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1.
不同浓度赖氨酸对猪IEC碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响 总被引：3，自引：1，他引：2
本研究通过建立猪肠粘膜上皮细胞（Intestinal epithelial cells, IEC）原代培养的方法,研究了赖氨酸对体外培养的猪小肠粘膜上皮细胞碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响。用机械刮取初生仔猪小肠粘膜加胶原酶Ⅱ消化的方法,成功地在体外培养了新生仔猪IEC;分别用浓度为0.5 mM、2 mM、8 mM赖氨酸处理细胞96 h,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR方法,检测了碱性氨基酸转运载体在不同处理细胞中的表达丰度。结果表明：高浓度的赖氨酸对CAT-1 mRNA的表达有上调作用,差异极显著(P<0.01),并且呈剂量依赖效应;不同浓度的赖氨酸对CAT-2 mRNA的表达影响不大,8 mM和2 mM赖氨酸组CAT-2 mRNA的表达丰度均有低于0.5 mM的趋势,但二者之间差异不显著(P>0.05);不同浓度的赖氨酸对y+LAT1 mRNA表达影响差异不显著(P>0.05);高浓度的赖氨酸可提高4F2hc mRNA的表达;0.5 mM和2 mM赖氨酸组4F2hc mRNA的表达丰度均低于8 mM,且差异显著(P<0.05);0.5 mM和2 mM赖氨酸组之间差异不显著(P>0.05)。 相似文献
2.
为探讨乳酸菌主要代谢产物乳酸抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的仔猪空肠上皮细胞凋亡的作用以及保护肠黏膜屏障的部分机制,分别使用TNF-α(200μg/L)、乳酸(100μL/L)、TNF-α(200μg/L)+乳酸(100μL/L)处理仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)组,并设空白对照。用MTT法检测各组的细胞活力;用ELISA方法检测各组caspase-3的蛋白表达量和蛋白活性。结果表明：TNF-α组的细胞存活率极显著低于对照组(P＜0.01),乳酸+TNF-α组可显著升高细胞存活率(P＜0.05)。乳酸+TNF-α组caspase-3蛋白量和活性显著低于TNF-α组(P＜0.05)。乳酸可以抑制TNF-α诱导的IPEC-J2细胞损伤,抑制TNF-α诱导的caspase-3蛋白表达量和蛋白活性的升高,提示乳酸菌主要代谢产物乳酸可通过抑制上皮细胞凋亡来保护肠上皮细胞,进而保护肠黏膜屏障。 相似文献
3.
甲状腺素及胰高血糖素对高温条件下体外培养奶牛乳腺上皮细胞热休克蛋白表达的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
为阐明甲状腺素及胰高血糖素对高温体外培养奶牛乳腺上皮细胞内热休克蛋白(HSPs)mRNA转录和蛋白表达的影响。本试验对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞添加不同浓度的甲状腺素、胰高血糖素,分别于42℃培养12 h。采用RT-qPCR方法检测细胞内HSF-1、HSP27、HSP70和HSP90的mRNA表达丰度,ELISA方法检测HSP27、HSP70和HSP90的蛋白质表达。各浓度的甲状腺素、胰高血糖素均能显著降低高温条件下奶牛乳腺上皮细胞中HSP27、HSP70和HSP90 mRNA表达丰度(P0.05);各浓度的胰高血糖素能极显著的降低高温条件下HSP27、HSP70和HSP90的蛋白表达(P0.01),同时各浓度甲状腺素也能极显著的降低HSP27、HSP70的蛋白表达(P0.01),而仅0.01,0.1,2μmol/L的甲状腺素能极显著的降低HSP90的蛋白表达(P0.01)。结果提示,甲状腺素及胰高血糖素能明显降低高温条件下HSPs mRNA的转录和蛋白的表达水平。 相似文献
4.
