共查询到20条相似文献，搜索用时 62 毫秒
1.
实验动物弓形虫免疫胶体金快速检测方法的建立及试纸制备 总被引：1，自引：0，他引：1
将样品垫、包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫,包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜、吸水垫依次首尾互相衔接粘贴在白色塑料板上,组装成免疫胶体金快速检测试纸条,并以此建立检测实验动物弓形虫抗体快速检测的方法。该法与传统的ELISA检测结果一致率为85%,而且快速、灵敏,适于基层实验动物弓形虫病... 相似文献
2.
制备1种检测猪弓形虫血清循环抗原的免疫胶体金试纸条。利用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金溶液,标记抗弓形虫表面抗原SAG3(surface antigen 3,SAG3)单克隆抗体(Anti-A-SAG3-7),用另1株抗弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体(Anti-A-SAG3-23)与羊抗小鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上的检测线和质控线,制备并优化免疫胶体金试纸条检测条件。胶体金溶液的最适pH值为加入4μL 0.2 mol/L K2CO3时的pH值。Anti-A-SAG3-7的最适标记量为12μg。最佳NC膜为Millipore 135。T、C线抗体最佳包被质量浓度均为0.25g/L,T、C线抗体最佳包被体积均为8μL。试纸条的灵敏度达1∶160,与猪囊虫阳性血清无交叉反应。稳定性试验表明,该试纸条置于室温至少可保存1个月有效,置于4℃可保存3个月有效。对广东某地区、吉林某地区猪场的各94份猪待检血清进行检测,分别有17,10份为阳性血清,样品阳性率为18.08%,10.63%。本研究制备的胶体金试纸条具有操作简单,敏感特异等优点,适合临床基层单位对猪弓形虫病的早期诊断及流行病学调查。 相似文献
3.
4.
5.
犬细小病毒胶体金检测试纸条的制备与初步评价 总被引：1，自引：0，他引：1
为快速检测及诊断犬细小病毒及其引起的传染性疾病,应用胶体金免疫层析技术．采用柠檬酸三钠还原法制备25nm的胶体金颗粒,标记抗犬细小病毒单克隆抗体CPV—F1株后包被于玻璃纤维膜作为金标垫,在硝酸纤维素膜上分别包被羊抗小鼠IgG二抗和抗犬细小病毒单克隆抗体CPV—B6株作为质控线和检测线,将吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫分别粘贴于背衬板上制成犬细小病毒抗原胶体金检测试纸条。特异性试验及与血凝试验的对比结果表明,该试纸条具有良好的特异性和敏感性,与进口产品的总符合率为98％。本研究为进一步研发犬细小病毒检测试纸奠定了基础。 相似文献
6.
用弓形虫代谢分泌抗原制备间接血凝诊断试剂的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
用弓形虫代谢分泌抗原(E／SA)致敏绵羊红细胞制备间接血凝诊断试剂，进行人和动物弓形虫病血清抗体检测，并用弓形虫虫体抗原致敏的红细胞间接血凝诊断试剂进行对照试验。结果表明，在弓形虫阴性、阳性血清检测中，弓形虫E／SA间接血凝诊断试剂与弓形虫虫体抗原间接血凝诊断试剂的符合率为100％；在人工感染兔血的检测中，E／SA致敏的间接血凝诊断试剂比虫体抗原致敏的间接血凝诊断试剂的阳性检出时间提前2d，显示弓形虫E／SA间接血凝诊断试剂具有早期诊断和生前诊断的应用价值。 相似文献
7.
一、免疫胶体金技术(一)基本原理免疫胶体金技术的检测原理是以硝酸纤维膜为载体,包被已知抗原或抗体,加入待检样品后,样品中的抗体或抗原与膜上包被的抗原或抗体结合,再通过胶体金标记物与之反应形成红色的可见结果,从而达到检测目的。目前,该项技术已在医学上得到广泛的应用,大多数人的传染病都已经研制成免疫胶体金检测方法。在兽医诊断领域也已开始使用,如犬细小病毒、犬瘟热病毒临床快速诊断均已开始使用免疫胶体金快速诊断试纸条。(二)临床应用1、在我国兽医领域的应用胶体金试纸条作为诊断试剂应用于兽医临床,由于它快速、准确,具有… 相似文献
8.
