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1.
本试验旨在获得能够将大肠杆菌ST融合蛋白展示在酿酒酵母表面的重组酿酒酵母基因工程菌并探究其对大鼠小肠黏膜结构的影响。将estA和estB基因克隆至pYD1质粒中,构建重组质粒pYD1-estA-estB,应用酵母表面展示技术获得EBY-100/pYD1-estA-estB重组酵母基因工程菌。选取36只SPF级SD大鼠,随机分为空白对照组、工程菌组、酵母菌组,分别灌胃生理盐水、工程菌菌液、酿酒酵母菌菌液,持续灌胃21d后连续3d灌胃大肠杆菌H10407菌液,取各组大鼠的十二指肠、空肠、回肠制作切片,观察各段小肠绒毛的长度、宽度、隐窝深度及绒毛长度/隐窝深度(V/C)进行统计分析。利用ELISA、real-time PCR技术观察肠道黏膜中的SIgA、IL-2、IL-4和IFN-γ含量变化。结果显示,通过免疫荧光试验证明大肠杆菌ST融合蛋白成功在酿酒酵母表面展示;灌胃21d时,与空白对照组相比,工程菌组及酵母菌组的十二指肠绒毛长度、V/C值显著升高(P0.01),工程菌组绒毛宽度显著升高(P0.05);空肠绒毛长度、V/C值显著升高(P0.01),隐窝深度显著下降(P0.05);工程菌组和酵母菌组的回肠绒毛长度及V/C值显著升高(P0.01)。灌胃大肠杆菌后,各组与灌胃前相比,空白对照组及酵母菌组的十二指肠与空肠绒毛长度、V/C值显著下降(P0.01),空肠隐窝深度显著升高(P0.01),回肠V/C值显著下降(P0.01);工程菌组无明显变化。灌胃21d,工程菌组与酵母菌组的SIgA、IL-2、IL-4和IFN-γ含量均显著高于空白对照组(P0.01);攻毒大肠杆菌后,空白对照组及酵母菌组的SIgA、IL-2和IL-4含量均显著下降(P0.01),各组的IFN-γ含量显著升高(P0.01)。结果表明,EBY-100/pYD1-estA-estB重组酵母基因工程菌不仅具有酵母菌的益生作用,能促进小肠黏膜发育,而且对产肠毒素大肠杆菌引起的肠道黏膜损伤有一定的保护作用。本试验为新型微生态制剂的研发提供依据。 相似文献
2.
《黑龙江畜牧兽医》2017,(19)
为了研究ST酿酒酵母基因工程菌对大鼠肠道菌群的影响,试验将90只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、工程菌组及酵母菌组,分别灌服生理盐水、工程菌菌液、酿酒酵母菌菌液,持续21 d后连续3 d灌服大肠杆菌H10407菌液,分别收集灌胃7,14,21天及攻毒后的各组大鼠粪便,提取粪便细菌DNA,利用末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)、实时荧光定量PCR检测了ST酿酒酵母基因工程菌对肠道菌群微生物可操作单元(OTU)和肠道5种重要细菌(类杆菌、梭菌、肠球菌、双歧杆菌和乳杆菌)数量的变化,并测定了肠道菌群pH值。结果表明:在灌胃期间,工程菌组及酵母菌组的OTU值和双歧杆菌、梭菌数量极显著高于空白对照组(P0.01),其他细菌数量均不同程度升高。各组pH值均呈现下降趋势,第21天时,工程菌组及酵母菌组pH值极显著低于空白对照组(P0.01)。攻毒产肠毒素大肠杆菌后,工程菌OTU值和类杆菌、乳杆菌、双歧杆菌数量均极显著高于其他两组(P0.01),pH值极显著高于空白对照组(P0.01)。与灌服前相比,工程菌组的OTU值、细菌数量及pH值均变化幅度最小。说明ST酿酒酵母基因工程菌能够改善肠道菌群结构,丰富肠道菌群多态性,降低pH值,增加有益菌群的数量。当动物机体受到产肠毒素大肠杆菌感染时,ST酿酒酵母基因工程菌能够有效降低产肠毒素大肠杆菌对肠道菌群的破坏,发挥预防保护作用,维持肠道内菌群稳定。 相似文献
3.
