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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西分离株GX-YL5通过滴鼻点眼人工感染14日龄健康非免疫雏鸡,对接毒后1、3、5、7、10、14、21、28、35和42 d试验鸡的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏等组织及泄殖腔棉拭子进行IBV的反转录巢式PCR检测,同时对接毒后不同时间的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、法氏囊、脾脏和肝脏进行组织病理学观察。结果表明接毒后的3～21 d,气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏的病毒检测均为阳性,接毒后42 d肾脏和气管检测结果仍为阳性;接毒后3～42 d泄殖腔棉拭子检测结果为阳性。组织病理学观察见到气管黏液,气管和细支气管纤毛脱落,炎症细胞浸润,肺充血,淋巴细胞浸润,肾脏间质性肾炎以及法氏囊水肿。研究结果表明,GX-YL5株对雏鸡具有广泛的组织嗜性,主要脏器带毒时间21 d或更长,泄殖腔排毒持续至少39 d。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2016,(13)
为了分析不同样本对应用ELISA法检测禽白血病阳性检出率的影响,试验将20只10日龄SPF鸡随机均分为试验组和对照组,试验组接种禽白血病病毒,对照组接种生理盐水,7 d后采集各组SPF鸡的肝脏组织、血清、泄殖腔拭子和骨髓进行ELISA检测,统计禽白血病的阳性检出率。结果表明:试验组SPF鸡的肝脏组织、血清和骨髓的禽白血病检测结果相对一致,阳性检出率为100%;而泄殖腔拭子的阳性检出率为70%,相对其他样本结果偏低。说明以泄殖腔拭子为样本时,其ELISA检测结果可能具有假阴性现象,综合考虑,以血清为样本进行禽白血病ELISA检测的阳性检出率更为可靠。 相似文献
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为调查规模化猪场中戊型肝炎病毒(HEV)感染和流行特征,首先在4个猪场采集血样80份,用酶联免疫吸附试验(ELISA)榆测抗-HEV IgG抗体.在此基础上,作者于2007-2009年采集规模化猪场肛拭子样品415份,及规模化猪场送检的临床病猪肝脏样品135份,应用巢式PCR(RT-nPCR)方法进行HEV RNA检测,将PCR扩增产物测序,利用Neighbour-joining法进行进化分析.结果:4个猪场80份血清中HEV阳性血清56份,抗-HEV抗体阳件率高达60.0%以上.8个规模化猪场中有5个猪场的肛拭子检测到HEV,肛拭子阳性率8.43%(35/415);从临床送榆的发病猪采集的肝脏样品中HEV阳性率为15.55%(21/135);HEV RNA最早检出日龄为7 d,最晚检出日龄为84 d.遗传进化分析表明:测序的38株阳性毒株之间同源性为92%～100%,均属于HEV基因4型.其中,从肛拭子中分离的毒株(FJ445406)与猪源毒株DQ279091株处在同一分支上;而肝脏中分离的毒株(GQ202266.1)和人源毒株处在一个亚支,属于4型巾的同一亚型,表明该毒株与人源毒株亲缘关系较近.本研究表明华中地Ⅸ猪群中普遍存在HEV感染,阳性率较高.本研究为规模化猪场HEV的防控提供了依据. 相似文献
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【目的】 研究牛病毒性腹泻病毒（BVDV）感染对新西兰白兔的致病性以及BVDV E2重组蛋白的免疫效果。【方法】 将实验室培养保存的BVDV病毒纯化并按照Reed-Muench法测定其病毒滴度。在致病性试验中,将10只新西兰白兔随机分为感染组和对照组,每组5只。感染组用1 mL纯化的BVDV病毒攻毒（滴鼻500 μL、耳缘静脉注射500 μL）,对照组用等体积的生理盐水处理,连续3 d,每天1次,每天观察各组兔的临床症状并测量体温;分别于接种病毒后第6、9、12、15、17天通过耳缘静脉采集血液检测血常规;感染病毒第17天采集鼻拭子进行RT-PCR鉴定,采集后剖杀并采集气管、肺脏、脾脏和小肠组织,制备病理切片观察病理变化。在免疫效果评价试验中,将10只新西兰白兔随机分为免疫组和对照组,每组5只,免疫组用E2重组蛋白（1 mg/只）与佐剂混合后经肌内多点注射免疫新西兰白兔,对照组接种等体积生理盐水;共免疫2次,2次免疫间隔为14 d。