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1.
《中国畜牧兽医》2020,(5)
为探究猪源大肠杆菌转座子及整合子携带类型与其多重耐药相关性,试验采集贵州省12个规模化养猪场猪肛门拭子,分离鉴定到259株大肠杆菌。采用微量肉汤稀释法测定分离菌株对7类(16种)抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)值,并用PCR方法检测转座子及整合子的携带情况。结果发现,受试菌株对7类(16种)抗菌药物呈现出不同程度的耐药,对大观霉素、庆大霉素、四环素为高度耐药,MIC_(90)的耐药倍数为32倍;对亚胺培南、多黏菌素B表现敏感,MIC_(90)的耐药倍数为2倍,其他药物的耐药倍数介于二者之间。受试菌株多重耐药最高达7重,2重以上耐药率达到100%,多重耐药谱型共计14种,以β-内酰胺类+氨基糖苷类+四环素类+酰胺醇类+磺胺类+氟喹诺酮类、β-内酰胺类+氨基糖苷类+四环素类+酰胺醇类+磺胺类+氟喹诺酮类+多肽类为主,占56.97%。受试菌株转座子和整合子检出率较高,转座子及整合子表型共计20种,其中IScp1+IS26+tnpA+tnp513+intI1和IS26+tnpA+tnp513+intI1的组合类型占比最多,分别为48.48%和26.06%。本试验结果表明,插入元件IScp1与β-内酰胺类药物耐药呈显著或极显著相关(P0.05,P0.01),插入元件IS26与氨苄西林耐药相关性极显著(P0.01),与磺胺异■唑耐药相关性显著(P0.05);整合子intI1与氨苄西林耐药相关性极显著(P0.01);intI2与头孢他啶耐药相关性极显著(P0.01),与头孢噻呋、恩诺沙星、亚胺培南耐药相关性显著(P0.05);IScp1+IS26+tnpA+tnp513+intI1组合类型与复方新诺明耐药相关性极显著(P0.01);IS26+tnpA+tnp513+intI1组合类型与复方新诺明耐药相关性显著(P0.05),与头孢噻呋耐药相关性极显著(P0.01),但与庆大霉素耐药呈负相关关系(P0.05)。综上,受试菌株对β-内酰胺类、氟喹诺酮类、磺胺类、氨基糖苷类的多重耐药与转座子及整合子携带类型呈显著或极显著相关。 相似文献
2.
为了解鸡源性沙门菌分离株多重耐药情况与转座子及耐药基因的携带关系,采用K-B纸片法对23株鸡源性沙门菌分离菌株进行10种抗菌药物敏感试验;应用PCR对分离菌株进行转座子及耐药基因检测。结果显示,23株分离株中有10株对2种以上抗菌药物耐药,属于多重耐药株,其中四环素-氨苄西林-甲氧苄啶-诺氟沙星-庆大霉素-环丙沙星是主要多重耐药谱;10株多重耐药菌中有8株分别携带不同种的转座子(tnpA、tn1721、tnp513、IS26),其中以转座子tnpA、tn1721和IS26的检出率最高,耐药基因中以blatem-1、tetA和tetB的检出率最高,携带转座子多的菌株中耐药基因检出率较高且耐药谱广。结果表明沙门菌多重耐药性与转座子的携带之间关系密切,耐药表型与耐药基因检测结果基本一致。 相似文献
3.
为了解鸡源多重耐药大肠杆菌中可移动遗传元件的存在情况,采用KB法对57株鸡源大肠杆菌进行了12种药物的敏感性试验,采用PCR方法检测了这些菌株的接合性质粒、转座子和整合子共10种可移动遗传元件的存在情况。结果显示,57株鸡源大肠杆菌均为多重耐药大肠杆菌,共检出traA、trbC、ISEcp1、IS26、tnpA、tnp513、intⅠ和intⅡ8种可移动遗传元件,每株多重耐药大肠杆菌均可检出可移动遗传元件,且大肠杆菌耐药种类越多,可移动遗传元件的检出也越多,同时携带相同可移动元件的多重耐药大肠杆菌也会表现出不同程度的多重耐药。 相似文献
4.