《中国饲料》2014,(14)
为研究合生元替代日粮50%抗生素对肉鸭肠道结构的影响,选取1日龄樱桃谷肉鸭200羽,随机分成4组,每组5个重复,每个重复10羽。对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂基础日粮中添加4 mg/kg黄霉素、混合芽孢菌和合生元(替代50%黄霉素)。结果显示:合生元替代50%黄霉素能使空肠隐窝深度较对照组变浅12.93%(P0.05);回肠结构中,合生元组绒毛长度较对照组、抗生素组与复合芽孢菌组分别增加了1.46%(P0.05)、11.65%(P0.05)、27.09%(P0.05),而绒毛高度/隐窝深度指数(V/C)分别增加了13.06%(P0.05)、27.85%(P0.05)和19.73%(P0.05)。结果表明:肉鸭日粮添加合生元替代50%抗生素可提高空肠与回肠绒毛高度,降低隐窝深度,增加V/C值,改善肠道黏膜形态结构,促进肉鸭健康生产。 相似文献
4.
本试验旨在探究酿酒酵母(S.cerevisiae)发酵液对断奶仔猪生长性能、小肠发育及小肠黏膜免疫功能的影响。选取平均体重为(6.57±0.13)kg的26日龄"长白×杜洛克"断奶仔猪60头(公母各占1/2),按体重和性别随机分为3个组,每组4个重复,每个重复5头仔猪。3个组分别为:对照组(基础饲粮+300 m L/kg空白培养液)、酿酒酵母发酵液组(基础饲粮+300 m L/kg酿酒酵母发酵液)和抗生素组(基础饲粮+20 mg/kg硫酸黏杆菌素+40 mg/kg杆菌肽锌)。试验期21 d。结果表明:1)与对照组相比,酿酒酵母发酵液组和抗生素组的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)显著或极显著升高(P0.05或P0.01),料重比极显著降低(P0.01);但酿酒酵母发酵液组与抗生素组的以上生长性能指标均无显著差异(P0.05)。2)与对照组相比,酿酒酵母发酵液组和抗生素组的十二指肠、空肠和回肠黏膜总蛋白、DNA和RNA含量显著或极显著升高(P0.05或P0.01);但酿酒酵母发酵液组与抗生素组的以上指标均无显著差异(P0.05)。3)与对照组相比,酿酒酵母发酵液组和抗生素组的十二指肠和回肠绒毛高度显著升高(P0.05),十二指肠、空肠和回肠绒毛高度/隐窝深度(V/C)显著或极显著升高(P0.05或P0.01);但酿酒酵母发酵液组与抗生素组的以上指标均无显著差异(P0.05)。4)与对照组相比,酿酒酵母发酵液组和抗生素组的十二指肠、空肠和回肠黏膜免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M含量均显著或极显著升高(除空肠黏膜免疫球蛋白G外)(P0.05或P0.01);但酿酒酵母发酵液组和抗生素组的以上指标均无显著差异(P0.05)。结果显示,饲粮中添加酿酒酵母发酵液能够提高断奶仔猪的生长性能,促进小肠发育,提高小肠黏膜免疫功能,达到与抗生素相当的效果。提示酿酒酵母发酵液可有效缓解断奶应激,减少或者替代抗生素在断奶仔猪饲粮中的使用,这为研发无抗饲粮提供了有力的理论依据和数据支持。 相似文献
5.
《畜牧与兽医》2021,(10)
为研究饲粮添加抗氧化剂对热应激条件下蛋鸡肠道结构的影响,选取2 400只35周龄海兰蛋鸡随机分为5组,每组4个重复,每个重复120只,分为A组(200 mg/kg姜黄素+基础日粮)、B组(150 mg/kg添加剂A+基础日粮)、C组(100 mg/kg姜黄素+150 mg/kg添加剂A+基础日粮)、D组(150 mg/kg添加剂A+200 mg/kg添加剂B)和O组(对照组,基础日粮),其中添加剂A含2%茶多酚,添加剂B含≥300亿乳酸菌,7 d预试期,42 d正试期。结果显示:与O组相比,A组蛋鸡空肠、回肠的绒毛高度与黏膜厚度显著提高(P0.05);B组添加剂能够显著提高蛋鸡空肠、回肠、十二指肠的绒毛高度及黏膜厚度(P0.05),且显著提高空肠的绒毛高度/隐窝深度(V/C)值(P0.05);C组蛋鸡空肠、回肠、十二指肠的绒毛高度、V/C值及黏膜厚度显著提高(P0.05)。另外,相对A、B、C组,D组的十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度与V/C值均有显著提高(P0.05)。结果表明:姜黄素、茶多酚和微生态制剂等添加剂对热应激条件下蛋鸡肠道损伤有一定缓解作用,且以基础日粮中添加100 mg/kg姜黄素+150 mg/kg添加剂A改善效果最为显著。 相似文献
6.
