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1.
应用PAPD方法对鸡败血霉形体DNA多态性的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法,通过筛选的５个随机引物（ＯＰＨ－０２,ＯＰＨ－０５,ＯＰＨ－０７,ＯＰＨ－１３,ＯＰＧ－１６）,对１４株鸡败血霉形体（ＭＧ）国际标准株和国内分离株进行了ＤＮＡ多态性研究。结果表明,５个引物共产生２１种条带,其中有３个条带分别为２个菌株所特有,扩增产物片段的长度在１５０～４５００ｂｐ之间,所有菌株均有１条共同条带,以ＯＰＨ－０５扩增产物的多态性最丰富。根据样品ＤＮＡ所获得的菌株间相似性指数表明,Ｄ９６０３与Ｄ９６０７相似指数最高,Ｓ６,Ｋ３９１３和Ｄ９６０４三者相互间相似性指数最低。提示ＲＡＰＤ方法可用于霉形体遗传标记的分析。 相似文献
2.
聂庆华 《江西畜牧兽医杂志》1999,(6):12-13
本试验根据Ｌａｍｂ等［１］报道的鸡生长激素基因序列，设计合成２对特异性引物ＰＭ３和ＰＭＰＳ１，它们的碱基序列分别是ＰＭ３ＦＯＲ５′－ａｔｃｃｃｃａｇｇｃａａａｃａｔｃｃｔｃ－３′ＲＥＶ５′－ｃｃｔｃｇａｃａｔｃｃａｇｃｔｃａｃａｔ－３′ＰＭＰＳ１ＦＯＲ５′－ｃｔａａａｇｇａｃｃｔｇｇａａｇａａｇｇｇ－３′ＲＥＶ５′－ａａｃｔｔｇｔｃｇｔａｇｇｔｇｇｇｔｃｔｇ－３′。通过ＰＣＲ反应从鸡基因组中扩增出含有ＧＨ基因内含子１和４的片段，再用ＭＳＰ１内切酶对产物做ＲＦＬＰｓ分析。由于特异性ＰＣＲ的条件要… 相似文献
3.
PCR扩增猪ESR基因一个外显子DNA片段的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
根据文献资料，参考人，鸡，鼠等动物的ＤＮＡ序列，结合本研究的需要，我们设计了一对引物，其上游正向引物中Ｐ１为５′－ＧＡＴＡＣＧＡＡＡＡＧＡＣＣＧＣＣＧＡＧ－３′（对应于鼠ＥＳＲ基因第４外显子１０１０－１０２９）下游反向引物Ｐ２为５′－ＧＣＡＣＴＣＴＣＴＴＴＧＣＣＣＡＧＴＴＧ－３′（对应于鼠ＥＳＲ的基因第４外显子１３２２－１３４１）利用该引物对，按照首轮反应９４℃５分钟，５８℃１分钟，７２℃１分钟， 相似文献
4.
作者进行了双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病的试验，试验鸡共５０００只，设９个治疗组，１个对照组，每组５００只ＡＡ肉鸡。试验组鸡群于１～７天，２２～２８天，分别选用敏感抗菌素氟哌酸（ＦＰＡ，５０ＰＰＭ），强力霉素（ＤＯＣ。７５ＰＰＭ，），氯霉素（ＣＭＴ，７５０ＰＰＭ）进行双疗程治疗，取得了满意的效果。ＤＯＣ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＤＯＣ、ＤＯＣ－ＦＰＡ、ＦＰＡ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＦＰＡ、ＤＯＣ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＦＰＡ、ＣＭＴ－ＣＭＴ各试验组的存活率分别为９２．８％、８７．６％、９７．２％、９６．４％、９５．８％、８９．６％、９４．６％、９６．２％、８８．４％。对照组的存活率７９．４％。 相似文献
5.
对湖北省某鸡场１１０只蛋进行了鸡毒支原体（ＭＧ）、滑液支原体（ＭＳ）血清平板凝集试验（ＳＰＡ）具有明显临床症状的鸡（眶下窦炎，呼吸困难，罗音等）均为ＭＧ－ＳＰＡ阳性（５４／５４）同舍６０只无症状鸡中有４６只为ＭＧ－ＳＰＡ阳性（７６．６％）对４只病鸡及４只ＭＧ－ＳＰＡ阴性健康鸡进行了支原体及细菌的分离鉴定。结果从３只病鸡中分离到鸡毒支原体，从２只病鸡分离到大肠杆菌Ｏ２血清型，证明为鸡毒支原体与大肠杆 相似文献
6.