在一免后0、7、14、21、28 d采集血清,通过间接ELISA方法检测血清中抗重组蛋白特异性抗体水平;在一免后第28天按致病性试验中方法攻毒,在攻毒第17天采集鼻拭子进行RT-PCR鉴定,采集气管、肺脏、脾脏和小肠组织制备病理切片观察病理变化及免疫组织化学检测。【结果】 纯化后BVDV的病毒滴度为4.16×106 TCID50/mL。与对照组相比,感染组部分新西兰白兔6 d内活动减少,采食略微减少,6 d后逐渐恢复正常,在感染第13天出现腹泻症状,从第5天开始体温略微升高,但均在正常范围内波动。与对照组相比,在攻毒第6和9天,感染组白细胞和血小板分别显著和极显著降低（P<0.05;P<0.01）;在攻毒第12、15和17天,感染组白细胞、血小板和淋巴细胞均极显著降低（P<0.01）。鼻拭子RT-PCR检测为阳性,气管、肺脏、脾脏及小肠组织表现出轻度至重度的组织病理学变化。间接ELISA检测结果表明,在一免后7 d时,血清抗体滴度为1：16~1：32;在一免后28 d时,血清抗体滴度为1：256~1：512;免疫攻毒组新西兰白兔鼻拭子经RT-PCR检测为阴性;组织病理学观察显示,免疫攻毒组气管及肺脏表现出轻微的组织病理学变化。免疫组化检测结果显示,免疫组结果均呈阴性,对照组结果均为阳性。【结论】 通过滴鼻及耳缘静脉注射BVDV的方式可以构建新西兰白兔致病模型,BVDV E2亚单位疫苗能够刺激机体产生特异性抗体,起到免疫防御的作用。 相似文献
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广东省禽流感原疫点及周围地区H5亚型禽流感监测报告 总被引：1，自引：0，他引：1
从广东省8个曾发生禽流感疫情的原疫点及周围地区,在强制免疫后21～28天采集家禽血清和咽喉、泄殖腔及环境样品拭子,进行H5亚型禽流感血清学监测和病原学调查。结果表明:发生禽流感疫情的地区,在进行紧急免疫接种后21～28天,受威胁区大部分禽只产生H5亚型禽流感保护性抗体,在环境样品拭子和家禽拭子中未监测到H5亚型禽流感病毒。 相似文献
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鸡传染性支气管炎（avian infectious bronchitis,IB）是由冠状病毒科、冠状病毒属鸡传染性支气管炎病毒（avian infectious bronchitis virus,IBV）引起鸡的一种急性、高度接触性传染病。IBV可感染不同品种、不同年龄的鸡，尤其是雏鸡和蛋鸡。本研究用7种禽源性病毒核酸检测试剂盒，对无菌采集的土杂肉鸡的45份咽拭子和肛拭子进行荧光定量PCR检测结果发现，样本的禽传染性支气管炎病毒核酸阳性率为73%，未检出其他6种禽源性病毒，初步证实该鸡场发生了禽传染性支气管炎病毒的感染。 相似文献
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传染性支气管炎病毒(M41株)HI试验抗原的特异性和敏感性试验 总被引：1，自引：0，他引：1
采用本研究室制备的3批传染性支气管炎病毒(IBV,M41株)HI试验抗原,分别对100份和80份不同鸡血清进行IBV HI抗体检测,同时用IBV ELISA抗体检测试剂盒进行检测,比较两种不同方法检测的特异性和敏感性。结果显示,特异性试验中80份SPF鸡血清,自制抗原检测均为阴性,IBV ELISA检测79份为阴性,10份其他鸡病血清,两种方法检测9份均为阴性,10份IBV阳性血清两种方法检测均为阳性;敏感性试验中,74份已知IB疫苗免疫或IBV M41株感染鸡血清IBV HI检测72份为阳性,阳性检出率为97.3%(72/74),IBV ELISA检测74份均为阳性,阳性检出率为100%(74/74),SPF鸡血清及其他鸡病血清,两种方法检测均为阴性,两种检测方法总符合率为97.5%,差异不显著(P0.05)。试验结果证明,本研究室自制抗原具有良好的特异性,特异性为100%,抗原同时具有良好的敏感性,但IBV ELISA方法的敏感性要高于IBV HI方法。 相似文献
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表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒对SPF鸡的免疫保护作用 总被引：10，自引：2，他引：8
