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2株副溶血弧菌不同盐度下致病性和毒力基因差异分析 总被引：1，自引：0，他引：1
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是常见的食源性致病菌和海水养殖动物致病菌,目前已知的毒力基因有tlh、tdh、trh、T3SS、pirA、pirB、toxR/S、orf8等。盐度是影响细菌基因表达的关键生态因子之一,为进一步探求副溶血弧菌的致病机理,对2株分别分离自海水和淡水养殖发病凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中的副溶血弧菌在不同盐度下的生长速率、致病性进行检测,并用q-PCR方法对菌株毒力基因携带和表达情况进行定量研究。实验结果表明:海水菌株383生长速率快于淡水菌株V9,但菌株383在生长稳定期的细菌浓度明显低于菌株V9;菌株383对凡纳滨对虾的致病性明显高于菌株V9,前者的48 h半致死浓度(LD_(50))低于后者2个数量级;2株副溶血弧菌皆携带毒力基因tlh、T3SS1和pirA/B,但未检测到tdh、trh、T3SS2、toxR/S和orf8。部分毒力基因表达量检测结果显示,菌株383和菌株V9均为vcrD1表达量最高,其次是pirA,vopD1表达量最低;4个毒力基因不仅在2菌株间的表达量差别较大,而且盐度对同一菌株不同毒力基因表达的影响也是不同的。2株副溶血弧菌的毒力与pirA和vcrD1的表达量呈正相关性。研究结果为探究环境因素与副溶血弧菌致病力的关系提供了科学依据,同时也提示,淡水养殖凡纳滨对虾要防范副溶血弧菌输入的风险。 相似文献
2.
牡蛎中副溶血弧菌荧光定量PCR检测方法的建立及其应用 总被引：5，自引：0，他引：5
以副溶血弧菌毒素调控基因(toxin regulations,toxR)作为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,以含toxR基因的质粒为模板,建立质粒拷贝数与CT值的标准曲线,分别采用含toxR基因质粒、纯培养的副溶血弧菌和添加副溶血弧菌的牡蛎(Ostrea)模拟样品进行灵敏度试验,结果表明,其灵敏度分别为15拷贝、18 CFU/mL和180CFU/mL.同一个样品的30次重复性试验表明,试验内及试验间的变异系数分别为0.95%和1.5%.结果显示,本研究建立的副溶血弧菌荧光定量PcR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于牡蛎等水产品中副溶血弧菌的定量检测. 相似文献
3.
为探明弧菌总数与水质参数之间的定量关系,对大西洋鲑循环水养殖系统中弧菌总数和水质参数的动态变化进行了为期12个月的系统监测。采用多元线性回归法对弧菌总数与水质参数进行了相关性分析,并通过蒙特卡罗模拟法模拟了关键水质参数随机性变化对弧菌总数的影响。结果表明,温度,盐度和化学需氧量(COD)对弧菌总数有显著影响(P0.01)。采用多元线性回归法建立了温度,COD,盐度和弧菌总数之间关系的数学表达式:弧菌总数对数值=–7.24+0.355×COD+0.323×温度+0.129×盐度(R2=0.694,P0.01)。通过蒙特卡洛模拟验证了温度,COD,盐度和弧菌总数动态变化的相关性,结果表明,COD与弧菌总数的动态变化最为相关(R2=0.756),COD是大西洋鲑循环水养殖系统中促进弧菌生长的最大风险因素。为了验证预测模型的有效性,对大西洋鲑循环水养殖系统中弧菌总数和水质参数进行了12个月的测定,并将S–T模型的预测值与本研究的预测值进行了比较。结果表明,本研究模型与观测数据基本吻合(P0.01)。多元线性回归模型和蒙特卡洛模拟法可以作为大西洋鲑循环水养殖系统快速评估弧菌数量的重要工具。 相似文献
4.