新城疫V4株弱毒变种的选育 总被引：1，自引：0，他引：1
应用有限稀释法通过ＳＰＦ鸡胚传代，从新城疫Ｖ２弱毒中克隆出一个变各，即２０代以后的继代毒，命名为新城疫Ｖ４克隆２０弱毒株，（ＮＤ－Ｖ４Ｃ２０）。毒以１０＾－１－１０＾１３×０．１ｍｌ接种１０日龄ＳＰＦ鸡胚尿囊腔１５０小时内，鸡胚极少死亡。每个滴度５个胚有尿液均可凝集鸡红血球。第１０代和第２０代的每个滴度５个胚有的混合尿液以１０＾－６×０．５ｍｌ一次饮水免疫鸡，即能引起ＨＩ抗体反应，也能抵抗新城疫强 相似文献
7.
许生成 《青海畜牧兽医杂志》1998,28(2):3-4
应用噻唑蓝法研究了ＰＨＡ－Ｐ引起兔外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）转化的最适条件,培养时间为４８ｈ,ＰＢＭＣ密度为５×１０１２／Ｌ,ＰＨＡ－Ｐ的终浓度为０．５ｍｇ％。并测定了在此最适条件下的吸光值（ＯＤ）,为０．２７６±０．１４２。 相似文献
8.
禽病原性大肠杆菌6种血清型分离株外膜蛋白型的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
从病鸡中分离的６ 种血清型（ Ｏ２、 Ｏ４６、 Ｏ１８、 Ｏ１２１、 Ｏ７６、 Ｏ１３１）及５ 种标准血清型（ Ｏ１、 Ｏ１５、 Ｏ３５、 Ｏ３６、 Ｏ７８）大肠杆菌中提取外膜蛋白（ Ｏｕｔｅｒ ｍ ｅｍ ｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ），经 Ｓ Ｄ Ｓ－ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 分析表明，分离株 Ｏ７６、 Ｏ１３１及标准株 Ｏ１、 Ｏ３５的外膜蛋白型由２ 条带组成，为 Ｏ Ｍ Ｐ－ １ 型；分离株 Ｏ２、 Ｏ４６、 Ｏ１８、 Ｏ１２１和标准株 Ｏ１５、 Ｏ３６、 Ｏ７８的外膜蛋白型由３ 条带组成，为 Ｏ Ｍ Ｐ－ ２ 型，结果表明，不同血清型菌株之间有相同的 Ｏ Ｍ Ｐ型。 相似文献
9.
传染性法氏囊病病毒A节段编码序列cDNA原克隆和序列分析 总被引：2，自引：0，他引：2
对反转录－聚合酶链反应扩增克隆的传染性法氏囊病病毒超强毒Ｈａｒｂｉｎ毒株的Ａ节段编码序列ｃＤＮＡ基因进行了核苷酸序列分析。结果，克隆的Ａ节段基因共３１０ｂｐ，包括两个完整的阅读框架ＯＲＦＡ１和ＯＲＦＡ２分别编码１０１２氨基酸的前体蛋白ＶＰ２－４－３和１４５氨基酸的ＶＰ５，两者有部分重叠。 相似文献
10.
采用鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病毒（ＩＢＤＶ－２５１２）研制了检测ＩＢＯＶ抗体的ＥＬＩＳＡ试剂盒。抗原最佳包被浓度为５．１２μｇ／ｍｌ，被检血清最佳稀释度为１：２００，酶标结合物最佳工作浓度１：１０００．本试剂盒与美国ＫＰＩＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ试剂盒比较，结果敏感性、特异性、重复性均达到美国同类产品水平，且易于操作．在４℃可稳定保存６个月、对北京地区４个非免疫鸡群的１０３只鸡测得其阳性率为５４％，对４５只ＳＰＦ鸡的阳性率为０％。 相似文献
11.
乌骨鸡种群遗传结构的RAPD分析 总被引：10，自引：0，他引：10
利用RAPD技术对3个品系的乌骨鸡鸡种群体遗传结构进行分析,筛选的5个引物对3个品系的乌骨鸡均能产生特异性的条带,获得的多态性可用于乌骨鸡鸡种的遗传分析。品种间相似指数:两个白丝毛品系间(Ⅰ系和Ⅱ系)最高,黑丝毛乌骨鸡(Ⅲ系)与两个白丝毛品系间均较低,这可能与其品种间的外貌特征以及品种的来源有关。 相似文献
12.