鉴别布鲁菌病自然感染动物与疫苗免疫动物胶体金检测试纸条的研制 总被引：3，自引：2，他引：1
用金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）标记胶体金技术制作金标垫,以亲和层析法纯化的BP26蛋白作为检测抗原（T线）,研制胶体金快速检测试纸条。用建立的试纸条检测小鼠布鲁菌感染血清,可成功鉴别牛布鲁菌S19感染和BP26缺失疫苗株YZ-2免疫的小鼠。试纸条检测与布鲁菌属同源性较近的几株细菌的阳性血清,结果无交叉反应;试纸条敏感性高于虎红平板凝集试验检测方法,近似于ELISA方法;准确性同于ELISA法,且更为简便快捷。该试纸条具有鉴别布鲁菌病自然感染和疫苗免疫的应用前景。 相似文献
9.
本试验旨在探讨一种能够快速、简便及特异检测MHV病毒的金标检测方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗小鼠肝炎病毒(MHV)抗体,选择优化层析条件,建立双抗体夹心模式的免疫层析法试纸条对MHV进行检测。20 nm左右的胶体金颗粒、5.05 μg为最低稳定抗体量(稳定0.5 mL胶体金)、M135层析材料、3%BSA是最佳封闭液。640 μg/mL抗体蛋白为最适检测线包被浓度,而800 μg/mL抗体蛋白为质控线最适包被浓度。此试纸条能10 min快速特异地检测出MHV抗原,阳性时检测线和质控线均显示红色,阴性时则只有质控线显示红色。结果表明,胶体金免疫层析方法能快速、特异、稳定地检测MHV抗原。 相似文献
10.
旨在建立猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)抗体胶体金免疫层析检测方法,从而快速地对Mhp的感染和免疫情况进行监测,预防和控制猪支原体肺炎传播。通过柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,确定Mhp特异性抗原P46蛋白的最适标记pH和标记浓度并进行标记,作为金标液。将P46蛋白包被检测线T线,抗P46蛋白单抗包被质控线C线,组装检测试纸条。经优化,建立可同时用于Mhp血清抗体和黏膜抗体检测的胶体金免疫层析检测方法。利用该检测方法对76份临床血清样品和40份临床鼻拭子样品进行检测,并与ELISA检测结果进行比较。用该试纸条检测血清样品时,灵敏性、特异性、重复性较好,与商品化Mhp ELISA抗体检测试剂盒符合率为96.1%;该方法检测呼吸道鼻拭子样品时,存在微弱的非特异性反应,检测结果与本实验室建立的sIgAELISA检测方法符合率为87.5%。本研究成功建立了Mhp抗体胶体金免疫层析检测方法,整个过程只需10 min。检测血清样品具有较好的特异性和灵敏性,检测鼻拭子样品时特异性还有待提高。 相似文献
11.
弓形虫可感染多种动物引起严重的弓形虫病,为了对不同宿主感染的弓形虫株基因型差异及不同基因型弓形虫虫株的致病力差异进行进一步研究,弓形虫基因型的分析多采用限制性片段长度多态性PCR（PCR-RFLP）、随机扩增多态性DNA、多位点PCR-RFLP分析、DNA序列分析和微卫星DNA序列分析等技术,扩增位点多选择SAG1、SAG2、SAG3、BTUB和GRA6等遗传标记。传统的弓形虫基因型主要有3个,随着基因型研究的不断深入,越来越多的基因型被发现。本文就弓形虫基因分型研究进展进行讨论分析。 相似文献
12.
试验旨在研究弓形虫胚层发育相关蛋白（TgERP）的免疫原性,以弓形虫RH株的基因组DNA为模板,扩增TgERP基因,将其连接于表达载体pET-30a(+)后,转化至Escherichia coli BL21（DE3）感受态细胞进行IPTG诱导表达,应用Western blotting对重组蛋白的反应原性进行分析,并用纯化后的TgERP蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。结果显示,在37 ℃条件下用1.0 mmol/L IPTG诱导6 h表达可溶性TgERP蛋白的量最大。SDS-PAGE结果显示,目的蛋白分子质量为16.7 ku,以可溶形式表达,纯化后蛋白条带单一。经Western blotting分析,TgERP蛋白有较好的反应原性;制备的多克隆抗体效价较高,可达1∶51200,表明该蛋白具有较好免疫原性。提示,TgERP蛋白可作为血清学诊断方法的候选抗原和弓形虫病疫苗的候选分子,为建立弓形虫新型诊断方法和研制新型弓形虫疫苗奠定了基础。 相似文献
13.