为了研究mTOR通路及其相关联途径上与蛋白质合成有关的eIF4E、与能量代谢有关的PPARGC-1、与血管形成有关的VEGFA、与细胞增殖有关的C-Jun4个基因在不同品种猪背最长肌中的表达丰度,选用上市体重的长白猪、地方猪种蓝塘猪和大花白猪各8头作为动物模型,以管家基因GAPDH作为内标,采用Real-time RT-PCR方法,比较这些品种猪的背最长肌中目的基因mRNA表达丰度。结果表明:大花白猪背肌eIF4E mRNA的表达量显著高于蓝塘猪和长白猪(P0.05),其在蓝塘猪背肌的表达量高于长白猪但差异不显著(P0.05);蓝塘猪背肌PPARGC-1mRNA的表达水平显著高于大花白猪(P0.05),与长白猪相比差异不显著(P0.05),长白猪与大花白猪相比无显著差异(P0.05);VEGFA和C-Jun mRNA在蓝塘、长白、大花白猪背肌中的表达没有差异(P0.05)。以上结果提示,eIF4E和PPARGC1基因的差异表达可能与不同猪品种间肌肉性状和肉质差异密切相关。 相似文献
5.
-βactinmRNA和18SrRNA因其在相同试验条件下的稳定表达,而被广泛用作内标基因来确定目的基因的表达量。试验分别使用这2种内标基因,用相对定量RT-PCR的方法对肉鸡(0~58 d)十二指肠钠葡萄糖共转运载体1(Sodium glucose cotransporter 1,SGLT1)的发育规律进行了分析研究,比较不同内标基因对SGLT1 mRNA表达水平检测结果的影响,以确定两者在一致试验条件下表达的相似度。结果表明,分别以-βactinmRNA和18SrRNA作为内标,SGLT1 mRNA表达发育规律完全一致,均表现为2~30 d不断升高,44 d下降,58 d回升;2 d和44 d的SGLT1 mRNA丰度显著低于16 d(P<0.05)和30 d(P<0.05),58 d的SGLT1 mRNA表达水平显著低于30 d(P<0.05)。提示这2种管家基因均可以作为内标用于肉鸡肠道转运载体基因mRNA发育规律的相对定量研究。 相似文献
6.
为了研究不同钠盐胁迫对松柳种子萌发及幼苗生长影响,采用0~400 mmol/L的NaCl、0~100 mmol/L的Na2CO3和0~100 mmol/L的NaHCO3溶液处理松柳(Lathyrus quinquenervius)种子,每种溶液设置6个浓度梯度,以此研究盐胁迫对种子萌发和幼苗生长的影响。研究结果表明:NaCl浓度在0~100 mmol/L时对种子发芽的各项指标影响不明显,在浓度大于200 mmol/L时,显著降低了种子发芽率、相对发芽率、发芽势和发芽指数,盐害率显著升高;Na2CO3溶液在所有浓度下均显著降低种子发芽指标,盐害率显著升高,仅在2 mmol/L时未影响种子发芽率;NaHCO3溶液在浓度为0~20 mmol/L时对种子发芽的各项指标无显著影响,而浓度>20 mmol/L后,对种子的发芽势、发芽指数、耐盐指数均产生显著抑制,浓度100 mmol/L时,盐害率显著升高。三种盐胁迫对苗高生长均表现为低浓度显著促进,高浓度显著抑制,NaCl和Na2CO3对胚根生长表现为低浓度无显著影响而高浓度显著抑制,NaHCO3对胚根生长以及三种盐对胚芽生长则始终呈抑制作用。 相似文献
7.