旨在揭示金黄色葡萄球菌针对β-内酰胺类抗生素可能存在细胞壁增厚的耐药机制。2016-2018年间，采集宁夏地区部分奶牛养殖场临床及亚临床型乳腺炎的乳样，通过显色培养基鉴别、镜检及PCR方法，分离鉴定牛乳源金黄色葡萄球菌；利用微量肉汤稀释法测定细菌对14种抗菌药物的耐药性，了解本地区金黄色葡萄球菌的耐药率及多重耐药情况；通过qRT-PCR方法检测细胞壁增厚相关的pbpB、murG、glmU、atlR基因转录丰度，并结合透射电镜进行形态观察，以确定增厚及发生原因。结果显示，分离鉴定出261株牛乳源金黄色葡萄球菌，其中包括9株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）。药敏试验结果显示，金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素具有较高的耐药率，其中氨苄西林为79.69%，青霉素为78.54%。多重耐药情况是以3、7和8重耐药的菌株居多；其中1株耐药种数达14种之多。qRT-PCR结果表明，4种相关基因的转录丰度均极显著上调（P<0.001或P<0.01）。透射电镜观察发现，甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（methicillin sensitive Staphylococcus aureus，MSSA）JY21菌株的细胞壁在64和128 μg·mL-1的青霉素浓度下，较对照组均极显著增厚（P<0.001），并可见细胞壁表面粗糙，有结节状凸起；但药物浓度从64 μg·mL-1升高至128 μg·mL-1细胞壁不再显著增厚（P>0.05）。MRSA WLD10菌株细胞壁未出现明显增厚（P>0.05）。综上所述，本地区牛乳源金黄色葡萄球菌针对β-内酰胺类抗生素，存在细胞壁增厚的耐药机制；增厚的原因主要是肽聚糖的过度合成及细胞自溶的减少。与MSSA JY21菌株相比，细胞壁增厚并非MRSA WLD10重要的耐药机制。 相似文献
5.
试验旨在研究雌激素对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）凋亡及生长周期的影响。通过添加MAPK/ERK信号通路阻断剂探索雌激素调控BMECs凋亡及生长周期具体的作用机制,采用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化情况,实时荧光定量PCR检测Bcl-2、Caspase3及CyclinD1基因mRNA的表达丰度。结果显示,对照组BMECs凋亡率极显著低于BMECs+PD98059、BMECs+E2+PD98059组（P<0.01）,Bcl-2 mRNA表达丰度极显著高于BMECs+PD98059组（P<0.01）,Caspase3 mRNA表达丰度显著低于BMECs+PD98059组（P<0.05）;对照组细胞比例在G1期显著高于BMECs+E2组（P<0.05）,极显著低于BMECs+E2+PD98059组（P<0.01）,S期细胞比例极显著高于BMECs+PD98059、BMECs+E2+PD98059组（P<0.01）,G2期细胞比例极显著低于BMECs+PD98059、BMECs+E2+PD98059组（P<0.01）;对照组CyclinD1 mRNA的表达丰度极显著高于BMECs+PD98059组（P<0.01）;BMECs+E2+PD98059组的Bcl-2 mRNA的表达量极显著高于BMECs+PD98059组（P<0.01）,Caspase3 mRNA的表达量显著低于BMECs+PD98059组（P<0.05）。结果表明,MAPK/ERK信号通路参与BMECs的增殖及细胞生长周期调节的过程,且雌激素可通过MAPK/ERK信号通路抑制BMECs的凋亡,MAPK/ERK信号通路可能参与由雌激素调控的细胞生长周期的进程。 相似文献
6.