微生态制剂对新生仔猪小肠绒毛形态结构和黏膜免疫相关细胞的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为了明确微生态制剂乳猪壮防治仔猪大肠杆菌病的效果,试验采用不同剂量乳猪壮口腔灌服新生仔猪,观测其小肠绒毛形态和黏膜免疫相关细胞的形态和分布。结果表明:小肠绒毛形态结构[绒毛高度、隐窝深度、绒毛长度与隐窝深度的比值(V/C)比值]和黏膜免疫细胞数量(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)在十二指肠、空肠和回肠对乳猪壮呈剂量依赖性增长,其中以4 mL乳猪壮组各项指标增加最为明显,显著高于生理盐水组和硫酸庆大霉素组(P<0.05)。 相似文献
7.
《动物营养学报》2021,33(7)
本试验旨在研究饲粮发酵棉籽粕水平对28～70日龄马冈鹅生长性能、屠宰性能、肠道形态结构及回肠黏膜免疫屏障相关基因表达的影响。选择体重相近、健康的28日龄马冈鹅公鹅432只,随机分成6个组,每组6个重复,每个重复12只。各组饲粮发酵棉籽粕水平分别为0(对照组)、5%、10%、15%、20%和25%(游离棉酚含量分别为0、22、44、66、88和110 mg/kg)。试验期42 d。结果表明:1)饲粮发酵棉籽粕水平对28～70日龄马冈鹅平均日增重和平均日采食量无显著影响(P0.05)。20%和25%发酵棉籽粕水平组的料重比显著高于对照组(P0.05)。2)饲粮发酵棉籽粕水平对70日龄马冈鹅屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腹脂率均无显著影响(P0.05)。25%发酵棉籽粕水平组的腿肌率显著低于对照组(P0.05)。3)饲粮发酵棉籽粕水平对70日龄肉鹅十二指肠、回肠、盲肠和总肠道相对长度以及空肠、回肠、盲肠、直肠和总肠道相对重量均无显著影响(P0.05)。25%发酵棉籽粕水平组空肠、直肠相对长度显著高于对照组和15%发酵棉籽粕水平组(P0.05),十二指肠相对重量显著高于其他各组(P0.05)。4)饲粮发酵棉籽粕水平对十二指肠隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度,空肠绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度,回肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度均无显著影响(P0.05)。15%和25%发酵棉籽粕水平组十二指肠绒毛高度显著低于对照组(P0.05),15%发酵棉籽粕水平组回肠隐窝深度显著低于对照组(P0.05)。5)饲粮发酵棉籽粕水平对回肠黏膜闭锁蛋白(Claudin)的mRNA相对表达量无显著影响(P 0.05)。25%发酵棉籽粕水平组的回肠黏膜闭锁小环蛋白-1(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)的mRNA相对表达量显著高于对照组(P0.05),回肠黏膜白细胞介素-10(IL-10)的mRNA相对表达量显著低于对照组(P0.05)。综上所述,饲粮发酵棉籽粕水平过高可引起肠道形态结构和免疫屏障功能受损,导致饲料转化率降低,推荐28～70日龄马冈鹅饲粮发酵棉籽粕水平不高于20%(游离棉酚含量不高于88 mg/kg)。 相似文献
8.
本试验旨在研究酿酒酵母和芽孢杆菌对育肥猪养分表观消化率、肠道形态结构和肠道免疫的影响。选取72头体重(62.50±0.83)kg的"杜×长×大"育肥猪,将其随机分为3组,每组4个重复,每个重复6头猪(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,酿酒酵母组饲喂基础饲粮+0.5 g/kg活性干酵母制剂(酵母菌活菌数1.0×1010CFU/kg),芽孢杆菌组饲喂基础饲粮+0.1 g/kg芽孢杆菌制剂(芽孢杆菌活菌数1.0×109CFU/kg)。试验期56 d。结果表明:1)与对照组相比,芽孢杆菌组育肥猪钙和磷的表观消化率显著提高(P0.05),酿酒酵母组钙的表观消化率显著提高(P0.05);2)与对照组相比,酿酒酵母组育肥猪空肠隐窝深度极显著降低(P0.01),空肠绒毛高度/隐窝深度值极显著提高(P0.01);3)与对照组相比,芽孢杆菌组育肥猪空肠和回肠分泌型免疫球蛋白A(SIg A)含量均极显著上升(P0.01)。由此可见,饲粮中添加酿酒酵母和芽孢杆菌均可改善育肥猪对营养物质的消化吸收,其中酿酒酵母对育肥猪肠道形态结构具有一定的改善作用,而芽孢杆菌可提高肠道中的SIg A含量,提高肠道免疫水平。 相似文献
9.
