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相似文献
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1.
建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法.根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以EHEC O157:H7纯培养和模拟制备的3种阳性样...  相似文献   

2.
为了明确O157:H7(△hly △stx△toxB)口服能否减少亲本株O157:H7在山羊体内的定殖.选用3月龄山羊,首先口服接种O157:H7(△hly△stx△toxB),分别于第7,14天再次口服接种亲本株O157:H7,监测亲本株O157:H7的排菌持续时间和排菌量.结果表明:O157:H7(△hly △stx△toxB)口服后第7天攻击亲本株O157:H7,第4天检测不到亲本株O157:H7的排菌;第14天攻击亲本株O157:H7,第9天检测不到亲本株O157:H7的排菌.直接口服亲本株O157:H7,排菌一直持续到第25天.口服O157:H7(△hly △stx△toxB)能够减少O157:H7在山羊体内的定殖,为研制EHEC O157:H7基因缺失疫苗奠定了基础.  相似文献   

3.
为了建立牛乳中大肠杆菌O157∶H7的PCR快速检测方法,试验对大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因序列进行分析,设计1对特异性引物,对大肠杆菌O157∶H7的DNA进行PCR扩增,结合特异性和灵敏性试验,实现对致病性大肠杆菌O157∶H7的检测;然后将不同含量的大肠杆菌掺入到牛乳中进行实际样品的检测。结果表明,该方法的特异性和灵敏性较好,能够检测到0.1 ng/μL的DNA模板,当牛乳中含有超过100 CFU/mL的大肠杆菌时,可利用该方法进行检测。  相似文献   

4.
在进行大肠埃希氏菌O157∶H7扩项过程中,对国内常用3个标准中的常规培养法进行比较分析。结果表明,不同温度培养的增菌肉汤均浑浊生长。大肠埃希氏菌O157∶H7显色培养基选择性较好,建议在日常检测工作中使用大肠埃希氏菌O157∶H7显色培养基,以提高区分度及检出率。同时,应用VITEK 2可以快速简便地鉴别目标菌。  相似文献   

5.
为了明确O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB)口服能否减少亲本株O157:H7在山羊体内的定殖。选用3月龄山羊,首先口服接种O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB),分别于第7,14天再次口服接种亲本株O157:H7,监测亲本株O157:H7的排菌持续时间和排菌量。结果表明:O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB)口服后第7天攻击亲本株O157:H7,第4天检测不到亲本株O157:H7的排菌;第14天攻击亲本株O157:H7,第9天检测不到亲本株O157:H7的排菌。直接口服亲本株O157:H7,排菌一直持续到第25天。口服O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB)能够减少O157:H7在山羊体内的定殖,为研制EHECO157:H7基因缺失疫苗奠定了基础。  相似文献   

6.
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶ H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势.构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右.重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA.二免后攻击50LD50的EHEC O157∶ H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短.结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值.  相似文献   

7.
从豆制品生产副产物豆清发酵液中分离得到1株产细菌素球状菌,编号SQ-12-3。结合菌株生长特征、菌体形态及生理生化性质,初步将其鉴定为乳球菌属(Lactococcus sp.)。排除发酵液中可能存在的有机酸、过氧化氢及菌株菌体的干扰,并检测抑菌物质蛋白酶稳定性,可确定菌株SQ-12-3产细菌素抑菌。研究该菌株产细菌素动态,确定菌株最适生长温度在37℃,菌株在该温度下发酵18 h后菌液p H值低至4.11;当NaCl质量分数大于7%时,菌株生长受到明显抑制。  相似文献   

8.
为建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法,根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157:H7菌体抗原和鞭毛抗原的基因序列(rfbE和fliC基因)设计2对特异引物,分别建立针对rfbE fliC基因的单一PCR方法;通过优化扩增条件,进一步建立可用于动物粪便检测的大肠杆菌多重PCR方法,并进行特...  相似文献   

9.
为得到对番茄晚疫病原菌有更好抑制作用的生物药剂,对15种中药进行筛选,并进行配伍抑菌研究,得出最佳三配伍抑菌组合为青蒿∶五味子∶乌梅=1∶4∶1,抑菌圈直径达到了56 mm,最佳配伍液的最小抑菌浓度(MIC)为7.82 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为31.25 mg/mL,对生长曲线的抑制作用明显。将该中药配伍液稀释500~1 000倍时,其抑菌率明显高于典型化学抑菌剂。  相似文献   

10.
采用乙醇浸提法从苦豆子中提取生物碱浸提物,对苦豆子生物碱浸提物的抑菌性进行研究。结果表明,一定浓度的苦豆子生物碱浸提物对供试细菌和霉菌都有一定的抑制作用,其抑菌活性与苦豆子生物碱浸提物浓度成正比,浸提物在高温条件下具有良好的稳定性,时间越长抑菌效果越明显,而且在p H值为8时抑菌效果最好。  相似文献   