本研究通过分析不同胎次乳房性状之间的相关性以及乳房性状与泌乳性能之间的相关性,建立地中海奶水牛乳房线性性状的入选主成分评估模型,为培育具有优良乳房性状的高产奶水牛提供参考。收集意大利牧场123头地中海水牛共1 107条生产记录信息,利用SAS 9.2 CORR过程进行相关性分析,运用PRINCOMP过程建立入选主成分评估模型。结果表明,1~4胎时,270 d泌乳量随着胎次的增加而增加;在1~2胎时,前乳头长与后乳头长呈极显著正相关（P<0.01）;3胎及3胎以上时,前乳头长与后乳头长呈显著正相关（P<0.05）;1~4胎时,乳区面积与前乳头距、前后乳头距、后乳头距呈极显著正相关（P<0.01）,且前乳头距与后乳头距呈极显著正相关（P<0.01）;在≥ 4胎时,前后乳头距与泌乳量、乳蛋白量呈显著正相关（P<0.05）,并与乳脂量呈极显著正相关（P<0.01）,同时乳区面积与泌乳性能呈显著正相关（P<0.05）;在第1~2、4胎及以上时,泌乳量、乳蛋白量和乳脂量之间呈极显著正相关（P<0.01）,且在第3胎时泌乳性能之间呈显著正相关（P<0.05）。入选主成分评估模型为：Y=0.2631x1+0.1186x2+0.0862x3+0.0796x4+0.1039x5+0.0042x6-6.9689,式中,x1,前乳头长;x2,后乳头长;x3,前乳头距;x4,前后乳头距;x5,后乳头距;x6,乳区面积。本研究进一步阐明了地中海奶水牛不同胎次乳房性状之间存在相关性,而乳房性状与泌乳性能之间的相关性受胎次的影响。 相似文献
7.
为探究卵黄蛋白原-32（ovocalyxin-32,OCX-32）基因过表达与鸡子宫上皮细胞Ca2+含量和脂质指标之间的关联性,本研究采用Ⅳ型胶原酶法分离培养长顺绿壳蛋鸡子宫上皮细胞,构建pcDNA3.1（+）+OCX-32+Flag表达载体并转染子宫上皮细胞,测定OCX-32基因过表达量、Ca2+浓度和脂质指标并进行相关性分析。结果显示,试验组的总胆固醇（TCHO）浓度显著高于对照组（P<0.05）,对照组的Ca2+浓度显著高于试验组（P<0.05）。OCX-32基因过表达量与Ca2+浓度呈显著负相关关系（P<0.05）,与甘油三酯（TG）浓度呈显著正相关关系（P<0.05）,与TCHO浓度呈极显著负相关关系（P<0.01）,TCHO浓度与TG浓度呈极显著负相关关系（P<0.01）,研究结果揭示了OCX-32基因过表达能够调控鸡子宫上皮细胞的Ca2+含量和脂质的合成转运,为深入阐释鸡子宫上皮细胞中脂质和钙分泌的调控机制提供试验基础和数据支持。 相似文献
8.
旨在探究硫酸铜溶液连续诱导对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）抗菌药物抗性及相关基因表达的影响。采用微量肉汤稀释法测定经硫酸铜诱导前后MRSA菌株（MR-YB1224、MR-YS3和MR-P318）对硫酸铜溶液及β-内酰胺类（氨苄西林、苯唑西林和头孢西丁）、氟喹诺酮类（氧氟沙星）、大环内酯类（罗红霉素）和氨基糖苷类（链霉素）等抗菌药物的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC）；采用荧光定量PCR方法测定硫酸铜诱导对菌株抗重金属基因（copA和arsB）和耐药基因（mecA，norA，ermB和aac6'/aph2″）表达的影响。连续诱导7 d后，MRSA菌株对硫酸铜溶液的MIC值均增加；特别是对β-内酰胺类抗菌药物的MIC值增加显著（P<0.05）；MRSA菌株对6种抗菌药物MIC值变化大小依次为苯唑西林 > 氨苄西林 > 头孢西丁 > 氧氟沙星 > 链霉素 > 罗红霉素。另外，连续诱导后，MRSA菌株的抗重金属基因和相关耐药基因的表达均显著上调（P<0.05）。本试验结果表明，硫酸铜溶液诱导对MRSA菌株抗菌药物抗性效应具有较强的协同效应。 相似文献
9.