选取桑沟湾和爱连湾两个典型牡蛎养殖区为研究对象,调查了两个海区高温季节牡蛎的死亡情况,监测了不同养殖区的水温、盐度、pH和DO等环境指标,并测定了牡蛎体内超氧化物歧化酶(SOD)活性和生长指标的差异,初步探讨了桑沟湾养殖长牡蛎夏季高温死亡的原因。结果表明,实验期间(5～10月)桑沟湾崖头养殖海区(E122.498,N37.151)长牡蛎夏季累积死亡率为37%,最高死亡率出现在8月17日,高达51%,而爱连湾养殖海区(E122.582,N37.179)的累积死亡率仅为2.5%,最高死亡率出现在9月28日,为4.5%。单因子方差分析(ANOVA)表明死亡率与水温具有很强的正相关(R=0.804,P0.01),与溶氧呈明显负相关(R=-0.377,P0.01);死亡率与体重、软体湿重、性腺湿重等生长状况指标呈明显的负相关(R分别为-0.690、-0.498、-0.358),与SOD活性呈正相关(R=0.21,P0.05)。 相似文献
5.
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)在海洋环境中普遍存在,是能够引起人类中毒的重要食源性病原菌之一,研究其生长受环境因子的影响规律对科研和社会生活都具有重要意义。本研究采用响应面法研究温度、盐度、pH、磷酸盐、硝氮和氨氮对VP的生长影响,以探讨、评估这6种理化因子的综合作用结果。首先用Design-Expert软件中的Box Behnken中心组合原则设计三因素三水平响应面实验,再进行响应面分析,以培养基光密度(OD600 nm)值为生长状态参数,获得该菌的最佳培养参数：温度为34.5℃,盐度为3%,酸碱度pH为8.0。在此基础上,考察NaNO3、NH4Cl和Na3PO4对VP生长的影响并建立模型。回归方程决定系数R2=0.9217,校正系数R2=0.8211,回归模型F=9.16, P=0.004,表明该模型具有较好的准确性。实验所得实测值与模型演算理论值拟合良好,皆表明磷酸盐、硝氮和氨氮对VP的生长都具有抑制作用。 相似文献
6.
研究了二次煎煮的石榴皮提取物(Pomegranate peel aqueous extract,PPAE)对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的抑制活性作用及其机理,为防治水产养殖弧菌病提供理论依据。采用二倍稀释法测定石榴皮提取物对副溶血弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)、电导率仪检测弧菌的相对电导率、分光光度法测定弧菌的核酸泄露及生物膜抑制率、蛋白质电泳检测弧菌的蛋白质合成、扫描电子显微镜观察弧菌的亚显微结构及碘化丙啶(PI)染色分析弧菌细胞膜完整性。结果表明：PPAE对副溶血弧菌具有明显的抑制作用,MIC和MBC分别为1.563 mg·m L-1和3.125 mg·m L-1;PPAE能够显著抑制副溶血弧菌生物膜形成(P<0.05);显著增加副溶血弧菌的核酸泄露和电导率(P<0.01),明显抑制副溶血弧菌蛋白合成;明显改变副溶血弧菌亚显微形态,破坏副溶血弧菌细胞膜的完整性。 相似文献
7.