将表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IBVS1)以5×106PFU剂量翅皮下注射接种4周龄的SPF鸡。血清抗体检测表明,该重组鸡痘病毒能刺激鸡体产生特异性抗体,外周血液中CD4 、TCRγδ T淋巴细胞比例显著高于对照组,而CD8 T淋巴细胞比例低于对照组。免疫后4周用1×103.0EID50的传染性支气管炎病毒LX4株进行攻毒,结果表明,重组鸡痘病毒免疫组与IB弱毒疫苗免疫保护率分别为12/16和13/16;攻毒后喉拭子IBV分离结果表明,IB弱毒疫苗和重组鸡痘病毒免疫组的IBV气管排毒时间比对照组缩短了2 d,病毒的分离率显著低于对照组;肾脏、气管、肺脏、腺胃、脾和肝脏的病理损伤也较对照组轻,而且病变持续时间缩短。 相似文献
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维鸵鸟是指3月龄以下的小鸵鸟。雏鸵乌成活率低是困扰鸵鸟养殖业迅速发展的主要原因之一,育雏率的高低取决于种蛋的质量。孵化技术和育雏期的饲养管理等因素。任何一个因素出现问题都可以导致育雏的失败。1999年初,汕头某公司从东非进口鸵鸟种蛋64枚,从中孵出雏鸟22只。但由于种种原因该批雏鸟于一月龄内几乎全部死亡。雏鸟生前和死后曾被采血、采集肛拭子和内脏作正。副粘病毒的分离,禽流感＼新城疫和鸟疫的血清学检测以及沙门氏菌的分离,结果均呈阴性,但从肛拭子和死乌内脏中分离到产肠毒素性大肠杆菌O。血清型c其育雏失败主要有三… 相似文献
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本研究选用与鸽源冠状病毒S1基因高变区氨基酸序列同源性很高的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西分离株GX-YL2和对鸡致死率较高的广西分离株GX-YL5对非免疫幼鸽进行人工感染试验,并同时设参考毒株M41组和空白对照组。结果显示,感染后4 d M41、GX-YL5组试验鸽出现呼吸道症状。感染后7 d GX-YL2组试验鸽子出现呼吸道症状。与空白组相比,感染后8 d GX-YL2组鸽子气管内有大量黏液,胰脏充血肿大,肺脏和肾脏充血;GX-YL5组鸽子气管有大量黏液,肺充血,胰脏充血肿大;M41组鸽子气管粘膜肿胀并有黏液,肾脏充血。感染后8 d组织病理学观察见到鸽子气管纤毛上皮细胞肿胀但纤毛完整不脱落,轻微胰腺炎,肺脏充血和出血。感染后28 d未观察到明显的临床、解剖和组织病理学变化。对感染后1、3、7、10、14、21和28 d的泄殖腔棉拭子进行反转录套式PCR扩增,结果表明除了GX-YL2组的一个样品在感染后10d检测结果为阳性外,其余泄殖腔棉拭子检测结果全为阴性。对感染后8和28 d鸽子气管、肺、肾脏、胰脏病毒分离物进行反转录套式PCR扩增,结果表明感染后8 d,M41组的气管、肺、肾脏、胰脏全部阳性,GX-YL2和GX-YL5组的气管、肺、肾脏、胰脏部分阳性;感染后28 d,3个组鸽的气管、肺、肾脏、胰脏病毒检出率均降低,尤其GX-YL2和GX-YL5组更低。整个试验过程未见到致鸽子死亡。研究表明了对鸡具有较强致病能力的鸡源IBV可以感染肉鸽,能在肉鸽体内进行增殖,但对鸽子致病力不强。 相似文献
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《畜牧与兽医》2018,(12)
为探讨以非致病性大肠杆菌鞭毛蛋白为载体展示口蹄疫病毒(FMDV) VP1蛋白嵌合体(Fn-VP1-Fc)的免疫效力为目的,筛选2月龄FMDV阴性仔猪,颈部肌肉注射,分别于免疫前、免疫后第14、28和60天采集血清,用液相阻断ELISA (LPB-ELISA)测定IgG滴度。分别于免疫前和免疫后第28天,采集鼻腔拭子和肛拭子,间接ELISA测定IgA滴度。结果显示,疫苗接种第14天,免疫Fn-VP1-Fc疫苗产生了可以检测到的FMDV特异性抗体;第28和60天,FMDV特异性抗体持续升高;第60天,产生了可以检测到的特异性IgA,部分猪只滴度可达1∶160,而对照疫苗未检测到IgA。结果表明,Fn-VP1-Fc嵌合免疫原不仅能促进FMDV全身特异性抗体产生,也在一定程度上促进局部IgA分泌。 相似文献
