂盒的研制及应用   总被引:23,自引:0,他引:23  
将成熟的禽流感音接ELISA快速诊断技术试剂盒化,确定其外包装、规格、盒内组成,对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性,可重复性、符合率、与国外同类产品比较,保存期等进行了全面、详细的研究。试剂盒由9种成套试剂组成,在-15℃至-20℃保存540天各项性能仍然很好。该试剂盒与离流感间接ELISA诊断试剂盒对同样血清样品检测,符合率为100%。拥有剂盒,只票面 准备生理盐水,即可对大量血清样品同时进行检测,操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、稳定、快速、更适合于禽流感免疫技术的监测及现地疫病诊断等需要。先后制备诊断试剂盒16个批次,已成功应用于我国省、市兽医站、兽医研究所、农业院校、农科院,农业公司、口岸检疫部门及鸡等各领域对禽流感的定性诊断、流行病学调查、免疫抗体监测等。  相似文献   

11.
对国内外3种口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体间接ELISA检测方法和1种口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体阻断ELISA检测方法,在检测牛血清时的敏感性和特异性进行比较,以期获得可应用于口蹄疫检疫的有效试剂盒。采用国内外3种口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体间接ELISA试剂盒和1种阻断ELISA试剂盒,对150份牛血清样品进行ELISA检测。同时对150份样品进行非结构蛋白抗体酶联免疫电转移印迹试验(EITB),以评估4种ELISA检测结果。结果 4种试剂盒的敏感性均达到100%,特异性分别为100%、95%、73%、99%。结论:国内生产的口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体检测试剂盒可以用于牛口蹄疫血清学筛选性试验。  相似文献   

12.
提取DNA是利用PCR技术检测纤维的关键技术难点。对牦牛绒DNA的提取方法进行了试验,通过PCR扩增的方法进行验证。结果表明:使用Ta Ka Ra Mini BEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0试剂盒,将纤维样品尽量处理成粉末状,并在样品经裂解液处理后先离心除去其中尚未完全溶解的纤维,然后进行PCR扩增是比较有利的,完全能够得到满足PCR扩增要求的DNA样品。  相似文献   

13.
采用金刚烷胺酶联免疫吸附试剂盒和液相色谱串联质谱法测定禽肉和禽蛋中金刚烷胺药物残留,随机抽取禽蛋606批次,禽肉278批次,经过金刚烷胺酶联免疫吸附试剂盒筛选后,通过LC-MS/MS确证,共检出3批阳性样品。结论:快速筛选法是大批量样本药物残留检测的有效手段,可以大大提高工作效率。金刚烷胺作为禁用药物,依然在畜禽养殖使用,从阳性溯源结果来看,具有明显的渠道分布规律,规模养殖户明显好于一般养殖户,超市渠道要好于农贸市场的样品。  相似文献   

14.
国家出入境检验检疫局制定了一系列行之有效地监管办法,对供港活猪中的β-兴奋剂进行检测,基本上杜绝了供港活猪中此类药物的使用。目前国内部分大城市的兽医管理部门亦已注意到此类药物对人体的危害性,准备对β-兴奋剂进行检测。我们目前使用的是英国RANDOX实验室出品的β-Ago-nistELISA试剂盒,对采自养猪场的猪只尿样进行β-兴奋剂检测,现就尿样采集及检测方法作简单介绍:1尿样的采集、运输、保管尿样必须采用随机采样的原则,采自饲养场内育肥阶段的新鲜尿液。应用经消毒的洁净溶器(如量杯)等在猪自然排尿时采集排尿中段…  相似文献   

15.
为比较不同类型核酸提取试剂盒的布鲁氏菌核酸提取效率,选取6种核酸提取试剂盒(磁珠法、柱式法各3种),分别对布鲁氏菌灭活菌液和16份临床组织样品进行核酸提取,使用荧光定量PCR方法评估提取效率。结果显示:6种试剂盒在提取10~2和10~4稀释度的布鲁氏菌灭活菌液核酸时,磁珠法的提取产物荧光定量PCR的Ct值整体低于柱式法,批内变异系数小于5%;提取临床组织样品时,2种柱式法细菌提取试剂盒能够提取全部样品的核酸,2种磁珠法细菌提取试剂盒提取了14份核酸,剩下的1种磁珠法和1种柱式法病毒提取试剂盒分别提取了12份和3份核酸。结果表明:6种试剂盒均能有效提取布鲁氏菌灭活菌液,其中磁珠法提取效率略高于柱式法;柱式法细菌DNA对临床组织样品的提取效率略高于磁珠法细菌DNA,但磁珠法和柱式法的病毒DNA提取试剂盒均不适用于临床组织样品的布鲁氏菌核酸提取。在实际操作中,应根据实验室条件、样品数量和任务紧迫性等因素,选取应用合适的试剂盒。本研究为布鲁氏菌核酸提取方法的选择提供了参考。  相似文献   

