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琼脂扩散试验是临床中病原诊断和抗体效价测定的主要方法之一,该方法简洁、快速,在临床中应用广泛。但是该试验容易受到多种因素的影响而导致试验特异性、敏感性、精确性以及结果判断的不准确。本文就抗原、抗体性质、琼脂板以及反应条件等影响因素对琼脂扩散试验的影响进行了逐一分析。 相似文献
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用NDV LaSota株接种鸡胚增殖病毒,收获含毒尿囊液,经灭活、透析和浓缩研制成琼脂扩散(AGP)试验抗原。这种抗原具有特异性强、稳定性好和不散毒等优点。经多方面的试验和对976例血清样品同步进行HI和AGP试验检测以及现地应用,证明本方法简易、实用,特别适用于大量血清样品的检测和流行病学群体的定性诊断。 相似文献
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制粒温度对酶活性的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
通过试验测定了不同制粒温度对纤维素酶、细菌淀粉酶、真菌淀粉酶和戊聚糖酶的影响。试验样品为含有不同酶制剂的大麦—小麦—大豆饼型饲料，压模直径为２．５ｍｍ，制粒温度分别为６０、７０、８０、９０和１００℃。酶分析通过可溶性底物试验和测定酶降低饲粮粘度的能力来进行。可溶性底物试验结果表明，纤维素酶、真菌淀粉酶和戊聚糖酶在制粒温度达到８０℃时仍维持其活性，而细菌淀粉酶在制粒温度高达９０℃时仍维持其活性；戊聚糖酶对饲粮粘度影响很小，甚至无影响；纤维素酶在不同制粒温度下均可降低饲粮粘度。 相似文献
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本文对自制的8种鸡传染性喉气管炎琼脂扩散抗原和市售抗原的特异性进行了对比试验,筛选出了两种特异性强的琼脂扩散抗原,并用这种抗原检测16份人工感染后不同时期采集的鸡血清和在野外采集的196份血清,其结果与酶联免疫吸附试验的符合率为83.33%。本文还确定了 相似文献
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调查结果表明，被调查的郑州地区８个父母代种鸡场，有５个（６２５％）为鸡白血病感染阳性场。在调查的８个品种种鸡中，检出的５个阳性品种均为进口，（艾维菌、ＡＡ、雅发、海兰、罗曼）种鸡。应用羽髓琼脂扩散试验（ＦＭＡＧＤＴ）和卵清琼脂扩散试验（ＥＡＡＧＤＴ）进行对比检测，结果证明，ＦＭＡＧＤＴ检出阳性率为７６％～２０％；而ＥＡＡＧＤＴ则为６３％～１６６％，前者检出的效果高于后者。笔者建议，在兽医部门监督下，使用ＦＭＡＧＤＴ对郑州地区种鸡场进行一次鸡白血病的检疫，淘汰阳性鸡群，以净化种鸡群。 相似文献
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本试验建立了用免疫琼脂扩散试验(AGP)检测鸡呼肠孤病毒(CRV)抗体的方法,并对南京某鸡场鸡群CRV抗体的分布进行了调查,结果表明该鸡场CRV抗体检出率高达51.8%,其中祖代鸡与父母代种鸡的阳性率均为100%,而雏鸡为0,其余鸡介于两者之间。试验结果显示AGP不适宜于检查低滴度的抗体,但作为检测鸡群的群抗体水平是易于推广应用的。 相似文献
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应用胶体金免疫层析法(GICA)、血凝抑制试验(HI)和琼脂扩散试验(AGID)三种方法同时检测所采集的342份鸡血清样品,并对三者的检测结果进行比较。结果发现,HI试验的阳性检出率最高(78.65%),其次为GICA(69.88%)和AGID试验(59.36%);GICA与HI的符合率为89.47%,与AGID的符合率为84.21%,HI与AGID的符合率为80.70%。结果表明,GICA比AGID试验更为敏感,且与HI试验有较好的符合率,可用于禽流感的血清学监测。 相似文献
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猪流感病毒核蛋白基因的原核表达及其在诊断中的初步应用 总被引：11，自引：3，他引：11
根据GenBank中A/Swine/Hong Kong/126/82(H3N2)株猪流感病毒(SIV)NP基因核苷酸序列设计合成一对引物,经RT-PCR扩增了我国SIV分离株A/Swine/Heilongjiang/3/2000(H3N2)的核蛋白(NP)基因.将扩增所得NP基因克隆于pMD18-T载体,酶切鉴定后对其序列分析表明NP基因与香港分离株同源性高达93.8%,然后定向亚克隆NP基因于原核表达载体pET30(a)的多克隆位点中,经酶切鉴定后,将含有NP基因的重组质粒命名为pET-NP.用pET-NP转化受体菌BL21,用诱导剂IPTG以不同浓度进行诱导,并在不同诱导时间收集样品.经SDS-PAGE电泳分析证实NP基因获得了表达,并在终浓度为1mM的IPTG诱导下,6 h其表达量达到高峰,经Western blot分析证实表达的重组核蛋白具有反应活性,大小约为60kD.用表达产物作琼脂扩散试验,结果表明表达产物与SIV抗血清可形成清晰的反应沉淀线,而与其它9种猪病原阳性血清不发生反应.正常菌体蛋白与SIV阳性血清也不发生反应.通过对40份送检血清样品的检测结果显示其与HI试验的相符率高达95%以上.试验证明利用原核表达系统制备的重组核蛋白作为诊断用抗原,不仅制备过程简单而且所建立的琼扩诊断方法特异、快速、简便,其灵敏度也能满足现地的使用要求.目前正在进行现地的中试试验. 相似文献
