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1.
中国部分地区猪圆环病毒2型的基因型分析 总被引：6，自引：1，他引：5
对中国11个省(市)部分猪场收集的812份病料,应用ORF2-PCR进行检测,发现有235份为PCV2阳性病料.利用鉴别PCR方法从235份阳性病料中,检出10份PCV2a基因型和133份PCV2b基因型,检出率分别为4.2%、56.6%.进一步对ORF2-PCR检测阳性的部分模板进行全基因组扩增,构建阳性重组质粒,对插入质粒的片段进行测序鉴定,利用DNAStar进行同源性分析,同GenBank参考毒株绘制系统发育树,从系统发育树中也可分出PCV2a、PCV2b 2种基因型.鉴别PCR和测序结果说明,我国部分地区流行的猪圆环病毒2型以PCV2b基因型为主,少数为PCV2a基因型,也有既非PCV2a又非PCV2b的基因型(PCV2c?). 相似文献
2.
《动物医学进展》2015,(10)
为了解黑龙江省近年来猪圆环病毒2型(PCV-2)的流行情况,将2012年-2014年期间采集自黑龙江哈尔滨、七台河、大庆、牡丹江、绥化、伊春、佳木斯等不同地区的疑似PCV-2感染病料共246份进行了PCR检测和病毒分离鉴定,随后对所分离到的11株PCV-2毒株进行ORF2基因的克隆与序列分析。结果表明,在本次采集的样品中,PCV-2阳性病料193份,阳性率为78.46%;各分离毒株之间ORF2基因同源性为90.5%~100%;11株分离病毒中,有6株为PCV-2b基因型,3株为PCV-2a型,2株为PCV-2d型。提示了2012年-2014年间黑龙江省部分地区猪只相继受到PCV-2感染,流行的基因型以PCV-2b为主,各个地区差异不大。 相似文献
3.
参照国外发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,从上海市临床病料中提取PCV-2基因组DNA,进行PCR全基因扩增。回收PCR产物,将其插入pMD18-T载体,并对筛选出的阳性质粒进行测序。应用DNAStar序列分析软件,对所测PCV-2序列与GenBank中登录的国内外PCV-2毒株进行同源性比较。结果显示,PCV-2上海株与国内外毒株的核苷酸同源性高达95.0%～100%。进化树分析结果显示,其中9株PCV-2病毒属于PCV-2b亚型,3株PCV-2病毒属于PCV-2a亚型,且9株PCV-2b亚型毒株部分核苷酸位点显示其属于强毒力毒株。研究表明,上海市PCV-2感染以PCV-2b亚型为主,且氨基酸位点表明其具有较高的毒力。 相似文献
4.
参照GenBank中已发表的有关基因序列,分别设计合成针对PCV-2、PRRSV和CSFV的3对引物,分别建立检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV感染的PCR或RT-PCR方法。结果显示,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,分别各呈现1条大小约1154,372,375bp的特异条带。采用建立的PCR方法对江西各地发病猪和死亡猪的133份临床病料进行PCV-2检测,结果总检出率53.38%(71/133)。在71份PCV-2阳性的病料中检测出PRRSV20份,阳性率28.17%(20/71);CSFV9份,阳性率12.68%(9/71);PRRSV和CSFV共同感染9份,阳性率12.68%(9/71)。 相似文献
5.
华东地区PMWS患病猪群PCV-2的检测及其基因特征 总被引：8，自引：2，他引：8
用 PCR方法 ,对江苏、上海、山东、江西、安徽和浙江等省市 6 5家猪场 99例断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)肺脏和淋巴结病料 ,进行了猪圆环病毒 - 2 (PCV- 2 )基因检测 ,发现其中 18家猪场 2 1例病料为 PCV- 2阳性。源自安徽和上海的 PCV- 2分离株经基因序列分析显示 ,2个分离株部分 ORF2 与国外分离毒株同源性为 92 %～99%。安徽分离株 AHHF6与韩国分离株 KSY- 1同源性为 99% ,而上海分离株 SHHT1与加拿大分离株 Imp.114 7同源性为 98%。上述结果表明 ,我国 PMWS患病猪群广泛存在 PCV- 2 ,不同地区 PCV- 2存在一定基因差异 ,它们可能来源于不同国家或地区 相似文献
6.
猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及其在临床检测中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
选择猪圆环病毒2型(PCV-2)基因保守区设计1对引物P1和P2,扩增536 bp的片段,该方法可以特异地检测出PCV-2的DNA,而对猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒及未接PCV-2的PK-15细胞均呈阴性;该法能检测出29 ng/L的病毒DNA。对扩增片段进行测序,结果表明扩增片段属于PCV-2。应用该方法对2008年度上海及周边地区送检的91份临床样本进行了PCV-2的检测,结果表明,阳性样本为52份,阳性率为57.14%。研究结果表明,建立的PCR方法检测PCV-2具有较好的敏感性和特异性,可用于PCV-2感染疑似病例的诊断及其分子流行病学调查。 相似文献
7.
根据PCV-1、PCV-2a和PCV-2b差异序列,设计了3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了可以用于PCV检测及PCV-1、PCV-2a和PCV-2b分型的PCR方法。结果表明,三重PCR检测的最低敏感度可达4.87×107 copies/μL(PCV-1)、2.83×107 copies/μL(PCV-2a)和2.96×106 copies/μL(PCV-2b)。引物特异性良好,各引物之间没有交叉反应,对伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)检测均为阴性。应用该方法对采自陕西省的56份样品进行检测,PCV-1检出率57.14%(32/56),PCV-2a检出率1.78%(1/56),PCV-2b检出率42.86%(24/56),多重PCR检测结果与单PCR检测结果的符合率达99%以上,可用于猪圆环病毒的临床检测及流行病学监测等。 相似文献
8.
安徽省仔猪腹泻5种病毒感染情况的调查研究 总被引：4，自引：0，他引：4
为了解安徽地区仔猪病毒性腹泻流行病学特点,对从安徽省37个规模化猪场采集腹泻仔猪的粪便或病死猪肠段共计186份,用RT-PCR和PCR技术进行了猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(RV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)等5种病毒的检测.结果表明,PEDV阳性病料数占59.1％,阳性猪场占75.7％;TGEV阳性病料数占5.4％,阳性猪场占8.1％;RV阳性病料数占2.7％,阳性猪场占2.7％;PRV阳性病料数占8.1％,阳性猪场占21.6％;PCV-2阳性病料数占25.8％,阳性猪场占54.1％.PEDV与TGEV混合感染占4.3％,PEDV与PCV-2混合感染占18.8％,PEDV与PRV混合感染占10.8％,PRV和PCV-2混合感染占4.8％;其他病因50例,占26.9％.结果表明,PEDV、PCV-2 、PRV的单纯或混合性感染是近年安徽省仔猪腹泻的最为重要的3种病毒性病因,说明在今后的仔猪腹泻病防控过程中,应该着重加强对该3种疾病的综合防控. 相似文献
9.
《黑龙江畜牧兽医》2014,(14)
为了了解泰州地区猪场繁殖障碍性疫病的发病情况,采用RT-PCR和PCR技术对2012年1—12月间泰州地区36个发生疫病的规模猪场采集的肝脏、脾脏、淋巴结、脑等84份组织病料进行猪蓝耳病(PRRS)、猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)、猪圆环病毒2型(PCV-2)检测。结果检出PRRS阳性病料37份,阳性率44.0%,阳性场17个,场阳性率7.2%;CSF阳性病料16份,阳性率19.0%,阳性场8个,场阳性率22.2%;PR阳性病料27份,阳性率32.1%,阳性场12个,场阳性率33.3%;PCV-2阳性病料44份,阳性率52.4%,阳性场21个,场阳性率58.3%。同时还发现组织病料和发病猪场中存在猪蓝耳病、猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型不同程度的混合感染现象,其中PRRS、PCV-2混合感染最为严重,样品阳性率33.3%,场阳性率25.0%。表明泰州地区规模猪场繁殖障碍性疫病十分复杂,混合感染现象比较普遍,给泰州养猪业带来巨大威胁,应加强疫病的防控工作。 相似文献
10.
为分析某猪场出现"僵猪"的可能原因,对该猪场的11头"僵猪"采集血液样品,用RT-PCR方法检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用PCR方法检测猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)。结果11份样品的CSFV、PRRSV及PRV检测均为阴性,PCV-2经套式PCR检测均为阳性。对11份样品分离血清,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PCV-2血清抗体,结果均为阳性。随后又对与11头"僵猪"同舍的部分健康猪进行了上述4种病毒的RT-PCR及PCR检测,结果均为阴性。由此推测PCV-2极有可能是该猪场形成"僵猪"的主要因素之一。 相似文献
11.