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以地高辛(DIG)标记鸡传染性支气管炎病毒(IBV)pol基因的保守片段制成核酸探针,与IBV参考株、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽流感病毒、正常鸡胚尿囊液及正常鸡肾组织等的RT-PCR产物进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与IBV毒株的RT-PCR产物杂交呈阳性,与对照病毒和组织的RT-PCR产物杂交呈阴性.敏感性试验显示,探针最低能检出约3.4pg的IBV RT-PCR产物.用该方法检测了38份疑似IBV临床病料,31份阳性;而用RT-PCR法扩增IBV S2基因确诊为阳性的只有29份.对人工接种IBV H52弱毒苗鸡咽喉和肛门拭子32份进行检测,检出15份阳性.结果表明,利用DIG探针检测IBV的RT-PCR产物,特异性和敏感性强,可重复,能克服RT-PCR非特异性反应和探针Northern杂交的不稳定性. 相似文献
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禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究 总被引：2，自引：2，他引：2
应用禽流感病毒二价（H5、H9）油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡，免疫接种后分别于第0、7、14、21、28、35 d采集相应的鸡蛋和血清，采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律，结果表明：H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生，14 d时到中等水平，21 d时达到最高值，一直维持到35 d之后；而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右；卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后，28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。 相似文献
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为了解山东省山鸡和鹅禽白血病（Avian Leukosis, AL）流行情况,从德州平原、潍坊临胸等地区无菌采集262份山鸡血清,701份泄殖腔棉拭子（山鸡棉拭子362份、大白鹅鸡棉拭子168份、郎德鹅棉拭子171份）,利用IDEXX公司ELISA试剂盒进行了ALV—J、ALV—A／B抗体检测及p27抗原检测。检测结果显示,262份山鸡血清中ALV-J只有2份抗体阳性,而ALV-A／B抗体阳性6份,但在362份棉拭子中p27抗原阳性率却高达26．5％。大白鹅和郎德鹅棉拭子p27抗原检测全为阴性。本研究以病原学和血清学方法开展ALV的流行病学调查,初步了解了山东地区山鸡和鹅的ALV的感染状况。为该病的防控提供了理论依据。 相似文献
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为了解鹅禽白血病病毒(ALV)的自然感染状态,试验采集4种不同地方品种鹅(豁眼鹅、广丰白翎鹅、浙东白鹅、武岗鹅)、3个时期(6周龄、22周龄和37周龄)的泄殖腔棉拭子和对应的血清样品各1 089份,同时采集产蛋期蛋清样品共180份,利用ALV抗原检测试剂盒进行检测。结果表明:每个品种鹅的不同时期样品均能够检测到ALV p27抗原,其中血清样品阳性率相对较高(6. 5%～8. 8%),泄殖腔棉拭子样品阳性率显著低于血清样品(P0. 05),蛋清样品阳性率最低(0～2. 2%);不同品种同一样品间ALV p27抗原阳性率差异不显著(P0. 05)。说明在鹅中可以检测到ALV p27抗原,且血清样品检测阳性率高于泄殖腔棉拭子和蛋清样品,但ALV在鹅中没有表现出品种差异性。 相似文献
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为正确评估野(候)鸟在禽流感流行病学中的作用,从2005年5月开始对青海湖地区野(候)鸟进行了血样、喉气管拭子、泄殖腔(粪便)拭子和病死禽(脑组织)样品的采集,到2007年8月底,共采集样品2403份,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)试验对喉气管拭子、泄殖腔(粪便)拭子和病死禽(脑组织)样品进行了病原学检测,结果出现阳性10份,其余均为阴性;采用HA和HI试验进行了禽流感血清抗体的检测,结果在4种野(候)鸟的11份血样中检出了5份AIV阳性抗体,全部为H5亚型。 相似文献