副溶血性弧菌增菌培养基及培养条件的改进 总被引：2，自引：0，他引：2
对副溶血性弧菌增菌培养基及培养条件进行了改进和优化,建立一种更适用于副溶血弧菌增菌的方法。针对能够决定副溶血弧菌综合营养需求的2个最为关键的因素:混合蛋白胨、酵母浸膏以及两者交互作用,进行试验设计,结合统计学软件对结果进行直观分析和方差分析,验证最佳培养基和培养条件。直观分析表明,副溶血弧菌增殖过程中,混合蛋白胨是最主要因素,其次为酵母浸膏。方差分析表明,混合蛋白胨与酵母浸膏对副溶血弧菌生长的影响均显著。最佳培养基配方为:混合蛋白胨2%(胰蛋白胨1%、鱼蛋白胨1%)、酵母浸膏0.2%、NaCl 3.5%、pH8.6;最佳培养条件为:(36±1)℃+摇床120 r/min+2层牛皮纸封口。本优化培养基与培养条件用于副溶血弧菌增菌培养,在相同培养时间内,其增菌菌液浓度为GB/T4789.7-2008方法的(1.8±0.6)倍。 相似文献
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为了解对虾养殖池中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的耐药性和毒力基因的携带情况,2018年从山东4个地区的对虾养殖池收集分离副溶血弧菌,采用Kirby-Bauer纸片法检测其对12种抗生素的耐药性,用PCR方法检测其携带耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热相关溶血素基因(trh)的情况。从对虾养殖池共分离副溶血弧菌50株。药敏实验结果显示,副溶血弧菌对庆大霉素、硫酸新霉素和氨苄西林的耐药情况最为严重,耐药率分别高达98%、90%和86%,对氟苯尼考、氯霉素、头孢他啶等敏感性较高,耐药率分别为10%、10%和20%。88%的菌株具有多重耐药性。毒力基因检测结果显示,所有菌株均不携带tdh基因,4%的菌株表现为trh阳性。本研究表明,对虾养殖水环境中的副溶血弧菌对抗生素的耐药性较为严重,应加强副溶血弧菌的病原学监测,在养殖过程中合理使用抗生素,以实现水产养殖业健康发展。 相似文献
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研究副溶血弧菌对斑马鱼的感染模式。试验以注射、创伤、浸泡等3种不同的感染方式分2次进行,每组10尾斑马鱼,结果显示注射感染只在高浓度菌液时有死亡,48h的LC50是5.63×107CFU·mL-1,而创伤感染偶有死亡,浸泡感染则未见死亡,表明注射感染是斑马鱼副溶血弧菌的重要感染模式。同时注射感染结果也显示低水温的死亡率远远低于高水温的死亡率,表明适宜的温度和弧菌的浓度是其致病的关键。并初步探讨了大豆异黄酮作为饲料添加剂的免疫增强作用,各组试验鱼分别投喂黄酮含量为0.5%、1%、2%的饲料,喂养两周后开始注射3.6×109CFU·mL-1的副溶血弧菌悬液,以投喂1%的试验组的抗感染效果较好,表明其对减少养殖病害的发生有一定的好处,为养殖生产提供一种新的免疫增强剂。 相似文献
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莫桑比克鳗鲡养殖生物学主要特性研究 总被引：5，自引：1，他引：4
对莫桑比克鳗鲡（Anguillamor morata）玻璃鳗经形态学鉴定品种后，开展了主要养殖生物学特性研究。耐受高温和低温分别为39℃和7℃，适宜生存水温15℃～33℃；耐受盐度与水温相关，水温30℃致死盐度2．9％，适宜盐度小于1．1％，20℃致死盐度2．7％，适宜盐度小于1．8％，10℃致死盐度2．1％，适宜盐度小于2．0％；耐受pH值与水温相关，30℃致死pH值分别为3．5和11．0，适宜pH值6．0—7．0，20℃致死pH值分别为4．0和11．0，适宜pH值6．0～8．0，10℃致死pH值分别为3．5和10．5，适宜pH值5．5—8．5。常用药物S高聚碘、二氧化氯、三氯异氰尿酸、苯扎溴铵、溴氯海因、甲醛、敌百虫的安全浓度高于或接近常用浓度，硫酸铜、溴氰菊脂乳油、氯氰菊脂、甲苯咪唑的安全浓度低于常用浓度。水体中非离子态氨的安全浓度为2．51mg／L，亚硝酸氮的安全浓度为55．12mg／L。 相似文献
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为探明钝缀锦蛤的摄食生理,以北海近海人工中间培育和养殖的钝缀锦蛤为试验材料,室内条件下采用试验生态法研究温度、盐度和体质量对钝缀锦蛤滤食率与同化率的影响。试验结果表明,在温度17～33℃条件下,滤食率随温度的升高,呈先升后降的趋势,滤食率(y)与水温(x)之间的回归方程为y=-4.338×10-3 x^3+0.311x2-6.915x+49(r2=0.999),同化率随着温度的升高而增大,温度对同化率的影响显著(P<0.01);在盐度18～33条件下,滤食率随盐度的升高呈先增后降的趋势,盐度27～30时保持较高的滤食率,滤食率(y)与盐度(x)之间的回归方程为y=-0.027x^2+1.638x-19.52(r^2=0.994),同化率随盐度的升高而增大,盐度为30时同化率最高,盐度对同化率的影响显著(P<0.01);滤食率随体质量增加而降低,体质量对同化率影响不显著(P>0.05)。研究表明,钝缀锦蛤属典型热带和亚热带种群品种,适宜生活在温度和盐度较稳定的潮下带区域,非广温广盐性贝类。 相似文献
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采用实验生态学方法,研究了盐度骤降(盐度分别为10、20,自然海水为对照组)对近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)和长牡蛎(Crassostrea gigas)生理代谢的影响。结果显示,盐度骤降对长牡蛎和近江牡蛎的耗氧率(OR)、排氨率(NR)、排粪率(FER)均有显著影响(P<0.05),且2种牡蛎对盐度骤降的响应存在差异。长牡蛎的耗氧率、排氨率、摄食率(IR)和排粪率均在自然海水中最高,低盐对长牡蛎产生不同程度的胁迫。而近江牡蛎在盐度为20时的上述指标显著高于其他盐度处理组。通过测定不同规格牡蛎的代谢率,建立2种牡蛎在不同盐度下的代谢率与规格(湿重)的回归方程,该方程符合幂指数:Y=aWb。通过归一化处理,比较湿重在20 g时,2种牡蛎的能量分配差异。盐度为20时,近江牡蛎的呼吸代谢较强(呼吸能占16.1%),而长牡蛎在自然海水中呼吸代谢较强(呼吸能占7.8%),2种牡蛎的呼吸代谢均在盐度为10时较低,其中,长牡蛎呼吸能仅占0.7%。研究表明,盐度骤降对长牡蛎的影响大于近江牡蛎,小幅度的盐度骤降对近江牡蛎的能量代谢有一定的促进作用。本研究从能量代谢角度,探讨了近江牡蛎和长牡蛎对盐度骤变的响应,可为牡蛎礁修复工作和养殖生产过程中的品种选择提供参考。 相似文献