11.
在单因素试验的基础上,通过正交试验法优化苦水玫瑰花红色素的提取条件,并对其稳定性进行研究。结果表明,苦水玫瑰花红色素的最佳提取条件为:提取剂选用80%的乙醇,pH为2,料液比1∶60(g/mL),浸提时间60 min;苦水玫瑰花红色素在pH<6的酸性条件下较稳定,在碱性介质中极不稳定,在70 ℃以下较稳定,但对光较敏感,食品添加剂蔗糖和VC对其稳定性影响不大(色素吸光值变化幅度在10%以内)。该色素对还原剂Na2S2O3有一定的耐受能力,而对氧化剂H2O2的耐受性较弱,金属离子Na+、Al3+、K+、Ca2+对色素的稳定性无明显影响,而Fe2+和Fe3+对该色素的稳定性影响较大。  相似文献   

12.
采用滤纸片扩散法,测试丁香、厚朴等15种中草药提取液对果蔬贮藏保鲜中的常见致腐菌酵母菌和霉菌(灰霉、青霉、毛霉)的抑制作用,通过防腐效果较好的丁香、紫丹参、厚朴、苦参、迷迭香5种中草药提取液按1∶1∶1复配,进行复配液抑菌活性、稳定性研究。结果表明,复配液丁香、厚朴、苦参复配液,紫丹参、厚朴、苦参复配液和厚朴、苦参、迷迭香复配液的抑菌效果较好;3种复配液在pH值为6,低温和避光条件下稳定性较好。  相似文献   

13.
肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157:H7是食源感染的人兽共患病原菌.志贺毒素(Shiga toxin,Stx)、溶血素(haemolysin,Hly)和ToxB是O157:H7重要的毒力因子.选用自杀性质粒pMEG375,体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,...  相似文献   

14.
大蜡螟抗菌物质的抑菌活性检测及其初步分离   总被引:1,自引:1,他引:0  
摘要:本研究以大蜡螟末龄幼虫为材料,诱导后获得免疫血淋巴为抗菌粗提物,并分为新鲜,冷冻,加热三种不同的处理,进行了对两种常见细菌和16种植物病原真菌的抑菌活性检测,并进行了Sephadex G-50凝胶过滤分离。结果表明,大蜡螟抗菌物质对大肠杆菌没有明显的抑制作用,而对金黄葡萄球菌抑制作用明显,抑菌活性单位在10左右;对10种植物病原真菌均有不同的抑菌活性,其中对苹果树皮腐烂病菌的抑制率达到65%以上;经过凝胶过滤分离,及对分离组分的抑菌活性测定,筛选出较合适的洗脱液为50mM乙酸铵,各分离组分抑菌活性差异明显,粗提物被分成了两个差异显著的部分。  相似文献   

15.
荣华  刘龙  郭庆元 《中国农学通报》2022,38(24):118-123
研究茶叶活性成分对梨火疫病菌的抑菌活性及其稳定性,旨在为田间病害防治提供依据。采用打孔法测定茶叶活性成分对梨火疫病菌的抑菌活性及最小抑菌浓度(MIC),并进一步探讨温度、pH和紫外线照射对绿茶提取物茶多酚抑菌活性稳定性的影响。结果表明,抑菌活性绿茶提取物茶多酚>壳寡糖,茶皂素没有抑菌活性;绿茶提取物茶多酚MIC为40 mg/mL。绿茶提取物茶多酚10~60℃时抑菌活性保持稳定,但经高温80~100℃处理后,抑菌活性略有下降;在p H 2时抑菌活性增强,碱性条件下抑菌活性减弱;经紫外处理10~50 min后,抑菌活性随着照射时间的增加而减弱。茶叶活性物质对梨火疫病菌有一定的抑菌活性,且绿茶提取物茶多酚具有较稳定的抑菌活性,为其作为天然的农药防治梨火疫病提供依据。  相似文献   

16.
十五种中草药及复配液的抑菌性及稳定性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
天然植物提取物对多种果蔬采后致腐菌有抑制作用。丁香、紫丹参、厚朴、苦参和迷迭香5种提取液对细菌有明显的抑制作用。选3种提取液按体积比1:1:1配制复配液对细菌进行抑菌试验。结果表明,复配液PW4(丁香、厚朴、苦参)、PW7(紫丹参、厚朴、苦参)和PW10(厚朴、苦参、迷迭香)是其中效果较好的配伍。3种复配液稳定性研究表明,3种提取液最佳抑菌pH值为6,均需低温避光贮存。  相似文献   