16.
将鸭瘟病毒(DPV)CHv株经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心和蔗糖密度介质离心制备纯化抗原,建立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对其进行了标准化研究,确定了最佳工作条件,研制了相应的检测试剂盒并对盒内各组分的保存条件、质量控制以及试剂盒的特异性、重复性进行了研究。结果显示,4.75μg/孔的纯化DPV抗原包被反应板可获得良好的特异性和敏感性,1∶100稀释的待检血清样品反应后D405 nm值换算为抗体效价的标准直线方程为y=1.573+3.552x(r=0.953,n=40)。试剂盒在4℃保存3个月或-20℃保存10个月后各项性能都很好。应用该试剂盒对皮下注射、口服和滴鼻免疫DPV弱毒的20日龄樱桃谷鸭血液中抗DPV特异性IgG抗体效价进行了测定,皮下免疫鸭于第6 d,口服和滴鼻免疫鸭于第9 d可在血清中检测到DPV特异性抗体,且至第60 d时依然可检测到高效价抗体。证实,该试剂盒可用于鸭瘟的血清流行病学调查和鸭场免疫抗体水平的监测。  相似文献   

17.
试剂盒法检测兽药残留应注意的问题   总被引:1,自引:0,他引:1  
应用ELISA技术生产的快速检测试剂盒作为一种比较成熟的检测模式,已经很普遍地应用在兽药残留监督检测工作中了。这种方法速度快、仪器化低,可用于大量样品的筛选检测,阳性可疑样品再用HPLC或GC—MS确证,这样可以大大提高工作效率,降低检测成本。而且随着生产企业的不断研发,检测样品的范围广(包括鸡肉、鸡肝、猪肉、猪肝、肠衣、蜂蜜、牛奶、尿液、血清、  相似文献   

18.
用3种盐酸克伦特罗ELISA检测试剂盒对10份未知猪尿液样品及5份标准浓度猪尿液样品进行检测,以比较试剂盒的检测效果。结果表明,试剂盒A在盐酸克伦特罗浓度为0ng/mL-10ng/mL的范围内其检测结果较准确,当浓度大于10ng/mL时其检测结果偏小;试剂盒B对盐酸克伦特罗的检测结果较标准样品浓度有时偏高,有时偏低,结果不够准确;试剂盒C的检测结果与标准样品的实际浓度相近,结果较准确。稳定性方面,试剂盒B的稳定性差,而试剂盒A及试剂盒C的稳定性较好。总的来说,试剂盒C在检测结果的准确性和稳定性上均较好,是3种试剂盒中效果最为理想的盐酸克伦特罗检测试剂盒。  相似文献   

19.
对市场销售的四种未明确标识可用于猪尿样品的赛庚啶ELISA试剂盒进行考察,使用空白猪尿和不同浓度的空白添加猪尿对其反应原理、可操作性、灵敏度、检测限、回收率等进行研究,发现其中三种赛庚啶ELISA试剂盒可用于猪尿中赛庚啶残留检测,但需根据试剂盒的特点按需选择。结果表明使用市售的ELISA试剂盒监测猪尿中赛庚啶残留简便可靠,可作为初筛方法,检坝0限为0.5μg/L。  相似文献   

20.
3月13日江苏省苏州市发生“瘦肉精“中毒事件后,农业部即派员到生猪原产地-浙江省嘉兴市进行了拉网式检查,对嘉兴市桐乡、平湖、嘉善三个县市33个乡(镇)150个行政村的311个规模化养猪场(户)进行了突击检查。在抽检的1512批次尿样中,共检出含“瘦肉精”样品44批次,场(户)检出率为4.2%。  相似文献   

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