12.
参照Gen Bank中已发表的猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列,设计合成1对引物,建立了检测猪场疑似病例临床样本中PCV-2的PCR方法。结果显示,PCV-2的ORF2扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,呈现1条630 bp的特异性条带,与预期目的片段大小一致。应用该方法对安徽省3个猪场的30份病料进行了PCV-2检测,结果有9份检测出PCV-2,阳性率为30%。结果表明,该试验建立的PCR方法,是一种快速、灵敏、高效的PCV-2检测技术。 相似文献
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为了了解泰州地区猪场繁殖障碍性疫病的发病情况,采用RT-PCR和PCR技术对2012年1—12月间泰州地区36个发生疫病的规模猪场采集的肝脏、脾脏、淋巴结、脑等84份组织病料进行猪蓝耳病（PRRS）、猪瘟（CSF）、猪伪狂犬病（PR）、猪圆环病毒2型（PCV-2）检测。结果检出PRRS阳性病料37份,阳性率44.0%,阳性场17个,场阳性率7.2%;CSF阳性病料16份,阳性率19.0%,阳性场8个,场阳性率22.2%;PR阳性病料27份,阳性率32.1%,阳性场12个,场阳性率33.3%;PCV-2阳性病料44份,阳性率52.4%,阳性场21个,场阳性率58.3%。同时还发现组织病料和发病猪场中存在猪蓝耳病、猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型不同程度的混合感染现象,其中PRRS、PCV-2混合感染最为严重,样品阳性率33.3%,场阳性率25.0%。表明泰州地区规模猪场繁殖障碍性疫病十分复杂,混合感染现象比较普遍,给泰州养猪业带来巨大威胁,应加强疫病的防控工作。 相似文献
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猪流感病毒与繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、圆环病毒、伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌混合感染的情况调查 总被引：3，自引：1，他引：2
应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混合感染的情况。结果发现：猪群中SIV感染率为11.9%(15/126),而在所检测的15份阳性病料中,SIV混合感染十分严重,感染率为73.3%(11/15)。混合感染病毒种类最多达四重感染（SIV+PRRSV+CSFV+PCV-2）,占6.67%(1/15);三重感染(SIV+PRRSV+PCV 2、SIV+PRRSV+CSFV) 占40%(6/15);二重感染（SIV+PRRSV,SIV+PCV-2）占26.6%(4/15)。调查结果表明广西发病猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2混合感染普遍存在。 相似文献
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混合感染的情况调查 总被引：1，自引：0，他引：1
应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混合感染的情况。结果发现：猪群中SIV感染率为11.9%(15/126),而在所检测的15份阳性病料中,SIV混合感染十分严重,感染率为73.3%(11/15)。混合感染病毒种类最多达四重感染（SIV+PRRSV+CSFV+PCV-2）,占6.67%(1/15);三重感染(SIV+PRRSV+PCV2、SIV+PRRSV+CSFV) 占40%(6/15);二重感染（SIV+PRRSV,SIV+PCV-2）占26.6%(4/15)。调查结果表明广西发病猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2混合感染普遍存在。 相似文献
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华南地区猪圆环病毒1型与2型感染情况调查及相互关系 总被引：1，自引：0，他引：1
根据已发表的猪圆环病毒1型(PCV-1)与猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组序列,设计4对特异性引物,用套式PCR方法对广东地区的规模养猪场或个体养殖户送检的144份猪血清进行了PCV-1与PCV-2病毒检测.结果显示PCV-1阳性血清21份,PCV-2阳性血清40份,PCV-1与PCV-2均为阳性的血清7份,PCV-1阳性率为14.6%,PCV-2阳性率为27.8%;PCV-1与PCV-2均为阳性的阳性率为4.9%,从数据上的比较可知PCV-2的感染率高于PCV-1的感染率.说明PCV-2感染比较普遍,患病猪群中也存在一定比例的PCV-1病毒感染. 相似文献
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结合流行病学、临床症状、病理变化,采用PCR技术,对2006年1月至2007年6月采自江苏省9市15个规模化猪场疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染发病的186份组织病料(脾、肺、淋巴结)进行了PCV2检测。结果显示:在186份组织样品中检出PCV2阳性病料118份,平均阳性率为63.44%;阳性猪场15个,猪场阳性率为100%。由此可见,PCV2感染在江苏省规模化猪场中已普遍存在。 相似文献