《华北农学报》2015,(4)
为探明Ghrelin及其受体Ghsr-1a在早期胚胎发育中的作用,以小鼠体内受精、体外受精和孤雌激活胚胎为研究对象,在其体外发育过程中添加不同浓度Ghrelin,观察胚胎发育效率;通过免疫荧光染色和荧光定量PCR,观察不同时期胚胎中Ghsr-1a的变化。结果表明,体内受精胚体外发育中添加0.1 ng/m L Ghrelin显著降低了囊胚率(P0.05),添加1 ng/m L的Ghrelin显著降低了小鼠体外受精胚的囊胚率(P0.05)。在体内受精胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平在4细胞显著高于其他时期(P0.05);体外受精胚中,Ghsr-1a的mRNA水平在8细胞前无明显差异,桑椹胚和囊胚显著下降(P0.05)。在孤雌激活胚胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平从2细胞到8细胞显著降低,之后到囊胚期开始显著升高,其蛋白表达模式与mRNA表达模式相反。Ghsr-1a在体内受精和体外受精胚胎中的表达相似,囊胚期表达量最低。结果提示,Ghrelin能够抑制体内和体外受精胚的体外发育,不同来源胚胎Ghsr-1a mRNA和蛋白表达模式均不相同。研究结果为进一步探索Ghrelin在胚胎发育中的作用机制提供了试验基础。 相似文献
8.
以盐穗木种子和幼苗为材料,研究NaHCO_3胁迫下盐穗木种子的萌发特性和幼苗的生理变化,以确定其对NaHCO_3胁迫的适应能力。结果表明:1)低浓度(100mmol/L)的NaHCO_3对盐穗木种子萌发有刺激作用,促进其在较短时间内达到最终萌发率(与ck无显著差异);中高浓度(200~600mmol/L)的NaHCO_3显著抑制盐穗木种子萌发,且随着NaHCO_3浓度的增加,盐穗木种子最终萌发率显著下降,平均萌发时间延长,盐穗木种子的耐NaHCO_3阈值和极限值分别为318mmol/L和634mmol/L;2)与对照(0mmol/L)相比,在NaHCO_3浓度为200~400mmol/L范围内,盐穗木幼苗的相对电导率增加,但丙二醛(MDA)含量无显著变化,脯氨酸含量、可溶性糖含量、过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化物酶(POD)活性呈增加的趋势,而NaHCO_3为600mmol/L时,MDA含量显著增加;3)综合NaHCO_3环境下盐穗木种子萌发特性和幼苗生理指标变化,盐穗木可在NaHCO_3浓度略低于300mmol/L的环境下较好地发芽、生长,高于该浓度则会受到抑制。 相似文献
9.
出生至断奶仔猪胃肠道组织中FcRn的表达规律初探 总被引：1，自引：1，他引：0
【研究目的】旨在研究FcRa在仔猪胃肠道的表达分布及不同日龄间的表达变化。【方法】以大白争长白二元杂交仔猪作为研究对象,分布采集从出生至断奶后共12个日龄仔猪胃肠道组织。应用RT-PCR方法检测FcRa mRNA表达并进行表达量的相对分析。【结果】①FcRa在仔猪胃肠道各段组织中均有表达,其中在十二指肠后段和空肠前段表达量最高,在结肠和胃内表达最低。②在十二指肠争空肠段,仔猪从一出生就有较高水平的FcRa转录,吮乳后至出生后1d达到峰值,随后略有下降但前4d差异不显著（P〉0．05）;自7d起FcRamRNA转录水平明显降低（P〈0．05）,至断奶时降到最低。③在回肠段,FcRa表达水平较十二指肠和空肠段低,从出生至断奶前（21d）表达量变化不明显。断奶后有显著下降（P〈0．05）。④胃与结肠部位FcRa的表达比较稳定,一直保持在较低水平。【结论】仔猪不同组织中FcRa在十二指肠后段和空肠前段的表达水平最高,提示仔猪十二指肠、空肠是FcRa转运初乳中IgG的主要部位。仔猪肠道FcRa的表达量变化与初乳及乳汁中IgG含量的变化规律基本一致,证明了FcRa在肠道转运IgG中发挥重要作用。 相似文献
10.