13.
在水温(26.4±0.79)℃、盐度11、14.5、18、21.5、25和28.5下,将壳长27~28mm泥蚶饲养在流水系统中24h,每一盐度梯度设置3个平行和3个空白对照,以研究盐度对泥蚶摄食、代谢、碳收支及能量代谢的影响。试验结果显示,随着盐度的升高,泥蚶的滤水率、摄食率、吸收率和O∶N均先升后降,而耗氧率与排氨率先降后升,在盐度18~21.5时显著达到极值(P0.05),但盐度对泥蚶的耗氧率、排氨率和O∶N影响不显著(P0.05)。泥蚶代谢所需要的能量主要由脂肪和碳水化合物提供,盐度18~21.5为泥蚶的适宜盐度范围,此时的能量代谢方程分别为:100C=26.12F+30.75R+5.78U+37.35P;100C=25.06F+32.03R+5.15U+37.76P。 相似文献
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Masatomi Hosoi Seiya Sugihara Kouta Kato Shoshi Mizuta Yoshihiro Yokoyama 《Fisheries Science》2014,80(4):819-825
The effects of immersion salinity on the food properties [water content, salinity, and free amino acid (FAA) content] of shucked oysters were analyzed. Results of a laboratory immersion experiment suggested that the molluscous parts (other than the adductor muscle) swelled in lower salinity and shrank in higher salinity. Higher FAA content was observed in oysters immersed in higher-salinity water. In the adductor muscle, water content increased and FAA content decreased markedly following immersion, regardless of salinity, probably because of intake of immersion fluid and leakage of FAAs across the cut end of the adductor muscle. Immersion salinity ranged from 0.17 to 1.54 % in shucked oyster products on the retail market. Tissue salinity was strongly correlated with immersion salinity (r = 0.904), and tissue water content was correlated negatively with immersion salinity (r = ?0.668). In addition, total FAA and taurine content of oysters were correlated with immersion salinity (r = 0.629 and 0.865, respectively). These results clearly indicate that immersion salinity is an important factor affecting the food components of shucked oysters. 相似文献
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Shrimp pond effluent water can contain higher concentrations of dissolved nutrients and suspended particulates than the influent water. Consequently, there are concerns about adverse environmental impacts on coastal waters caused by eutrophication and increased turbidity. One potential method of improving effluent water quality prior to discharge or recirculation is to use bivalves to filter the effluent. In this study, we examined the effects of the Sydney rock oyster, Saccostrea commercialis (Iredale & Roughley), on the water quality of shrimp pond effluent. Effluent from a shrimp farm stocked with Penaeus japonicus (Bate) was pumped directly into 34-L tanks stocked with different densities of oysters. Combinations of live and dead oysters were used to test the effects of three different densities of live oysters (24, 16 and 8 live oysters per tank). The concentrations of total suspended solids, the proportion of organic and inorganic matter, total nitrogen, total phosphorous, chlorophyll a and the total