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疑似草鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验 总被引：2，自引：1，他引：1
试验对疑似嗜水气单胞菌草鱼的肝脏、脾脏、肾脏组织进行嗜水气单胞菌的分离鉴定。通过普通营养琼脂、胰蛋白大豆琼脂及生化试剂等的分离培养与生化鉴定后,获得3株细菌;16S rRNA通用引物检测3株细菌的基因序列比对确定菌株后,对确定的草鱼嗜水气单胞菌进行回归试验确认其致病性,然后采用临床上常用的阿奇霉素、阿米卡星、链霉素等10种抗生素进行药敏试验。结果表明,经过分离培养、生化鉴定及16S rRNA通用引物鉴定后确定3种菌株分别为嗜水气单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌和腐败斯瓦尼菌,确定的嗜水气单胞菌回归试验证明其具有致病性;药敏试验显示阿奇霉素对腐败斯瓦尼菌和嗜麦芽窄食单胞菌敏感,其抑菌直径分别为105、95 mm,阿米卡星对嗜麦芽窄食单胞菌、嗜水气单胞菌和腐败斯瓦尼菌这3种菌都较敏感,抑菌直径分别为105、95和93 mm。结果表明,疑似为嗜水气单胞菌病的草鱼有3种细菌感染,其中鉴定的嗜水气单胞菌是致病菌,常用抗生素阿米卡星对3种菌都有抑制作用,而仅对腐败斯瓦尼菌和嗜麦芽窄食单胞菌敏感的是阿奇霉素。 相似文献
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为了解嗜水气单胞菌的肉鸭健康带毒、致病与耐药情况,对贵州省三穗县某肉鸭屠宰场临床健康肉鸭随机取样,进行嗜水气单胞菌的分离鉴定、毒力基因检测及耐药性分析。结果显示,分离菌具有嗜水气单胞菌典型的培养特征,菌落形态、菌体形态和生化特性均与嗜水气单胞菌相符;16 S rRNA基因序列系统进化树显示,该分离菌与嗜水气单胞菌聚为一支,同源性均>99%;动物回归试验显示,该分离菌对小鼠有较强的致病性;毒力基因PCR检测显示,该分离菌携带aer、hly、epa、act、alt和ahp等6种毒力基因;药敏试验结果显示,该分离菌对复方新诺明、磺胺嘧啶、环丙沙星和诺氟沙星等15种药物耐药;耐药基因PCR检测显示,该分离菌携带qnrB、Sul1和IntI1等3种耐药基因,与药敏试验表型相符。研究结果为嗜水气单胞菌的生物学特性研究及防控提供参考依据。 相似文献
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斑点叉尾鮰套肠病病原嗜水气单胞菌的分离与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
为确定疑似细菌感染的斑点叉尾鮰病原,本试验对临床病例进行细菌分离培养、生物化学鉴定和分子生物学鉴定、动物回归试验和病原菌药敏试验。结果显示,分离菌为革兰氏阴性杆菌,菌落形态和生化特性与嗜水气单胞菌相符;16S rDNA检测与测序分析结果进一步证实分离菌确为嗜水气单胞菌;动物回归试验显示,分离菌能引起与临床自然病例相似的症状;药敏试验显示,分离菌对喹诺酮类药物敏感,对青霉素类、头孢类药物产生耐药性。结果表明,疑似细菌感染斑点叉尾鮰病例为嗜水气单胞菌感染,可选择喹诺酮类药物进行病例的预防治疗。 相似文献
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蟹源益生芽孢杆菌的筛选 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验根据菌体对高温和低pH的耐受性、产酶能力及对病原菌的抑菌效果,对中华绒螯蟹肠道中的芽孢杆菌进行了筛选.结果表明,在筛选到的3株芽孢杆菌中,ESB3菌株抑制中华绒螯蟹病原菌嗜水气单胞菌CL99920菌株的能力最强,产蛋白酶和淀粉酶的能力也较好,在肉汤培养基初始pH 3.0的条件下培养2 h时,其存活率为(32.56±2.87)%,90 ℃水浴处理10 min存活率为(68.54±8.28)%;浓度低于1×108CFU/mL对中华绒螯蟹无毒害作用,1×107 CFU/mL的ESB3能提高中华绒螯蟹对嗜水气单胞菌感染的抵抗力;经形态学和生理生化反应鉴定,ESB3为地衣芽孢杆菌. 相似文献
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试验旨在研究蒲公英内生菌对由嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌引起鱼类疾病的作用效果,分为2部分:体外抑菌试验和攻毒试验.试验所用的嗜水气单胞菌菌液质量浓度为890万CFU/mL,迟缓爱德华氏菌菌液质量浓度为780万CFU/mL.体外抑菌试验结果显示,蒲公英内生菌对体外培养的2种细菌均有显著抑制效果,嗜水气单胞菌的抑菌圈直径为24.50 mm,对迟缓爱德华氏菌的抑菌圈直径为30.53 mm.攻毒试验以黄河鲤鱼为试验鱼,注射量为0.2 mL/尾.攻毒试验设5个处理组,即对照组、注射嗜水气单胞菌攻毒组、嗜水气单胞菌攻毒后投喂蒲公英内生菌饲料组、迟缓爱德华氏菌攻毒组和迟缓爱德华氏菌攻毒后投喂蒲公英内生菌饲料组.攻毒试验显示,迟缓爱德华氏菌攻毒后投喂含有蒲公英内生菌饲料组累积病死率显著高于未注射致病菌的对照组,低于注射致病菌投喂普通饲料的试验组.嗜水气单胞菌攻毒组与嗜水气单胞菌攻毒后投喂蒲公英内生菌饲料组试验鱼累计病死率无显著性差异. 相似文献