罗布麻种子对NaCl溶液胁迫下的萌发试验 总被引：1，自引：0，他引：1
在不同浓度NaCl溶液胁迫下,研究罗布麻种子萌发及复水试验后萌发的状况。研究结果表明,溶液浓度在150mmol/L以下对罗布麻种子萌发无影响。在150~450mmol/L浓度内,种子萌发显著下降;当浓度超过450 mmol/L时,种子几乎停止萌发,不同浓度Na Cl溶液与萌发率之间呈显著负相关(P0.05)。当解除高浓度Na Cl溶液对种子的胁迫作用之后,萌发率可达到50%以上,而且复水之后种子的萌发率加上高浓度胁迫下的萌发率可以近似达到在低浓度Na Cl胁迫下的萌发率,可得出高浓度Na Cl溶液可使罗布麻种子暂时性的休眠。 相似文献
11.
为分析钙离子胁迫下越南槐种子萌发的分子响应机制，以越南槐种子为材料，在0、50、100 mmol/L CaCl2溶液处理下直至萌发，利用非标记定量蛋白质组学技术结合质谱鉴定和生物信息学分析越南槐种子萌发响应钙离子胁迫的差异表达蛋白。结果表明，50 mmol/L CaCl2 vs 0 mmol/L CaCl2比较组中，表达上调的蛋白有43个，表达下调的蛋白有42个；100 mmol/L CaCl2 vs 0 mmol/L CaCl2比较组中，表达上调的蛋白有44个，表达下调的蛋白有37个；100 mmol/L CaCl2 vs 50 mmol/L CaCl2比较组中，表达上调的蛋白有32个，表达下调的蛋白有21个。差异表达蛋白主要参与信号转导，DNA复制和转录，蛋白质合成、加工和降解，糖与能量代谢，脂代谢，次生代谢，细胞骨架及细胞壁代谢，抗氧化及防御等过程。通过高通量蛋白质组学分析，初步揭示了参与越南槐种子萌发应答钙离子胁迫的关键蛋白质... 相似文献
12.
莱芜黑猪a1岩藻糖转移酶基因(FUT I)不同基因型对大肠杆菌F18抵抗力研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了研究不同猪种(山东省地方猪种莱芜黑猪和引进猪种大约克)和FUT I不同基因型仔猪对肠毒性大肠杆菌F18(ETEC F18)的抵抗能力和肠黏膜上皮细胞对ETEC F18 黏附能力的差异,在采用PCR-RFLP技术对莱芜黑猪和大约克FUT I基因型检测的基础上,选取易感性和抗性断奶仔猪,利用野生型ETEC F18标准株进行试验猪口服细菌攻毒试验和肠黏膜黏附试验.由于多方面原因,接受ETEC F18细菌攻毒的试验猪均未发病,无法判断试验猪对ETEC F18的抵抗能力.ETEC F18标准菌株能与所有FUT I敏感基因型仔猪的小肠黏膜上皮细胞黏附,而不能与抗性基因型仔猪小肠上皮黏膜细胞黏附,莱芜黑猪与大约克的肠黏膜上皮细胞与E.coli F18的黏附特性并无品种差异.但是养猪生产实践中,莱芜黑猪极少发生断奶仔猪水肿和腹泻病.所以除FUT I基因外,也许本地猪种有其他导致遗传抗性的突变或抗性基因. 相似文献
13.