为研究红曲合生元、酵母硒锗及其组合替代抗生素对断奶仔猪生长性能的影响。试验选用80头平均日龄（28±1）d,平均体重（7.57±0.49）kg,生长健康的三元杂交断奶仔猪,随机分为4个处理组,每组5个重复,每个重复4头仔猪。对照组饲喂基础日粮+25 mg/kg硫酸黏杆菌素和45 mg/kg金霉素,1、2、3组分别在基础日粮中添加0.5%红曲合生元、0.5%红曲合生元酵母硒锗复合制剂、0.5%酵母硒锗制剂。正式试验42 d,分3个阶段（1~14、15~28、29~42 d）。结果显示：①与对照组相比,1、2组各阶段平均日增重（ADG）均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,各试验组29~42 d的料重比（F/G）显著降低（P<0.05）。各试验组仔猪末重与对照组差异极显著或显著（P<0.01;P<0.05）。②与对照组相比,试验1~7 d,1组腹泻率（DR）和腹泻指数（DI）显著降低（P<0.05）;综合试验全期,1组DR、DI及2组DR均显著降低（P<0.05）。与3组相比,1、2组DI指标极显著或显著降低（P<0.01;P<0.05）。③与对照组相比,试验1~28 d,1、2组粗蛋白质（CP）和粗脂肪（EE）表观消化率显著或极显著提高（P<0.05;P<0.01）;试验29~42 d,各试验组干物质（DM）、CP和EE表观消化率显著或极显著提高（P<0.05;P<0.01）,1、2组总磷（TP）消化率均呈显著提高（P<0.05）。④与对照组相比,试验组血清生长激素（GH）、胰岛素生长因子-1（IGF-1）含量均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,血清生长抑素（GHRIH）含量显著或极显著下降（P<0.05;P<0.01）;其中,2组血清IGF-1含量较1、3组相比显著升高（P<0.05）。与对照组相比,1、2组血清皮质醇（COR）含量均呈显著升高（P<0.05）。综上所述,与抗生素相比,0.5%红曲合生元酵母硒锗复合制剂可预防断奶仔猪腹泻,同时有效地促进断奶仔猪生长发育;该复合制剂可替代日粮中25 mg/kg硫酸黏杆菌素和45 mg/kg金霉素。 相似文献
10.
放牧与舍饲饲养方式对小尾寒羊肉品质的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究旨在探讨放牧和舍饲两种饲养方式对小尾寒羊肉品质的影响。将100只2月龄雄性断奶羔羊随机分为放牧组与舍饲组,至8月龄进行屠宰,比较两组羔羊肉的营养成分、氨基酸含量、肉色、pH、嫩度及产肉性能。结果表明,放牧组羊肉粗蛋白和水分含量显著高于舍饲组羊肉（P<0.05）。舍饲组羊肉干物质显著高于放牧羊肉（P<0.05）,粗脂肪极显著高于放牧组羊肉（P<0.01）。舍饲组羊肉蛋氨酸、天冬氨酸和丝氨酸含量显著高于放牧组羊肉（P<0.05）,苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、谷氨酸和组氨酸含量均极显著高于放牧组羊肉（P<0.01）,必需氨基酸总量、非必需氨基酸总量和氨基酸总量也极显著高于放牧组羊肉（P<0.01）。放牧组羔羊背最长肌黄度值（b*）和亮度值（L*）极显著高于舍饲组（P<0.01）,肌纤维直径极显著低于舍饲组（P<0.01）,肌纤维密度极显著高于舍饲组（P<0.01）。舍饲组羊肉熟肉率极显著高于放牧组（P<0.01）,眼肌面积极显著大于放牧组（P<0.01）。综上所述,放牧饲养的羔羊其肉蛋白质含量较高,脂肪含量较低,肌纤维特性较好,舍饲饲养的羔羊其肉脂肪含量和氨基酸含量较高,肉色和产肉性能较好,生产中可结合两种饲养方式平衡养殖。 相似文献
12.