17.
盐胁迫条件下外源Ca2+对蚕豆气孔运动及质膜K+通道的调控   总被引:4,自引:1,他引:3  
研究了Ca2 对NaCI胁迫下蚕豆气孔运动及质膜K 通道的影响.结果表明,100 mmol L-1NaCl可明显诱导气孔开放,该现象可被10 mmol L-1CaCl2显著抑制.为探讨盐胁迫下Ca2 对K 和Na 跨膜运输的调控机制,我们利用膜片钳技术记录全细胞K 电流发现,在100 mmol L-1NaCl胁迫下,加入10 mmol L-1CaCl2胞外处理,显著抑制质膜K 内向及外向通道电流,这种抑制可被1 mmol L-1La3 (Ca2 通道抑制剂)缓解.非盐胁迫下,10 mmol L-1CaCl2胞外处理也能显著抑制质膜内向K 通道,但明显激活其外向通道,加入1 mmol L-1La3 并不能被缓解.用H2O2专一的荧光探针二氯荧光素二乙酸酯(H2DCF-DA)单细胞分析保卫细胞内H2O2含量变化显示,在100 mmol L-1NaCl盐胁迫下,10 mmol L-1CaCl2处理明显诱导H2O2在保卫细胞中积累;100 mmol L-1NaCl和10 mmol L-1CaCl2单独处理并不能诱导H2O2积累.推测Ca2 在盐胁迫下可能先诱导H2O2在胞内积累,进而激活质膜Ca2 通道,迅速提高胞内Ca2 浓度以抑制Na 通过质膜K 通道跨膜内流,同时调节Na 外流,两种效应共同作用促使气孔关闭,减少盐胁迫下水分的过度散失.上述结果将为Ca2 调控作物抗盐机制研究提供新的思路.  相似文献   

18.
盐胁迫对桉树(Eucalyptus)活性氧代谢和CAT基因表达的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
桉树耐贫瘠,盐胁迫影响桉树的生长速率,严重时造成桉树枯萎死亡。本研究以‘广林9’三月龄组培苗为材料,分别用不同浓度NaCl溶液(0, 30 mmol/L, 60 mmol/L, 90 mmol/L, 120 mmol/L, 150 mmol/L)处理20天后,检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、过氧化物酶(peroxidase, POD)活性、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性、过氧化氢(hydrogen peroxide, H2O2)含量、丙二醛(malonaldehyde, MDA)质量摩尔浓度等生理指标以及CAT基因的转录变化。NaCl处理后,MDA质量摩尔浓度、H2O2含量显著升高,在90 mmol/L或120 mmol/L处达到最大值;盐胁迫下POD、SOD和CAT活性均表现为先升高后降低的趋势,并且在90 mmol/L NaCl时达到最大值。设无NaCl处理下CAT基因的表达水平为1,用qPCR (real-time quantitative PCR)方法分析不同盐胁迫下6个CAT基因的相对表达水平。随着NaCl浓度增大,CAT1、CAT2和CAT3的相对表达水平呈逐渐降低的趋势,NaCl浓度为30 mmol/L相对表达水平最高,分别为1.54、6.38和1.27;CAT5和CAT6的相对表达水平在120 mmol/L NaCl时达到最大值,分别为2.65和2.21;CAT4的相对表达水平随NaCl浓度增大而增大,并在NaCl浓度为150 mmol/L时显著升高,相对表达水平达3.31。结果表明:90~120 mmol/L NaCl浓度为桉树的耐盐胁迫的极限;盐胁迫会引起桉树ROS (Reactive oxygen species)代谢失衡,积累H2O2导致膜脂过氧化;6个CAT基因在不同盐胁迫强度下的转录变化差异显著,响应机制不尽相同。本研究可为桉树应答盐胁迫机理研究和桉树栽培管理提供参考。  相似文献   

19.
采用不同浓度NaCl溶液处理甜叶菊种子,研究了NaCl对甜叶菊种子的萌发和幼苗生长的影响。结果表明:NaCl对甜叶菊种子萌发的影响表现为低促高抑效应。浓度<0.3%时表现为促进作用,浓度≥0.3%时表现为抑制作用,盐分浓度越高,对甜叶菊种子萌发的抑制作用越明显;甜叶菊幼苗生长状况随NaCl浓度的升高呈现先升后降的趋势。由此说明当NaCl浓度≥0.3%时,对甜叶菊的种子萌发和幼苗生长影响明显,也说明甜叶菊的耐盐性相对较弱,不适宜在盐浓度较高的环境中生长。  相似文献   

20.
水杨酸对食品中常见污染细菌的抑制作用研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以不同浓度的水杨酸溶液分别对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌进行处理,探讨不同浓度水杨酸溶液对这三种细菌的抑菌效果以及抑菌率。结果表明:水杨酸对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌具有明显的抑制作用;而且其抑制作用呈现浓度效应,即随着水杨酸浓度的增大,抑菌效果越来越明显,水杨酸对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,对枯草芽孢杆菌的抑制作用稍差,对大肠杆菌的抑制作用相对最弱。  相似文献   

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