盐胁迫对桉树(Eucalyptus)活性氧代谢和CAT基因表达的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
桉树耐贫瘠,盐胁迫影响桉树的生长速率,严重时造成桉树枯萎死亡。本研究以‘广林9’三月龄组培苗为材料,分别用不同浓度NaCl溶液(0, 30 mmol/L, 60 mmol/L, 90 mmol/L, 120 mmol/L, 150 mmol/L)处理20天后,检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、过氧化物酶(peroxidase, POD)活性、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性、过氧化氢(hydrogen peroxide, H2O2)含量、丙二醛(malonaldehyde, MDA)质量摩尔浓度等生理指标以及CAT基因的转录变化。NaCl处理后,MDA质量摩尔浓度、H2O2含量显著升高,在90 mmol/L或120 mmol/L处达到最大值;盐胁迫下POD、SOD和CAT活性均表现为先升高后降低的趋势,并且在90 mmol/L NaCl时达到最大值。设无NaCl处理下CAT基因的表达水平为1,用qPCR (real-time quantitative PCR)方法分析不同盐胁迫下6个CAT基因的相对表达水平。随着NaCl浓度增大,CAT1、CAT2和CAT3的相对表达水平呈逐渐降低的趋势,NaCl浓度为30 mmol/L相对表达水平最高,分别为1.54、6.38和1.27;CAT5和CAT6的相对表达水平在120 mmol/L NaCl时达到最大值,分别为2.65和2.21;CAT4的相对表达水平随NaCl浓度增大而增大,并在NaCl浓度为150 mmol/L时显著升高,相对表达水平达3.31。结果表明:90~120 mmol/L NaCl浓度为桉树的耐盐胁迫的极限;盐胁迫会引起桉树ROS (Reactive oxygen species)代谢失衡,积累H2O2导致膜脂过氧化;6个CAT基因在不同盐胁迫强度下的转录变化差异显著,响应机制不尽相同。本研究可为桉树应答盐胁迫机理研究和桉树栽培管理提供参考。 相似文献
14.
本试验旨在研究不同赖氨酸水平的低蛋白质饲粮对二元母猪生长性能和血清指标的影响。选用96头平均体重为69.01 kg的长大二元母猪,随机分成4个组,每个组4个重复,分别饲喂4种不同可消化赖氨酸(DLys)水平的低蛋白质饲粮(等能、等氨基酸平衡模式),70~100 kg阶段饲粮DLys为0.61%、0.66%、0.71%和0.76%,100~125 kg阶段饲粮DLys为0.55%、0.60%、0.65%和0.70%。结果表明,70~100 kg阶段,平均日增重(ADG)0.61%DLys组、0.66%DLys组和0.71%DLys组间差异不显著(P0.05),但0.66%DLys组显著高于0.76%DLys组(P0.05);料重比(F/G)0.61%DLys组、0.66%DLys组和0.71%DLys组间差异不显著(P0.05),且均显著低于0.76%DLys组(P0.05);血清尿素氮(UN)浓度0.66%DLys组和0.71%DLys组间差异不显著(P0.05),0.66%DLys组显著低于0.61%DLys组和0.76%DLys组(P0.05)。100~125 kg阶段,ADG各组间差异不显著(P0.05);F/G 0.60%DLys组显著低于0.55%DLys组、0.65%DLys组和0.70%DLys组(P0.05);血清UN浓度0.65%DLys组显著低于0.55%DLys组和0.70%DLys组(P0.05),但与0.60%DLys组间差异不显著(P0.05)。综合试验结果表明,二元母猪70~100 kg阶段和100~125 kg阶段饲粮DLys适宜日摄入量分别为16.57 g/d和15.96 g/d,即饲粮赖氨酸水平分别为0.66%和0.60%,能获得较好的生长性能。 相似文献
15.