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【目的】筛选具有优良益生特性的鲤源乳酸菌作为水产养殖用微生态制剂候选菌株。【方法】以鲤鱼肠道内容物及黏膜为菌株的分离来源，采用MRS培养基进行菌株分离纯化，经16S rRNA测序鉴定后，对分离菌株生长特性、产酸能力、耐酸、耐胆盐、抑菌特性、药物敏感性及安全性等生物学特性进行分析。【结果】试验成功分离到1株植物乳杆菌，将其命名为YY001，该分离株在MRS培养基上菌落形态为圆形、表面光滑、边缘整齐、呈乳白色，革兰氏染色为阳性、无芽孢、两端钝圆的短小杆菌；4 h后进入对数期生长，12 h后生长达到稳定期；具有较强的产酸能力，产酸曲线显示，0~12 h pH迅速下降，培养16 h的菌液pH达3.8；在pH 3.0和0.3%胆盐的条件下具有一定耐受性；该分离株对水产常见致病菌柱状黄杆菌、维气氏单胞菌和嗜水气单胞菌均具抑菌效果，且对柱状黄杆菌的抑菌效果最显著，抑菌圈直径达34.19 mm；药物敏感性试验结果显示，分离株对卡那霉素、链霉素和万古霉素耐药；每天一次连续1周灌胃108CFU分离菌株对小鼠无毒害作用。【结论】本研究分离到的菌株YY001具有优良的生物学特性，可作为水产养殖用微生态制剂候选菌株，为后续制备鲤鱼用微生态制剂奠定基础。 相似文献
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Aeromonas hydrophila is a broad-host-range pathogen and its pathogenesis is multifactorial. A regulatory mechanism known as quorum sensing has been found to be involved in the regulation of virulence in many bacteria. In A. hydrophila the ahyR gene encodes LuxR-type response regulator. Here we describe the inactivation of the ahyR gene of A. hydrophila J-1 by the insertion of a DNA fragment containing a kanamycin resistance determinant and reintroduced by allelic exchange into the chromosome of A. hydrophila J-1 by means of the suicide plasmid pJP5603. Cytotoxic effects on EPC cells assay and LD(50) determinations in fish demonstrated that the ahyR mutant was highly attenuated relative to the wild-type strain. Compared with the parent strain, some characteristics, such as biochemical characters and outer membrane protein profiles, had changed. Some main virulent determinants could not be detected, including proteases, amylase, Dnase, hemolysin and S layer. This article confirmed the important function of AhyR in the pathogenesis of A. hydrophila J-1. 相似文献
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嗜温气单胞菌的鉴定及其外膜蛋白型研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从病鳖、鳗鱼体内分离到2株嗜温气单胞菌(TAh-3、EAs-1),经形态学观察、生理生化特性等鉴定,确定TAh-3为嗜水气单胞菌,EAs-1为温和气单胞菌。动物感染试验结果表明,TAh-3株为致病性嗜水气单胞菌,对鲫鱼的致死率100%,EAs-1株为非致病性温和气单胞菌。SDS-PAGE电泳结果显示,TAh-3株外膜蛋白(OMPs)型由7条蛋白带组成,其中1条主带大小为40.0kDa;EAs-1株OMPs型由8条蛋白带组成,其中2条主带大小为38.0kDa、45.0kDa。 相似文献
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一株鸡源地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其益生作用的初步研究 总被引：1，自引：1，他引：0