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应用琼脂扩散试验和间接血凝试验检测猪瘟免疫抗体,1990年在我州黄平、锦屏两县进行,现将试验结果报告如下: 材料和方法一、材料: (一)抗原:IHA反应抗原由成都药械厂提供;AGP反应抗原由河北省兽医防检站提供。 (二)血清:被检血清经免疫注射猪瘟疫苗的猪群中采取(均由黄平和锦屏两县提供)。 相似文献
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一种敏感的禽流感病毒快速定型双扩散法 总被引：11，自引：3，他引：8
一种敏感的禽流感病毒快速定型双扩散法赵增连陈溥言林祥梅蔡宝祥（南京农业大学动物医学院，南京２１００９５）目前，关于禽流感病毒（ＡＩＶ）的诊断、鉴定方法很多，如，病毒中和试验（ＶＮ）、酶联免疫吸附技术（ＥＬＩＳＡ）、抗原捕捉酶联免疫吸附试验（ＤＡＳ－Ｅ... 相似文献
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在WTO推荐的纸片扩散法(K-B法)的基础上,建立对不明成分和含量的抗菌药物复方制剂的药敏试验方法,为抗菌药物临床选择提供科学依据,并便于在临床兽医中推广应用。试验设4组(每组6个重复),分别以浓度为1/2.5a(a为产品使用说明指导的容水量(L/g)),1/5a,1/10a和1/20a(g/mL)的复方抗菌药物溶液制备药敏纸片。受试菌为2株禽致病性大肠杆菌。试验结果表明:1/5a组制备的药敏纸片(药物剂量(mg/kg)为药敏片含量的250倍),药敏结果更为稳定,不同药物间抑菌圈直径平均数差异也较大,可为兽医临床抗菌药物对比选择提供较好的量化依据;标示成分及含量相同的不同抗菌制剂(甚至同一厂家生产)的药敏试验结果差异极显著(P0.01),说明主成分相同的不同抗菌制剂对同一株病菌的抗菌效力差异很大,也进一步证明用药敏试验结果指导临床选择用药的科学性和必要性。 相似文献
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<正> 琼脂扩散试验(Agar diffusion Test,简称AD)。也称免疫扩散试验。它的基本原理是抗原——抗体分子在含有电解质的琼脂中向四周自由扩散,通常是从高浓度向低浓度游动,当抗原——抗体分子相遇时,如出现沉淀线(抗原——抗体的特异结合物)可说明两者对应。因此,本法可以鉴定抗原,也可以鉴 相似文献
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猪胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌的鉴别诊断及血清型鉴定 总被引：18，自引：0，他引：18
利用PCR技术、琼脂扩散试验、糖发酵试验和间接血凝试验(IHA)对野外分离到的可疑猪胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌进行了诊断和血清型鉴定.PCR鉴定分离物HS1580为副猪嗜血杆菌,分离物HS1582为猪胸膜肺炎放线杆菌;生化试验表明分离物HS1581和HS1582为猪胸膜肺炎放线杆菌;血清型鉴定分离物HS1580不属于被检的14个血清型之列,HS1581为App血清15型,HS1582为App血清7型.试验结果表明,综合使用PCR等技术可快速、准确地对这两种传染性细菌进行鉴别诊断和血清型鉴定. 相似文献
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为便于快速、准确检测猪圆环病毒2型(PCV2),减少其对我国养猪业的威胁,建立了PCV2 Cap蛋白琼脂扩散试验(AGP)检测方法。应用表达制备好的PCV2 Cap蛋白,与弗氏佐剂乳化后免疫家兔,制备多克隆抗体并进行抗体效价测定。确定AGP最佳工作条件,并进行抗体特异性、稳定性及符合率试验。结果显示:制备的多克隆抗体ELISA效价可达1:12 800,AGP效价可达1:32,表明其具有良好的特异性、稳定性;对20份PCV2 Cap蛋白抗原进行检测,发现其结果与应用标准猪血清抗体检测结果符合率为100%。结果表明,制备的抗PCV2 Cap蛋白多克隆抗体可替代标准抗体,用于PCV2 Cap蛋白的AGP试验检测。本研究为PCV2检测以及后续的免疫学特性研究提供了技术支撑。 相似文献
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用美国NCCLS规定的纸片扩散法药敏试验,对30株来自德昂乡3个试验点的屠宰牦牛大肠杆菌进行了耐药性观察。结果：30株大肠菌对环丙沙星、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、氯霉素,链霉素的耐药率均为O％,痢特灵的中介率为6．7％,氨苄青霉素的耐药率及中介率均为10％,表明抗微生物药使用较少的牦牛体内大肠杆菌耐药性的产生也较少。 相似文献
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为了研究在特定条件下经体外培养的肌旋毛虫幼虫排泄／分泌物（ES）抗原的特性,通过体外培养将所收集到的ES抗原经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）、琼脂扩散试验进行分析。结果经SDS—PAGE分析出现了比较明显的2条蛋白带,其分子量为45ku、49ku;经琼脂扩散试验ES抗原与犬旋毛虫阳性血清出现了明显清晰的沉淀线,而与犬蛔虫阳性血清、犬绦虫阳性血清之间未出现沉淀线,ES抗原具有较强的特异性。表明研究结果为开展ES抗原的分子生物学的研究、分子生物学基因工程苗的研制打下了良好的基础。 相似文献