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VP28蛋白鸡源抗WSSV卵黄抗体的制备及性能分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为了研制鸡源抗对虾白斑综合征病毒（WSSV）卵黄抗体（IgY）,利用WSSV毒株及其衣壳蛋白VP28制备成2种不同的疫苗,并分别免疫接种健康蛋鸡群,使鸡群产生不同的IgY,经病毒中和试验证实,2种IgY均有明显的抗WSSV效果,其中WSSV粗提液1∶1000倍稀释时,WSSV灭活苗免疫蛋鸡产生的IgY对南美白对虾的保护率为61.7%,重组VP28疫苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为48.3%;而WSSV粗提液1∶10000倍稀释时,WSSV灭活苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为85.0%,重组VP28疫苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为75.0%. 相似文献
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卵黄抗体五种提取工艺比较及初步应用 总被引：1，自引：0，他引：1
为了得到较优的卵黄抗体提取工艺,试验改良了辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法与聚乙二醇沉淀法5种提取方法。IPGT诱导表达重组猪致病性大肠杆菌(Escherichia coli)毒素STxB蛋白(rSTxB),与佐剂71VG乳化制备免疫原免疫蛋鸡,利用改良的聚乙二醇沉淀法提取高免卵黄抗体,采用SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,通过Western blot检测卵黄抗体和血清抗体效价。结果表明,辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法、聚乙二醇沉淀法提取效率分别为96.00、81.99、155.50、65.34、46.00 mg/mL,其中聚乙二醇沉淀法的提取纯度最高。重组STxB蛋白分子量大小约25 kDa,血清中抗体效价最高达到64 000倍,卵黄抗体最高稀释倍数为16 000倍。综合评估,聚乙二醇的提取法相对较优,且提取的卵黄抗体具有良好的免疫活性。 相似文献
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抗副溶血弧菌IgY的提纯及检测副溶血弧菌的间接ELISA的建立 总被引：2，自引：0，他引：2
分离纯化抗副溶血弧菌IgY,并建立一种快速检测副溶血弧菌的间接酶联免疫吸附法(indirect ELISA),分析了该方法的敏感性、特异性和重复性. 将水稀释法、乙醇沉淀法和DEAE-Sepharose FF离子交换层析联用以分离纯化抗副溶血弧菌IgY,然后以纯化的IgY为一抗,辣根过氧化物酶标兔抗鸡IgY为二抗,建立检测副溶血弧菌的间接ELISA方法. 结果表明:建立的间接ELISA方法,一抗的最佳工作质量浓度为15 μg/mL,二抗的最佳稀释度为1∶ 10 000,副溶血弧菌培养液的检出限为1.0×105 cfu/mL,该方法对测定的其他8种菌株没有交叉反应. 建立的间接ELISA方法具有良好的灵敏度、特异性和稳定性,能够快速、准确地对副溶血弧菌进行检测. 相似文献
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从全身出血合并腹水的养殖大菱鲆Scophthalmus maximus体内分离出1株细菌,经感染试验证实其病原性,并鉴定该菌为迟缓爱德华氏菌Edwardsiella tarda。采用该菌制成全菌油乳性灭活疫苗,分4次给蛋鸡进行免疫注射,第2次加强免疫后开始收集鸡蛋,制备卵黄抗体(IgY)和其水溶性组分(W SF),并用试管凝集法测定其效价。取效价达到1∶64的鸡蛋提取卵黄抗体,分别采用口服和腹腔注射两种方式给大菱鲆进行免疫:配成含W SF 1 mL/g的饵料,给鱼连续投喂15 d;用含蛋白含量0.19 mg/mL的纯化IgY,于第1、3、14 d对大菱鲆进行腹腔注射,剂量为0.1 mL尾/。免疫后分别用注射和划伤浸泡两种方法攻毒。结果表明,口服特异性卵黄抗体对大菱鲆的免疫保护率分别为83.3%和100%,而注射免疫没有保护作用。 相似文献