本试验旨在研究复合水溶性维生素对春、夏季奶牛生产性能、血液生理生化指标和抗氧化性能的影响。采用2×2因子随机区组设计,选取胎次、体重相近的健康成年奶牛80头,随机分为4个处理,即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,4组均饲喂基础日粮,Ⅲ、Ⅳ处理在春季补充复合水溶性维生素,Ⅱ、Ⅳ处理组在夏季补充复合水溶性维生素,各组添加量均为0.02%(日粮干物质为基础),预试期7 d,正式期70 d。结果表明:在春季添加复合水溶性维生素极显著提高奶牛的平均日采食量和日产奶量(P<0.01);在夏季显著提高奶牛的平均日采食量(P<0.05),极显著提高日产奶量(P<0.01);均能极显著提高乳脂率(P<0.01),极显著降低体细胞数(P<0.01);均能显著影响淋巴细胞总数(P<0.05)。在夏季补充复合水溶性维生素能极显著增加血清总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶(P<0.01),极显著降低乳酸脱氢酶、白蛋白、总蛋白、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和磷酸肌酸激酶含量(P<0.01)。综上所述,复合水溶性维生素可以提高奶牛的生产性能,增强奶牛非特异性免疫,改善奶牛抗氧化性能,减少夏季热应激。 相似文献
13.
The objective of the study was to investigate the effects of supplemental complex water soluble vitamins on production performance, blood biochemical parameters and oxidative resistance of dairy cows in spring and summer.The experiment was designed by 2×2 factorial randomized blocks design.Eighty healthy dairy cows with similar parity and body weight were randomly divided to four groups, with 7 days of adaptation and 70 d experimental phase.The dairy cows in group Ⅲ and Ⅳ were fed a basal diet supplemented with complex water soluble vitamins in spring.The dairy cows in group Ⅱ and Ⅳ were fed a basal diet supplemented with complex water soluble vitamins in summer.The results showed that the ADFI and daily milk yield of dairy cows receiving water soluble vitamin in spring were extremely significantly higher (P<0.01);The ADFI of dairy cows receiving water soluble vitamin was significantly higher in summer (P<0.05) and daily milk yield were extremely significantly higher (P<0.01);The butterfat rate was extremely significantly increased and SCC was extremely significantly decreased in spring and summer (P<0.01);Supplementation of water soluble vitamin was also significantly increased LYM (P<0.05).In summer, T-AOC, T-SOD were extremely significantly increased (P<0.01), and TP, CK, LDH, TP, HDL and ALB were extremely significantly decreased (P<0.01) by water soluble vitamin supplementation than that of control group.In conclusion, complex water soluble vitamins could increase the production performance and non-specific immune function, improve the oxidative resistance and relieved the heat stress of the dairy cows. 相似文献
14.