猪弓浆虫病的诊治与虫体分离 总被引：1，自引：0，他引：1
江西某农场的猪种猪和肥猪几乎几时暴发以高热为特征的疫病，病理变化主要为淋巴结出血、肿大脾脏、肝脏肿大，肺炎、心脏出血。肺门淋巴结触片多见量弓浆虫滋养体，病猪血清的弓浆虫抗原，抗体均阳性。接种病料的小鼠于接种后２５天死亡，分离出一株弓浆虫，因此诊断猪场种场和肥猪暴发的疫病与弓浆虫病，并推测本次弓浆虫病的病原来自饲料中的鱼粉。 相似文献
14.
Jibao Zhu Jigang Yin Yue Xiao Ning Jiang Johan Ankarlev Johan Lindh Qijun Chen 《Veterinary parasitology》2008
Acquisition of Toxoplasma gondii infections is mainly through ingestion of parasite-contaminated food. T. gondii oocyst distribution in the living environment of human and livestock is directly linked to the prevalence of the parasite infection in humans and domestic animals. In this study, we investigated the sero-prevalence of T. gondii infection in free-range as well as caged chicken in northeast China. The purpose of this study was to investigate the potential prevalence of T. gondii oocysts in the environments. Sera of 308 free-range chickens and 210 caged chickens collected in three areas in northeast China were tested for anti-T. gondii antibodies with ELISA assays. The infection rates of free-range and caged chickens were 34.7% and 2.8% respectively, indicating that the parasite is widely distributed in the environment and poses threatens to the health of people living in those areas. 相似文献
15.
作者报导用碘标记弓形虫病小鼠腹腔液分泌抗原对流免疫电泳新方法（ＲＣＩＥＰ）直接检测受检猪特异性抗体。ＲＣＩＥＰ与常规间接血凝（ＩＨＡ）对５０例病猪血清和５０例健康猪血清进行对比试验，结果证实该法具有高度的敏感性、特异性和较好的重现性。在不同稀释度时，弓形虫病猪血清ＲＣＩＥＰ和ＩＨＡ的阳性率分别为９４～１００％（平均９８．８０％）和２２～１００％（平均５８．８０％），健康猪的假阳性率前者未出现，而后者有１０％以上。从患病猪血清和抗原稀释度试验证实，ＲＣＩＥＰ的敏感性较酶标对流（ＥＬＣＥＰ）和常规ＣＩＥＰ分别高１５倍和４００倍。因此作者认为ＲＣＩＥＰ可作为猪弓形虫病的一种特异诊断新方法。 相似文献
16.
应用间接血凝试验(IHA),对青海省部分地区的藏獒、喜马拉雅旱獭、高原鼠兔及中华鼢鼠的311份血清样品,进行弓形虫特异性抗体的检测。结果检出33份阳性血清,阳性率为10.61%。 相似文献
17.
癸氧喹酯(decoquinate,DQ)作为畜禽抗球虫药使用已有50多年历史,因其高效、低毒、低残留等特点而备受关注。DQ主要通过破坏虫体线粒体细胞色素bc1复合体的电子传递而捕获子孢子和第一代裂殖子的发育而发挥作用。家禽球虫易产生突变而较快产生抗药性,而反刍动物球虫少有抗药性的报道。除抗球虫作用外,DQ对疟原虫和弓形虫具有很好的控制效果,对隐孢子虫和肉孢子虫的作用还需要研究确认。近年研究表明,DQ纳米颗粒和衍生物具有更强的抗疟活性,值得深入研究。通过查阅国内外相关文献,综述了DQ抗几种常见寄生原虫的研究进展,为其合理使用提供借鉴。 相似文献
18.
19.
采用小鼠传代与体外4℃冰箱保存相结合的方法，对弓形虫虫株进行保种，转种成功率达100％，为虫株的保存提供了又一种简便可靠的方法。 相似文献
20.
地鼠肾细胞弓形虫培养的实验研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本文报道用正常地鼠肾细胞进行弓形虫培养的实验研究。接种虫体２×１０￣６个时，第２天细胞出现病变，第４天及第６天虫体繁殖逐渐增多，第７天虫体比原增殖达２６倍，到第９天以后虫体增殖逐渐减少。我们还对不同稀释度（１：２０，１：４０，１：８０，１：１６０）的弓形虫抗原量接种细胞进行观察，结果显示接种１：２０抗原液的一组，第５天观察到细胞严重受损，而接种１：１６０抗原液的一组则细胞变化不明显，展示抗原的接种量与虫体增殖有关。本研粉虽然比小白鼠传代腹水培养工作量大，但可获得足够量的抗原，而且地鼠肾细胞培养，取材方便。此法既可作制备抗原和分离用，又可传代、保种，是一种较好的方法。 相似文献