磷酸根浓度对多年生黑麦草种子萌发和幼苗生长的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为研究磷酸根浓度对多年生黑麦草(Lolium perenne L.)种子萌发和幼苗生长的影响,试验设定5个磷酸根浓度：0（作为CK）、25、50、75、100 mmol/L进行发芽试验,统计每天的发芽种子数和在第7天测定芽长和根长。试验结果表明,磷酸根浓度为25 mmol/L时黑麦草种子的发芽势、发芽率、发芽指数和种子活力都比0 mmol/L(CK)和其他处理高,但随着浓度的升高种子的萌发受到显著的抑制(P<0.05),高浓度的磷酸根对种子萌发不利;种子幼苗在25 mmol/L条件下芽长和根长都比0 mmol/L略有降低,随着磷酸根浓度的升高而幼苗生长受到的抑制也显著性增强(P<0.05),并且各磷酸根浓度对幼根的抑制比芽严重。多年生黑麦草种子在25 mmol/L的磷酸根浓度下萌发情况最好,且对幼苗的芽和幼根的抑制较小。 相似文献
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亚临床酮病奶牛血液部分生化指标代谢水平研究 总被引：1，自引：1，他引：0
酮病是高产奶牛的一种重要的营养代谢病.本研究采用酮粉法、试剂盒法分别对60头奶牛乳汁β-羟丁酸、血液β-羟丁酸、血液葡萄糖和非酯化脂肪酸含量进行检测,以血清β-羟丁酸含量1200μmol/L作为健康奶牛和亚临床酮病奶牛的诊断标准.结果显示健康奶牛和酮病牛血液β-羟丁酸含量分别为509±43μmol/L和2348±127μmol/L,差异显著(P<0.05);血液葡萄糖含量分别为3.94±0.17mmol/L和3.18±0.06mmol/L,差异显著(P<0.05);血液非酯化脂肪酸含量分别为543.4±106μmol/L和315.5±103μmol/L,差异显著(P<0.05).酮病牛的血液葡萄糖、非酯化脂肪酸与血液β-羟丁酸含量呈负相关. 相似文献
17.
以红三叶种子为研究材料,设置了4个Ca2 处理浓度(分别为0、0.1、1.0、10 mmol/L),研究不同浓度外源Ca2 浸种对红三叶种子萌发、幼苗生长及抗逆性的影响.结果显示:(1)低浓度的Ca2 (0.1～1.0 mmol/L)浸种处理可使红三叶种子发芽率、发芽指数及活力指数显著升高,单株鲜重显著增加,并显著抑制全苗长、胚芽长;(2)低浓度的Ca2 (0.1 mmol/L)浸种预处理均能显著提高红三叶幼苗子叶SOD、POD活性,并显著降低其CAT、MDA含量.(3)高浓度的Ca2 (10 mmol/L)处理种子对种子萌发、幼苗生长及抗氧化物氧化酶的活性有明显的抑制作用.结果表明:低浓度(0.1 mmol/L)的外源Ca2 浸种处理能提高红三叶种子的发芽率和萌发活力,并能起到壮苗的作用,还可明显提高红三叶幼苗的抗逆性,效果最优. 相似文献
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包被复合微量元素对黄羽肉鸡生长性能、粪便微量元素含量及小肠黏膜形态的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
试验旨在研究包被复合微量元素对黄羽肉鸡生长性能、粪便微量元素含量及小肠黏膜形态的影响。选取375羽1日龄黄羽肉鸡,随机分为5组,每组5个重复,每重复15羽。第Ⅰ组为对照组,基础饲粮中添加常规微量元素;第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别在基础饲粮中添加200、300、400、500 mg/kg包被复合微量元素。试验期为4周,测定肉鸡生长性能、粪便微量元素含量及小肠黏膜形态。结果表明:试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组与对照组相比,料重比差异不显著,但Ⅱ组的料重比与对照组相比差异显著(P0.05),各组间的平均日增重、平均日采食量差异均不显著。Ⅱ组粪便中Fe含量较对照组有显著性降低(P0.05),Cu、Mn、Zn含量极显著降低(P0.01);Ⅲ组粪便中Cu、Fe、Mn、Zn含量较对照组均极显著性降低(P0.01);Ⅳ组中的Fe、Mn含量较对照组均极显著性降低(P0.01);Ⅴ组中的Mn、Zn含量较对照组均极显著性降低(P0.01)。Ⅳ组同对照组相比,十二指肠隐窝深度显著降低(P0.05),绒毛高度/隐窝深度显著性提高(P0.05)。在黄羽肉鸡配合日粮中用包被复合微量元素代替常规微量元素可减少配合饲料中微量元素含量而不影响肉鸡生产性能,并可减少其粪便中微量元素含量,提高十二指肠的绒毛高度/隐窝深度比值,其适宜用量为300~400 mg/kg。 相似文献
19.