本研究旨在探讨香菇多糖对大肠杆菌攻毒大鼠空肠形态结构、上皮细胞数量和紧密连接蛋白表达的影响。将24只SD大鼠随机分成4个组(A、B、C、D组),每组6个重复,每个重复1只。A、B组饮用蒸馏水,C、D组饮用蒸馏水中添加20μg/m L的香菇多糖;试验第15天B、D组灌服2 m L浓度为1×1010CFU/m L大肠杆菌K88,A、C组灌服等量生理盐水。试验第18天心脏采血处死,取空肠固定和冻存,制作石蜡切片,苏木精-伊红(HE)染色和高碘酸雪夫氏(PAS)染色,测定绒毛高度、隐窝深度、绒毛宽度、上皮内淋巴细胞(IEL)数量和上皮杯状细胞(GC)数量,计算绒毛高度与隐窝深度的比值(V/C);并采用蛋白质印迹(Western-blot)法测定空肠紧密连接蛋白Occludin的表达水平。结果表明:各组绒毛高度和绒毛宽度无显著差异(P0.05)。C组隐窝深度极显著低于A、B组(P0.01),显著低于D组(P0.05)。C组V/C极显著高于A、B、D组(P0.01)。C组IEL数量极显著低于B、D组(P0.01),显著低于A组(P0.05)。C组上皮GC数量极显著高于A、D组(P0.01),与B组差异不显著(P0.05)。D组Occludin表达水平明显高于A、B和C组,B组Occludin表达水平高于A组。综上,大鼠饮用水中添加香菇多糖可改善大鼠空肠形态结构,并提高其抵抗大肠杆菌感染能力,促进Occludin的表达。 相似文献
10.
11.
啤酒酵母主要生长在偏酸性、含糖较丰富的环境中,在其传代培养过程中会有一部分酵母死亡,甚至产生自溶。传代培养过程中不可能完全防止酵母细胞的自溶,只能控制酵母细胞自溶的限度。通过观察不同pH、装液量、酵母浸膏浓度、葡萄糖浓度、麦芽汁、紫外线照射、温度因素对啤酒酵母传代培养的影响,确定酵母菌的最佳培养方式及各影响因素的最佳值。优化后的啤酒酵母传代培养条件为:pH为5.0,温度为30℃,接种量为100 mL/L,葡萄糖浓度50 g/L,酵母浸膏浓度2.0 g/L,装液量以小于60%为宜,以增加摇瓶内的溶氧量。此外,增加摇床转速也可提高摇瓶的通气量,以40 r/min较为理想。转接酵母前,过滤去除麦芽汁培养基中析出的冷凝固物。传代培养过程中应避免紫外线辐射,以减少酵母细胞衰老、死亡及自溶的概率。 相似文献
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通过构建鸡α干扰素真核表达载体,以获得能够表达鸡α干扰素的酵母工程菌株。首先根据GenBank公布的鸡α干扰素基因序列设计上、下游引物,以略阳乌鸡基因组DNA为模板,PCR扩增鸡α干扰素基因片段。然后,利用基因重组技术将鸡α-干扰素基因插入真核表达载体,通过菌落PCR和DNA测序确定目标载体,构建成功后转化至酿酒酵母AH109,再通过营养缺陷培养、质粒提取和PCR鉴定带JMB440-ChIFN-α载体的重组酵母菌株。最终通过酵母培养、总蛋白收集、SDS-PAGE电泳和Western blot等,确定鸡α干扰素基因能够与酵母菌株重组,并表达α干扰素,蛋白条带大小约为23ku,与预期结果一致,表明成功构建了表达鸡干扰素基因的工程酵母菌株。 相似文献
14.