试验从健康AA肉鸡肠道分离出一株芽孢杆菌,对该菌株进行了培养特性观察、生化鉴定、16S rRNA序列分析,并研究了该菌株的安全性及其对鸡免疫器官的影响。结果表明,该菌株为地衣芽孢杆菌,命名为BL-C;该菌株对AA肉鸡不具有致病性,可显著加快雏鸡的生长、促进免疫器官的发育,为其进一步应用于畜禽养殖提供理论依据。 相似文献
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为探讨鲎素对嗜水气单胞菌的抑杀作用,采用最小抑菌浓度、AB染料、扫描电镜、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳等方法研究鲎素对嗜水气单胞菌的抗菌活性、杀菌率、胞内紫外物质泄露、膜负电荷数、外部形态结构及胞内基因组DNA的影响。结果表明,鲎素对嗜水气单胞菌的抗菌活性较其他细菌弱;2倍最低杀菌浓度(MBC)鲎素能在短时间内迅速杀死嗜水气单胞菌并导致胞内生物大分子泄漏;扫描电镜发现1倍MBC鲎素能导致轻微的壁膜破损及一些胞内物质渗出和粘连;流式细胞仪结果表明,1倍MBC鲎素能破坏细胞膜的完整性;AB染料测定表明鲎素处理后能改变膜负电荷数;琼脂糖凝胶电泳表明,鲎素能够与嗜水气单胞菌的基因组DNA发生作用,并呈浓度依赖关系,浓度越高对细菌基因组DNA损伤越大。鲎素对嗜水气单胞菌的抑菌活性弱,只有高浓度时才能短时间内导致胞内紫外吸收物质泄露、膜负电荷数发生改变及基因组DNA损伤。 相似文献
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致病性嗜水气单胞菌气溶素基因的克隆与高效表达 总被引：4，自引：0，他引：4
根据 Gen Bank中致病性嗜水气单胞菌气溶素 (Aer)基因的序列设计引物 ,以国内嗜水气单胞菌分离株为模板 ,扩增出 Aer基因的全长序列。经 T载体克隆和序列测定 ,证实克隆了国内分离株的不含信号肽的 Aer全长基因。将该基因以正确的读码框架与表达载体 p ET2 8b连接 ,经 IPTG诱导、SDS- PAGE检测 ,外源基因获得高效表达。诱导 4 h的培养物中 ,融合蛋白的表达占菌体总蛋白含量的 4 8.5 7%。 Western-印迹结果显示 ,利用纯化包涵体制备的兔抗血清可以很好地识别嗜水气单胞菌产生的天然毒素 ,而且天然毒素制备的抗体也能识别纯化的重组毒素 相似文献
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为了研究嗜水气单胞菌重组弹性蛋白酶的酶学性质,试验根据GenBank中的嗜水气单胞菌弹性蛋白酶基因ahyB设计1对含酶切位点的特异引物,以嗜水气单胞菌J-1(AhJ-1)株为模板,经PCR扩增得到不含信号肽的成熟弹性蛋白酶基因片段(787 bp),并与pMD18-T载体连接、测序,再用DNAStar软件分析。结果表明:该基因片段与豚鼠气单胞菌胞外蛋白酶同源性高达95%,与嗜水气单胞菌AG2株弹性蛋白酶ahyB基因同源性为92%,与铜绿假单胞菌LasB基因同源性为82%;将PCR产物连入表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21菌株中进行诱导表达,出现50 ku的融合表达蛋白,该表达产物纯化复性后表现出酶的活性。 相似文献
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Recent studies have revealed that the use of bdellovibrios is an alternative to control bacteriosis. However, no bdellovibrios are available against Aeromonas hydrophila infections in sturgeons. In the present study, a potential Bdellovibrio strain F16 was isolated from sturgeon gut samples, using a sturgeon-pathogenic A. hydrophila as the prey bacterium. It was initially identified as a Bdellovibrio strain using morphological characteristics and specific PCR amplification, and confirmed to be Bdellovibrio sp. strain ETB (GenBank Accession No. DQ302728) and Bdellovibrio bacteriovorus strain SRA9 (GenBank Accession No. AF263833) by phylogenetic analysis. In addition, it was shown to be safe for mammalians and sturgeons, had a wide prey range, and exhibited significant bacteriolytic effects on the pathogenic A. hydrophila. To the best of our knowledge, this is the first report on a promising gut Bdellovibrio strain against pathogenic A. hydrophila. 相似文献