为了研究蜡样芽孢杆菌PAS38制剂对肉鸡生长性能和免疫功能的影响,选用80只7日龄爱拔益加(AA)肉鸡,随机分成2组,每组4个重复,每个重复10羽,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0. 05%的蜡样芽孢杆菌PAS38制剂,试验期35 d。结果显示:试验组鸡体质量及净增质量均比对照组高,但仅在28 d时差异显著(P 0. 05),空肠和回肠淀粉酶和蛋白酶活性均显著或极显著高于对照组(P 0. 05或P 0. 01);试验组的胸腺和脾脏指数在28,42 d时显著或极显著高于对照组(P 0. 05或P 0. 01),法氏囊指数在42 d时显著高于对照组(P 0. 05);试验组血清免疫球蛋白含量均高于显著或极显著高于对照组(P 0. 05或P 0. 01),42 d时试验组血清中IL-2和IFN-γ含量高于对照组(P 0. 05),IL-4含量低于对照组(P 0. 05);试验组肉鸡的胸腺和法氏囊组织中IL-2、IFN-γ、GBP1、IRF1的mRNA表达量均有不同程度地高于对照组,IL-10 mRNA转录水平低于对照组; IL-4 mRNA转录水平在胸腺组织中显著高于对照组(P 0. 05),而在法氏囊组织中则显著(P 0. 05)或极显著(P 0. 01)低于对照组。结果表明,蜡样芽孢杆菌PAS38具有促进肉鸡的生长性能和增强肠道消化酶活性,促进免疫器官的发育,并且通过调节免疫相关基因mRNA的表达来提高机体的非特异性免疫和细胞免疫。 相似文献
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稳定转染HSP72奶牛乳腺上皮细胞系建立与表达鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
《华北农学报》2018,(6)
为了构建HSP72慢病毒表达载体,建立稳定表达HSP72的牛乳腺上皮细胞系。以牛HSP72基因序列为模板,设计并合成引物,PCR扩增目的基因,连接到慢病毒表达质粒中,用包装获得的慢病毒感染牛乳腺上皮细胞,经一定浓度的嘌呤霉素筛选,Hochest33342法对细胞核定位,倒置荧光显微镜下观察转染效率,用免疫组化和Western Blot方法验证感染细胞是否稳定表达HSP72。结果显示,携带HSP72基因的慢病毒滴度约为1. 0×109TU/m L;确定嘌呤霉素的最佳筛选浓度为2μg/m L;牛HSP72慢病毒感染细胞表达HSP72,感染的奶牛乳腺上皮细胞在倒置荧光显微镜下可看到绿色荧光,转染效率可达90%以上;免疫组化结果表明,正常细胞和空载体感染细胞,HSP72呈现低表达,转染携带HSP72目的基因载体细胞,HSP72高表达,呈现颜色较深的棕色; Western Blot方法检测证实与正常转染细胞相比,慢病毒空载体转染的奶牛乳腺上皮细胞HSP72表达稍有降低,但无统计学差异,而携带HSP72基因的慢病毒载体转染的细胞HSP72呈现高表达,且差异极显著(P 0. 01),与慢病毒空载体转染的奶牛乳腺上皮细胞相比,携带HSP72基因的慢病毒载体转染的细胞HSP72呈现高表达,且差异极显著(P 0. 01)。成功建立稳定表达HSP72的牛乳腺上皮细胞系,可为研究奶牛乳腺炎分子调控机制以及抗性分子药物筛选提供新的理论依据和工作基础。 相似文献