number of bacteria in the pond effluent water were determined before and after filtration by oysters. The oysters significantly reduced the concentration of all the parameters examined, with the highest oyster density having the greatest effect. Shrimp pond effluent contained a higher proportion of inorganic matter (72%) than organic matter (28%). The organic component appeared to be mainly detritus, with chlorophyll a comprising only a minor proportion. Filtration by the high density of oysters reduced the effluent total suspended solids to 49% of the initial level, the bacterial numbers to 58%, total nitrogen to 80% and total phosphorous to 67%. The combined effects of settlement and oyster filtration reduced the concentration of chlorophyll a to 8% of the initial effluent value. 相似文献
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为探究香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)的繁殖特性以及春季死亡原因,采用肉眼观察、活体镜检和组织切片方法研究了茅尾海沙井的香港巨牡蛎苗种吊养于大风江黄场的1龄牡蛎的性腺发育周年变化,并建立了快速判断香港巨牡蛎性腺发育程度的方法.对比分析了吊养在茅尾海沙井、大风江入海口内的黄场和入海口外的鑫丰场的2龄牡蛎性腺发育的启动和发展过程.结果显示,广西茅尾海的香港巨牡蛎每年只有1个繁殖周期,性腺发育过程可划分为未分化期(1-3月)、分化期(4月)、成熟排放期(5-10月)及休止期(11-12月)4个阶段;1龄和2龄牡蛎的性腺发育基本同步;大风江入海口外的牡蛎的性腺发育较入海口内的牡蛎提前约15d,而比茅尾海内海的牡蛎提前约30 d,入海口外的牡蛎的性腺4月即发育到成熟排放期,冬季饵料的丰富程度和温度、盐度等因素可能是造成这种差异的原因.研究还发现,高温少雨天气下,海水盐度高,抑制了牡蛎性细胞的排放,导致入海口外侧吊养牡蛎的大规模死亡,濒临死亡的牡蛎性腺处于退化和崩解状态.鉴于此,认为4月初即需密切监测吊养于入海口外的牡蛎性腺的发育状况和天气状况,及时收获性腺饱满的牡蛎,或将吊养牡蛎的蚝排放置在河流入海口内区域过冬. 相似文献
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为保证生食葡萄牙牡蛎(Crassostrea angulata)的安全,在贝水比1∶10、水交换率3次/h、水温28℃、盐度28的条件下,采用流水式紫外线杀菌方法净化48 h,检测净化前后13个卫生指标的变化;净化后的牡蛎在冷藏(4℃)和冷冻(-18℃)两种条件下贮藏7 d以上;检测贮藏过程中菌落总数、大肠菌群和主要营养成分的变化。结果显示,经过48 h净化,菌落总数和大肠菌群含量均大幅下降,重金属、化学污染物等指标变化不大;两种贮藏条件下,菌落总数和大肠菌群都呈先下降再上升的变化,但始终处于安全水平内;蛋白质、脂肪、糖原含量缓慢下降,乳酸含量快速上升。研究表明,葡萄牙牡蛎在紫外线杀菌净化48 h后,至少在冷藏6 d或冷冻11 d内可以保证食品安全。 相似文献
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^60Co-γ射线对成体长牡蛎生长的影响及致死效应 总被引：2，自引：0，他引：2
Effects of ionizing irradiation of ^60Co-γ ray on mortality and growth of one year-old Pacific oysters ( Crassotrea gigas ) were studied. Irradiation was conducted at 4℃ and without sea water, and the survival, shell length, shell width, whole wet weight and condition index of irradiated oysters were measured. A biphasic dose response effect of 6^60Co-γ irradiation on Pacific oyster with high stimulatory response dose range to 100 Gy, and strong hormesis effects had been observed. Gamma ray induced mortality happened within 90 days after irradiation, and the relation between dosage ( D ) and mortality at 90 days could be described by the equation of M90 = 0.0041D^2- 0. 1816D (R^2= 0. 9958) with an LD50/90 of 135 Gy, indicating that the Pacific oyster has strong resistance to ^60Co-γ irradiation. Growth in shell length, shell width and whole wet weight of Pacific oyster were also enhanced by 60 Gy of ^60Co-γ ray. The condition index was also enhanced by ^60Co-γ irradiation in the dosage range from 40 to 100 Gy, with the maximum stimulatory response of 2.5 fold of control value at the 40 Gy dosage, suggesting that the accelerating effects of γ ray on growth of the Pacific oyster led to increase in dry meat. Results of this study showed that ionizing irradiation might be useful in the improvement of production traits in shellfish. 相似文献