【目的】 探究硫化氢（H2S）对顺铂诱导的犬急性肾损伤（AKI）的影响。【方法】 将18只健康成年比格犬随机分为对照组（C）、顺铂组（cis）和硫化氢+顺铂组（H+cis）,每组6只。对照组犬经头静脉注射生理盐水,cis组犬经头静脉注射5 mg/kg顺铂,H+cis组犬在注射顺铂前30 min经头静脉注射1 mg/kg NaHS溶液,每隔24 h注射1次,一共3次。注射顺铂72 h后对犬进行麻醉,静脉采血用于检测血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）,HE染色观察各组肾脏病理变化,生化试剂盒检测犬肾脏中谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢（H2O2）和一氧化氮（NO）含量,实时荧光定量PCR和Western blotting法检测犬肾脏中白介素-1β（IL-1β）、IL-10、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子-κB （NF-κB）、环氧合酶2（COX2）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、IL-6、IL-4的相对表达量。【结果】 cis组Scr和BUN水平极显著高于对照组（P<0.01）,H+cis组Scr和Bun水平极显著低于cis组（P<0.01）。病理检测结果显示,cis组犬肾脏组织发生明显病理学变化,而H+cis组犬肾脏组织病理变化有所减轻。生化检测结果表明,与C组相比,cis组肾脏中GSH含量极显著下降（P<0.01）,H2O2和NO含量极显著增加（P<0.01）;与cis组相比,H+cis组犬肾脏中GSH含量极显著上升（P<0.01）,而H2O2和NO含量极显著下降（P<0.01）。实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果表明,与C组相比,cis组促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB和COX2的mRNA和蛋白相对表达量均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,而抗炎因子IL-4和IL-10的mRNA和蛋白相对表达量均极显著下降（P<0.01）;与cis组相比,H+cis组犬肾脏中抗炎因子IL-4和IL-10的mRNA及蛋白表达量极显著升高（P<0.01）,而促炎因子IL-β、IL-6、TNF-α、NF-κB和COX2的mRNA及蛋白相对表达量均极显著下降（P<0.01）。【结论】 H2S通过提高肾脏抗氧化能力,抑制炎症因子表达来改善顺铂诱导的犬AKI。 相似文献
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【目的】 探究薯蓣皂苷元（diosgenin,Dio）对顺铂（cisplatin,CP）诱导大鼠肾损伤的缓解作用。【方法】 选取24只健康的雄性Wistar大鼠,随机分为对照组（C）、Dio组（Dio）、模型组（CP）和Dio干预组（Dio+CP）。C和CP组每天灌胃6 mL 0.5% CMC-Na,Dio和Dio+CP组每天灌胃Dio （60 mg/kg）,连续灌胃10 d。在试验第7天,CP和Dio+CP组大鼠经尾静脉注射CP （6 mg/kg）,然后每天继续灌胃Dio,CP给药72 h后处死各组大鼠,无菌分离肾脏组织,用HE染色观察肾脏病理变化;用试剂盒检测总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量;用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测肾脏肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子κB p65（NFκB p65）、环氧合酶-2（COX-2）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-10 mRNA和蛋白的表达;用免疫化学法检测肾脏受体相互作用蛋白激酶-1（RIPK1）和RIPK3蛋白的表达。【结果】 HE染色结果显示,对照组和Dio组肾脏结构正常;CP组大鼠肾小管上皮细胞发生脱落以及空泡变性,肾脏结构被破坏,Dio+CP组肾小管的损伤明显减轻。与对照组相比,CP和Dio+CP组肾脏中MDA含量极显著升高（P<0.01）,T-AOC和CAT活性均极显著降低（P<0.01）;与CP组相比,Dio+CP组肾脏中MDA含量极显著降低（P<0.01）,T-AOC和CAT活性均极显著增加（P<0.01）。实时荧光定量PCR和Western blotting结果表明,与对照组相比,CP组大鼠肾脏中TNF-α、COX-2、NFκB p65和IL-1β mRNA和蛋白的表达量均极显著升高（P<0.01）,IL-10 mRNA和蛋白的表达量均极显著降低（P<0.01）;与CP组相比,Dio+CP组TNF-α、COX-2、NFκB p65和IL-1β mRNA和蛋白的表达量均显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）,IL-10 mRNA和蛋白的表达量均极显著升高（P<0.01）。免疫组化结果表明,与对照组相比,CP组大鼠肾脏中RIPK1和RIPK3蛋白的表达量均极显著升高（P<0.01）;与CP组相比,Dio+CP组大鼠肾脏中RIPK1和RIPK3蛋白的表达量分别极显著（P<0.01）和显著（P<0.05）降低。【结论】 Dio通过抑制肾脏氧化应激、炎症反应和细胞程序性坏死缓解CP诱导的大鼠肾损伤。 相似文献
16.