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The objective of this study was to evaluate of the growth performance, serum biochemical indices, liver antioxidant parameters and ability of anti-infection with Aeromonas hydrophila by adding the fermented Chinese medicine by Bacillus Subtilis to the carp fish feed, and to find out the appropriate supplemental level of fermented Chinese medicine in diets. Carp fingerling with an initial body weight of (35±0.5) g were set up to 6 experimental diets supplemented with 0 (control group), 0.1‰, 0.5‰, 1‰, 2‰ and 3‰ fermented Chinese medicine for 56 days, respectively. Each group had 30 fish and set up 3 repetitions. After the feeding trail,the fish were challenged with Aeromonas hydrophila to calculate the relative percentage survival (RPS).The results showed as follows:Supplementing fermented traditional Chinese medicine by Bacillus subtilis, the weight gain rate (WGR), specific growth rate (SGR), condition factor (CF), the activities of lysozyme (LSZ), complement 3 (C3),total protein (TP),total anti-oxidation capacity (T-AOC),total superoxide dismutase (T-SOD) and catalase (CAT) in serum of common carp were enhanced at different degrees, while the feed coefficient (FCR)and malondialdehyde (MDA) in serum were declined at different degrees.When the fermented Chinese medicine supplemental levels were 2‰ and 3‰,the effects were significant (P<0.05)(except for C3, ALP and Cr).The experimental results of the virulence of common carp infected with pathogen Aeromonas hydrophila showed that,the fermented herbal could obviously improve the ability of anti-infection, the immune protective rate of the group with 2‰, 3‰ doses of the fermented Chinese medicine could reach 77.23% and 74.63%, respectively. From what had been discussed above, the group with 2‰ and 3‰ doses of the fermented Chinese medicine had significant effect on the growth performance, serum biochemical indices, liver antioxidant parameters and Aeromonas hydrophila anti-infection ability. Considering the cost of adding fermented Chinese medicine, the recommendations for the best additive quantity was 2‰. 相似文献