Rincón G D'Angelo M Gagliardi R Kelly L Llambí S Postiglioni A 《Research in veterinary science》2000,69(2):171-174
Uruguayan Creole cattle inhabit areas that cannot sustain conventional farming. They have adapted to fragile environments and are influenced only by natural selection. In this study, random amplified polymorphic DNA (RAPD) and microsatellite (MS) markers were used to analyse Creole cattle genome polymorphism. A comparative analysis using the RAPD technique was performed in pooled DNA of three cattle breeds (Holstein Friesian, Creole and Hereford) in order to evaluate their amplification patterns. A primary screening of RAPD primers allowed us to select and use those with higher percentage of GC base composition. A total of 215 loci ranging between 300 and 2500 bp were amplified. Bandsharing frequency (BSF) among breeds showed that less related fingerprints were observed between Creole and Hereford cattle (0.77), while the highest similarity frequency corresponded to Holstein Friesian compared to Hereford (0.81). Specific RAPD bands were identified in the three DNA pools and they were tested in every individual of each breed. It may be possible to isolate and sequence these bands to create breed-specific molecular markers. The identification of multiple alleles of the MSCYP 21 in Creole cattle with an heterozygosity of He = 0.846 supported the variability of this genetic resource. The use of molecular markers such as RAPD s and microsatellites is proposed to establish genetic distance among American Creole cattle and possibly related ancestral Iberian breeds. 相似文献
13.
云南4个马品种的随机扩增多态DNA（RAPD）分析 总被引：6，自引：0，他引：6
本文利用随机扩增多态ＤＮＡ技术研究了云南４个马品种４８个个体的遗传变异和系统发育关系。在所使用的２５个引种中，有２２个引物扩增出多态谱带。 相似文献
14.
Ahlawat SP Sunder J Kundu A Chatterjee RN Rai RB Kumar B Senani S Saha SK Yadav SP 《British poultry science》2004,45(2):194-200
1. The present study was conducted to estimate genetic relatedness among Nicobari fowls (Brown, Black and White) and an exotic bird (White Leghorn) using random amplified polymorphic DNA (RAPD) polymorphism. 2. A total of 25 decamer primers were screened among all the breeds of which 24 primers amplified the genomic DNA, generating 2000 to 200 bp bands. Ten primers generated reproducible and distinct RAPD profiles and were used for further analysis. 3. A total of 94 bands were amplified and 30 polymorphic bands (32%) were produced. The number of polymorphic loci ranged from 1 to 5 with an average of 3.0. 4. Among the native breeds Brown Nicobari showed higher genetic similarity (0.85) than Black Nicobari (0.80) and White Nicobari fowl (0.82). 5. Brown Nicobari showed high genetic similarity with Black Nicobari (0.87 +/- 0.029); least similarity was between White Nicobari and White Leghorn (0.77 +/- 0.028). 6. The RAPD profile of all Nicobari fowls on amplification with the primers PBG5 and PBA12 showed specific bands of molecular size 1050 and 785 bp, respectively. 7. The native breeds showed the least genetic distance with each other while White Leghorn appeared to be most distant from the native breeds. 相似文献
15.
A. P. Apostolidis Z. Mamuris E. Karkavelia & T. Alifakiotis 《Zeitschrift für Tierzüchtung und Züchtungsbiologie》2001,118(1):47-56
To assess genetic markers able to distinguish between five Greek breeds of horses, the random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique was used. A total of 40 primers were initially screened in all breeds to identify primers that consistently revealed well-amplified, polymorphic bands. Despite the variability that was found within breeds, no specific RAPD marker for the discrimination of the breeds was detected. This is probably due to the extensive cross-breeding that has taken place over the years, resulting in a mixing of breeds. The high phenotypic divergence of the pony of Skyros from all the other Greek breeds of horses could be explained in terms of micro-evolutionary processes, such as natural selection owing to differential fitness. In addition, to determine the genetic affinities between breeds, all samples were screened with five primers. These primers produced a total of 93 bands, 51 of which were polymorphic. Data analysis for genetic polymorphism revealed a degree of divergence between breeds. According to the discriminant analysis (DA) classification, 100% of the individuals examined in this study could be classified correctly into their breeds. The results of this study show that RAPDs could be a powerful tool for the classification testing of individual horses, as well as for the determination of the genetic variation found among breeds, which is important for a proper management policy designed to protect this species. 相似文献
16.