试验旨在探究富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B1(AFB1)对鸡小肠上皮细胞(CSIEC)凋亡的影响。将体外培养的CSIEC细胞分为对照组(C)、AFB1(300 μmol/L AFB1)、AFB1+0.01 Se(300 μmol/L AFB1+0.01 μmol/L富硒乳酸菌,以Se计)、AFB1+0.05 Se和AFB1+0.1 Se组,待细胞长至60%~70%汇合时,AFB1+0.01 Se、AFB1+0.05 Se和AFB1+0.1 Se组培养液更换为含对应Se浓度的培养液,对照组和AFB1组更换为正常培养液,8 h后向含AFB1组加入300 μmol/L AFB1,继续培养24 h。用CCK-8法检测细胞存活率,ELISA法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,TUNEL法检测细胞凋亡率,Western blotting检测线粒体通路和内质网通路相关蛋白Bcl-2、Bax、PERK、ATF4、CHOP、GRP78、p53和p21的表达。细胞存活率检测结果表明,与对照组相比,其余各组CSIEC存活率均极显著降低(P<0.01);与AFB1组相比,加硒各组存活率均极显著升高(P<0.01)。LDH活性检测结果表明,与对照组相比,其余各组LDH活性均极显著升高(P<0.01);与AFB1组相比,加硒各组LDH活性均极显著降低(P<0.01)。细胞凋亡率检测结果表明,与对照组相比,AFB1组TUNEL阳性细胞数极显著升高(P<0.01),且与加硒各组差异均不显著(P>0.05)。Bcl-2/Bax表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB1组Bcl-2/Bax极显著降低(P<0.01),AFB1+0.05 Se组显著升高(P<0.05)。内质网应激通路相关蛋白表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB1组PERK、CHOP、GRP78和p53的表达量均极显著升高(P<0.01);与AFB1组相比,加硒各组PERK、GRP78表达量均极显著降低(P<0.01),AFB1+0.05 Se和AFB1+0.1 Se组CHOP和p53的表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。因此,富硒乳酸菌能够缓解AFB1诱导的CSIEC凋亡。 相似文献
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旨在研究3,6-二溴-beta-氟-N-(3-甲氧基苯基)-9H-咔唑-9-丙胺(P7C3-A20)对大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(PC12细胞)创伤性脑损伤(TBI)的修复作用。将细胞分为对照组(A组)、模型组(B组)、0.03 μmol·L-1药物治疗组(C组)、0.3 μmol·L-1药物治疗组(D组)、3 μmol·L-1药物治疗组(E组)和药物空白组(F组),TBI细胞模型通过使用10 μL枪头划出横竖相间4 mm的直线来制备。使用CCK8试剂盒检测细胞活力,荧光显微镜观察细胞凋亡、活性氧(ROS)情况,荧光定量PCR仪检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、血红素氧合酶1(HO-1)、NAD (P) H:醌氧化还原酶1(NQO1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)的mRNA相对表达量。结果显示：TBI造模后细胞活力极显著降低(P<0.01),0.03 μmol·L-1浓度的P7C3-A20能显著提高TBI后的细胞活力(P<0.05),0.3 μmol·L-1浓度的P7C3-A20能极显著提高TBI后的细胞活力(P<0.01)。TBI造模后细胞早晚期凋亡细胞比例极显著增加(P<0.01),0.03 μmol·L-1浓度的P7C3-A20能显著减少TBI后的早期凋亡细胞比例(P<0.05),极显著减少TBI后的晚期凋亡细胞比例(P<0.01),0.3和3 μmol·L-1浓度的P7C3-A20能极显著减少TBI后的早晚期凋亡细胞比例(P<0.01)。TBI造模后活性氧细胞比例极显著增加(P<0.01),0.03和3 μmol·L-1浓度的P7C3-A20能显著减少TBI后的活性氧细胞比例(P<0.05),0.3 μmol·L-1浓度的P7C3-A20能极显著减少TBI后的活性氧细胞比例(P<0.01)。0.3 μmol·L-1浓度的P7C3-A20能极显著减少TBI后Caspase-3的mRNA相对表达量(P<0.01),显著提升TBI后Bcl-2、HO-1、NQO1和GCLC的mRNA相对表达量(P<0.05)。P7C3-A20对TBI后的PC12细胞有抗凋亡、减轻氧化应激的修复作用。 相似文献