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To investigate the possibility of establishing oyster culture in Malta, growth trials with C. gigas and O. edulis were undertaken. The oysters were placed in floating cages at depths of 3 and 8 m at Marsaxlokk bay, Mistra bay and Rinella creek. These oysters were sampled at two-month intervals for their growth, meat-shell index and survival. The temperature, salinity, oxygen tension, chlorophyll-a levels and the levels of particulate matter in suspension in the water at the test sites were monitored concurrently. A programme of qualitative and quantitative analyses of the natural phytoplankton population was also carried out.O. edulis suffered catastrophic summer mortalities at all locations when the ambient temperature of the water reached about 25°C; this virtually rules out any possibility of starting any flat oyster industry using this system. As for C. gigas, Marsaxlokk bay 3 m appears to hold some promise for its culture. At this location, this species showed reasonable growth, relatively low mortality and normal shell growth. Although at Rinella overall growth of C. gigas was comparable to that at Marsaxlokk at 3 m, the Rinella oysters accumulated copper and exhibited abnormal and thickened shell growth with the result that the oysters were of a much inferior condition. Growth at Mistra (both depths) and Marsaxlokk 8 m was stunted.No clear correlation could be established between the performance of the oysters and the environmental parameters monitored. Several factors that may have been responsible for the observed differences in oyster performance are discussed. In particular, the nature of the water movements is thought to have played a key role in dictating the growth of the oysters. 相似文献
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菲律宾蛤仔稚贝最适生长环境条件的响应面法分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为考察温度(T)、盐度(S)、pH及三者交互作用对菲律宾蛤仔稚贝期壳长生长的影响,使用Design-Expert 7.0软件采用BBD(Box-Behnken Design)实验设计方案,进行响应面分析,寻找最适生长条件组合,并构造蛤仔稚贝壳长生长模型。实验进行30 d对蛤仔稚贝壳长(L)进行测量。实验条件梯度设计为温度(30℃、25℃、20℃)、盐度(15、20、25)、pH[(7.00±0.09)、(8.00±0.09)、(9.00±0.09)]。结果显示:(1)温度在实验区间内与蛤仔稚贝壳长生长呈一定的正相关,在30℃附近达到壳长极值,盐度在实验区间内也与壳长生长呈一定正相关,但在接近25时达到壳长极值,pH在8～9时出现壳长极值,略偏碱性水体有利于蛤仔稚贝生长。(2)温度、盐度及pH三者间对蛤仔稚贝生长无显著交互作用(P>0.05)。通过Design-Expert 7.0软件对数据进行二次多元回归拟合,得到蛤仔稚贝壳长Y对编码自变量A、B和C的二次多元回归方程:Y=4.08+0.10A+0.18B+0.11C-0.055A2-0.13B2-0.12C2(R2=0.977 4),软件模拟最适蛤仔稚贝生长的条件组合为[T=29.65℃,S=23.35,pH=(8.46±0.09)]。 相似文献