为保护和开发地方品种猪的遗传资源,采用随机扩增多态DNA(RAPD)法分析皖北猪个体之间的遗传多样性。试验方案采用L(35)正交法,优化RAPD反应条件;筛选7条特异引物对皖北猪进行RAPD分析,计算带谱相似率、平均杂合度和遗传相似度,UPGMA法进行聚类分析。试验结果表明,优化的皖北猪RAPD反应体系为Mg2+浓度3 mmol/L,Taq酶1.50 U,dNTPs浓度0.40 mmol/L,引物浓度0.50μmol/L,模板浓度1 mg/L。皖北猪群处于亲缘关系不清的遗传非均衡状态。 相似文献
17.
4个绵羊品种随机扩增多态DNA分析 总被引：10，自引：0，他引：10
本研究利用RAPD技术研究了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊 4个绵羊品种的亲缘关系。从 10 0条引物中筛选出的 16条引物 ,共扩增出 14 6条带 ,其中 94条表现出多态性 ,占 6 4 .4 %。它们间遗传距离较小 ,小尾寒羊与大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊的遗传距离分别为 0 .0 6 4 9、0 .0 6 73和 0 .10 2 8,用UPGMA法构建了树状聚类图。结果显示 ,小尾寒羊、大尾寒羊和洼地绵羊首先聚一起 ,说明它们亲缘关系较近 ,起源于共同的原始祖先。据推测滩羊也起源于蒙古羊 ,但它生活在陕西、宁夏等省 ,与山东环境条件差别较大 ,在自然选择的作用下发生了变异 ,这可能是滩羊与其它绵羊间遗传距离大的主要原因。在本研究过程中还发现了各品种的分子标记 相似文献
18.
随机扩增多态DNA（RAPD）技术在鹅育种上的应用 总被引：10，自引：0，他引：10
本文用4种引物（OPH5、OPH13、OPH16和OPF4）对隆昌鹅、太湖鹅和新太湖鹅进行基因组DNA、RAPD分析。结果表明：三种鹅都有特异性的条带,扩增DNA条带都表现为多态性,条带数为3-12条,大小范围在0.36-0.38kb之间,多态频率为72.14%;RAPD标记可作为一种辅助手段来比较鹅群体的遗传变异性,太湖鹅遗传变异性大于隆昌鹅;OPF-04很可能用作区分隆昌鹅与太湖鹅的标记性引物。 相似文献
19.
利用11对AFLP引物组合,检测了哈萨克羊、阿勒泰羊、巴什拜羊池DNA遗传变异,构建了各品种的AFLP DNA 指纹图谱,根据AFLP分析结果,统计了每个引物组合在各品种中检测到的多态性条带,计算了3个品种的遗传相似系数,并据此构建了UPGMA聚类关系图,分析了它们的遗传关系.结果表明:11对AFLP引物组合在3个地方绵羊品种中共检测到310条带,平均每个引物组合产生28.18条带,变化范围在25～34条,其中多态性条带32条,占扩增总带教的10.32%,每对引物平均扩增多态性带2.909条.品种间的遗传相似系数以哈萨克绵羊与阿勒泰绵羊的最高(O.699),哈萨克绵羊与巴什拜绵羊最小(0.592),聚类结果与这些羊的育成史、分化及地理分布一致. 相似文献
20.
淮南猪遗传特异性的RAPD分析 总被引：1，自引：1，他引：0
试验用150个10碱基随机引物对引入品种杜洛克猪、长白猪、大约克猪及河南地方品种淮南猪4个猪种基因组池DNA进行了RAPD分析。电泳检测结果发现,其中72个引物扩增出明显的多态性条带,共检测到911条扩增片段,其中多态性片段462条,占50.71%。统计分析结果表明,大约克猪与长白猪之间的遗传距离指数为0.0064,遗传关系最近;淮南猪与杜洛克猪、大约克猪遗传距离指数相近,分别为0.0068、0.0069,遗传关系较近;淮南猪与长白猪遗传距离指数为0.0072,遗传关系最远。结果显示,河南省地方品种淮南猪与其他引入品种之间有遗传的相似性,也存在差异,同时也证明了RAPD技术可以作为分子标记,很好地检测猪种群内的遗传变异及区分不同猪种的遗传检测方法。 相似文献