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抗小鹅瘟病毒单克隆抗体及其在防治上的初步应用 总被引：2，自引：0，他引：2
用淋巴细胞杂交瘤技术获得了7株能稳定分泌抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞系,并对其部分免疫生物学特性进行了测定。这些单抗不仅特异性强,而且反应效价高,其中以GD_4和GD_6单抗的反应滴度最高,ELASA效价前者为10~(-6),后者为10~(-5).同时对GPV均具有中和能力和凝聚能力。用GD_4单抗进行小规模现场防治试验,对小鹅瘟有较好的预防和治疗效果。 相似文献
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[目的]为建立鸡传染性贫血病(CIA)诊断方法奠定基础。[方法]对15周龄SPF鸡进行4次免疫后,制备鸡传染性贫血病血清抗体并对其进行纯化,测定抗原最佳包被浓度和血清的最佳稀释度,研究纯化后血清抗体的蛋白含量和效价。[结果]阳性血清和阴性血清的最佳稀释度为1∶100,病毒包被抗原最佳包被浓度为5μg/ml。血清抗体蛋白含量为13.2 mg/ml,血清抗体效价为1∶12 800。[结论]该研究为制备CIA胶体金快速诊断试纸条奠定了基础。 相似文献
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[目的]为肝素钠的大规模生产提供依据。[方法]利用3种复合酶从肠渣中提取肝素钠,通过测定提取肝素钠的质量、蛋白含量以及效价对3种复合酶法进行评价。[结果]由木瓜蛋白酶和链蛋白酶复合酶提取的肝素钠中蛋白含量最高（47％）,效价为15USPU／mg;由胰蛋白酶和链蛋白酶复合酶提取的肝素钠中蛋白含量为29％,而其效价为34USPU／mg。由2709碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶提取的肝素钠中蛋白含量最少（24％）,效价最高（39USPU／mg）。[结论]2709碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶能有效提取肠渣中残留的肝素钠。 相似文献
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作者以新城疫病毒(NDV)的强毒株F_(48)E_8为免疫抗原。应用淋巴细胞杂交瘤技术。获得6株抗NDV血凝素的中和性单克隆抗体,分别命名为F_4、FE_8、F_(14)、F_(14),FD_(12)和F_(32)。这6株单抗对NDV都表现出高度的血凝抑制(HI)活性和中和能力。其中FE_8和F_4单抗的HI效价分别达1:2~(17)和1:2~(16),鸡胚内中和效价分别达10~(-5)和10~(4.8)。这些单抗的特异性强,仅与NDV发生反应,而与感染家禽的常见病毒如传染性腔上囊炎病毒(IBDV)、小鹅瘟病毒(GPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭瘟病毒(DPV)均无交叉反应。在鸡体保护试验中,1ml 1:160倍稀释的FE_8或F_4腹水单抗均能使所试小鸡抵抗NDV强毒的攻击。上述结果表明,FE_8和F_4单抗不仅能为NDV的单克隆抗独特型抗体研制提供一种理想的免疫原(单克隆独特型抗体,Ab_1)。而且可用于新城疫的紧急预防。 相似文献
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通过研究鸡注射卵黄抗体后血清中抗体衰减的规律,为临床利用卵黄抗体治疗疾病提供理论指导。选取母源抗体衰减至近消失的60d龄海兰灰公鸡随机分成对照组和试验组。试验组每只肌注2mL含有新城疫、禽流感H5亚型和H9亚型3种抗体成分的卵黄抗体,对照组注射等量生理盐水。在注射后不同时间检测血清中3种抗体滴度的变化。结果显示试验组新城疫抗体在1～8d均极显著高于对照组(P<0.01);试验组禽流感H5亚型抗体滴度在1～11d极显著高于对照组(P<0.01),注射抗体组禽流感H9亚型抗体滴度在1～14d极显著高于对照组(P<0.01)。注射卵黄抗体后1d血清抗体即显著升高,5～6d内抗体效价维持较高水平,然后逐步衰减。试验表明肌注卵黄抗体能够极显著提高鸡血清抗体滴度,注射后5d内抗体维持较高水平,半衰期大约为5d,之后随时间推移抗体滴度逐渐降低。证明肌注卵黄抗体治疗疾病具有起效快作用可靠的优点,值得临床推广应用。 相似文献