为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)gp5基因在酿酒酵母中表达后蛋白的定位位置,以此揭示PRRSV在感染细胞中获取囊膜的位置信息,本研究首先将gp5基因克隆到酿酒酵母表达载体pUG35的gfp基因上游,构建重组质粒pUG-gp5-gfp,电击导入酿酒酵母CEN.PK2中,经尿嘧啶缺陷型营养筛选,获得重组酵母pUG-gp5-gfp/CEN.PK2,在甲硫氨酸营养缺陷培养基诱导表达后,荧光显微镜观察显示,gp5-gfp融合基因在酿酒酵母中获得表达,所表达的融合荧光蛋白主要聚积位置与内质网和质膜的定位模式一致,表明GP5蛋白信号肽在酵母中起到了导向作用,揭示了PRRSV在宿主细胞中获得囊膜的可能位置。该研究为其他病毒在宿主细胞中的组装位置研究提供新的思路。 相似文献
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1. This experiment investigated the effects of water and Saccharomyces cerevisiae added to wheat-based diets on gastrointestinal, blood and performance parameters of broiler chickens. 2. A total of 160 one-d-old male broiler chicks were given air-dry or wet diets, with or without S. cerevisiae supplementation (0 and 20 g/kg air-dry feed) ad libitum to 42 d. 3. Feeding broilers with a diet mixed with water in a ratio of 1·2 : 1·0 increased body weight, feed intake, abdominal fat, carcase weight, feed transit time and blood HDL (high density lipoprotein) (without yeast). Supplementation with S. cerevisiae increased DM digestibility but reduced ileal pH, ileal coliform population and abdominal fat content. 4. There was a significant interaction between S. cerevisiae and wet feeding, with S. cerevisiae supplementation inducing a significant increase in body weight and feed intake but a reduction of relative abdominal fat and ileal pH of broilers fed on wet diets. 5. It is concluded that wet feeding improved growth performance by increasing feed intake and that the addition of a culture of S. cerevisiae had a growth stimulating effect, as the inclusion of yeast in wet wheat-based broiler diets generated greater responses than yeast in dry-based diets. 相似文献
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旨在研究日粮中添加酿酒酵母培养物对和牛育肥效果的影响。选用健康无病、体重相近的和牛374头,随机分成3组,A、B组为试验组,日粮中添加不同水平的酿酒酵母培养物,C组为对照组,日粮中不添加酵母培养物;各组试验和牛每天早、晚各饲喂1次,正试期45 d;试验结束后对各组和牛进行称重,计算并比较各组和牛在试验期间的日增重;采用粪筛分析法评价各组和牛的饲料消化率。结果表明,A、B组在试验期间的日增重均显著高于C组(P<0.05),且B组日增重最大;A、B组试验末粪筛的第3层比例较试验前上升,且试验末粪筛的第3层黄色玉米碎屑均比C组少。综上提示,育肥和牛日粮中添加酿酒酵母培养物可以提高其日增重和饲料转化率。 相似文献
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《The Professional Animal Scientist》2002,18(4):358-362
The objective of this study was to examine the effects of two Saccharomyces cerevisiae feed supplements on the in vitro mixed ruminal microorganism fermentation of ground corn, soluble starch, alfalfa hay, and Coastal bermudagrass hay. In the absence of added substrates, both yeast supplements increased (P<0.05) methane concentrations, whereas concentrations of acetate and propionate were numerically increased. In ground corn incubations, both concentrations (0.35 and 0.73 g/L) of both S. cerevisiae supplements had little effect on final pH or fermentation products. Both concentrations of each S. cerevisiae supplement numerically increased concentrations of acetate and butyrate in soluble starch fermentations. In addition, the 0.73-g/L treatment increased (P<0.10) propionate, and both yeast treatments decreased (P<0.05) acetate:propionate. In vitro DM disappearance of alfalfa hay and Coastal bermudagrass hay did increase over time. However, the addition of both concentrations of each S. cerevisiae supplement had little effect on either the rate or extent of digestion of either forage by mixed ruminal microorganisms. In general, both S. cerevisiae supplements seemed to have similar effects on the in vitro mixed ruminal microorganism fermentation. 相似文献
20.
《中国兽医杂志》2017,(7)
为了探索益生性酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(Sheep Beta-Defensin-1,SBD-1)表达的调节作用。建立绵羊瘤胃上皮细胞培养体系作为体外试验模型,用不同浓度酿酒酵母菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞刺激2 h后分别进行不同时间的诱导培养,然后利用实时荧光定量PCR技术(RT-q PCR)研究接受刺激后瘤胃上皮细胞中SBD-1 mRNA表达的差异。结果表明,在各时间组内,SBD-1 mRNA的表达量随着菌液浓度的增加均呈先升高后降低的趋势,当菌液浓度为5.2×107CFU/m L时表达量均达到最大,并与对照组和其他浓度组相比差异极显著(P﹤0.01)。当菌液浓度一定时,SBD-1 mRNA的表达量先是随着诱导培养时间的延长而呈上升趋势,诱导培养时间为12 h时SBD-1 mRNA表达量达到峰值,之后呈下降趋势。因此,当浓度为5.2×107CFU/m L的菌液诱导瘤胃上皮细胞12 h时,SBD-1基因的表达量达到最高,且与此浓度下其他时间组的表达量相比差异极显著(P﹤0.01)。本试验结果表明,酿酒酵母菌能够诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,且浓度为5.2×107CFU/m L的菌液诱导瘤胃上皮细胞12 h时,SBD-1的表达量达到最高。 相似文献