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为制备鹅免疫球蛋白特异性抗体,通过主动免疫兔子制备了抗鹅ＩｇＹ抗血清,并在ＥＬＩＳＡ中比较分析了该抗血清的应用效果．结果显示,将制备的抗鹅ＩｇＹ抗血清作为二抗,当抗原包被浓度（１６μｇ／ｍＬ）和血清（１∶１６００）、抗鹅ＩｇＹ抗血清（１∶５１２００）与酶标抗体（１∶２０００）稀释到合适浓度时,在ＥＬＩＳＡ检测鹅抗体水平中呈现出良好效果,其特异性和灵敏度明显好于以兔抗鸡ＩｇＹ作为替代二抗．结果表明所制备的抗鹅ＩｇＹ抗血清在鹅相关的酶联免疫研究方法中是合格和有效的． 相似文献
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为了从麻鸡脾脏组织中提取出纯度高、完整性好的总RNA,将约80,120,140 mg的麻鸡脾脏组织分别与1 mL的RNAisoPlus混合,采用RNAisoPlus法进行提取。从提取出的RNA琼脂糖凝胶电泳图谱可知,当脾脏组织用量约140 mg时,RNA几乎全部降解;当脾脏组织用量约120 mg时,RNA降解严重;当脾脏组织用量控制在约80 mg时,提取出的RNA电泳图谱为清晰的3条带,分别为5 S,18 S,28 S,且A260/A280=1.982。上述结果表明,用1 mL的RNAiso Plus,并且把脾脏组织用量控制在80 mg左右时,可提取出纯度高、完整性好的总RNA。 相似文献
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米糠和豆粕中植酸的提取及含量的测定 总被引：1，自引：0，他引：1
为了提取米糠和豆粕中的植酸并测定其含量,采用阴离子交换树脂提取植酸,测铁分光光度法测定植酸含量。结果表明,影响提取率的主要因素有提取时间、提取温度、树脂类型及分离时的流速。通过正交试验确定了最佳的提取、分离工艺：提取温度45℃、提取时间3h、D201大孔阴离子交换树脂、流速1mL·min^-1,测得米糠中提取植酸含量为70．39mg·g^-1,豆粕中提取植酸含量为21．14mg·g^-1。该提取方法提取率高,测定方法操作简单、准确度较高,适用于农副产品中植酸的提取及含量的定量测定。 相似文献
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沙棘多糖提取工艺研究 总被引：3，自引：1，他引：2
用正交设计方法分别对热水提取法、微波辅助法、超声波法、酶法、酶法-超声波协同萃取法提取沙棘果渣多糖的工艺条件进行了优化研究。结果表明,五种方法的提取量分别为：102.36mg·g^-1、19.04mg·g^-1、88.09mg·g^-1、65.91mg·g^-1、81.5mg·g^-1,5种方法的提取效果优劣依序为：热水提取法〉超声波法〉酶法-超声波协同萃取法〉酶法〉微波辅助法;综合时间、成本等因素,以采用超声波法提取沙棘果渣多糖效果好,此时最佳工艺条件为提取温度60℃,料液比1：50（g：mL）,时间20min,经验证的提取率为88.09mg·g^-1。 相似文献
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[目的]对某养鸡场的鸡新城疫抗体进行血清学检测,以有效评估鸡群的免疫状态,制定合理免疫程序。[方法]对永州市某养鸡场病鸡进行鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验,检测鸡新城疫抗体水平。[结果]在检测的60份血样中鸡新城疫抗体效价为1：8—1：4。鸡新城疫抗体效价≥1：16（410g2）的占13．3％,鸡新城疫抗体效价≥1：8（3lo2）的占21．7％,鸡新城疫抗体效价〈1：4（2log2）的占65％。[结论]该鸡场鸡群鸡瘟疫苗免疫失败。 相似文献
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HPLC法测定金银木花和叶中绿原酸的含量 总被引：3，自引：0，他引：3
采用70%的甲醇溶液为提取剂,索氏提取法对金银木花和叶中绿原酸进行提取,HPLC法对金银木花和叶中绿原酸进行检测。色谱柱为SHIMADZU C18柱,流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液（体积比1：9）,波长为327nm,流速为1.0mL·min^-1。绿原酸在0.232-3.48μg呈良好线性关系,相关系数r为0.9996。结果表明：金银木花和叶中都含有绿原酸且含量较高。 相似文献