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1.
为了解猪源附红细胞体(Mycoplasma spp.)RNA酶P RNA(RNase P RNA,rnpB)基因序列变异状况,将实验室保存的经16S rRNA基因序列分析鉴定的53份猪源附红细胞体阳性DNA样品用于rnpB基因的扩增,扩增产物克隆至pMD18-T载体并进行序列测定。将获得的序列与GenBank登录的猪附红细胞体(Mycoplasma suis)德国分离株rnpB基因序列(登录号:EF523602)进行分析和比对,利用MEGA5.0软件构建系统发育树,并与16S rRNA判定结果进行比较。结果共得到42条猪附红细胞体rnpB基因和11条小附红细胞体(M.parvum)rnpB基因序列。猪附红细胞体上海分离株rnpB基因与GenBank登录的猪附红细胞体德国分离株rnpB基因之间的核苷酸序列相似性为98.1%~100.0%;小附红细胞体上海分离株rnpB基因与猪附红细胞体德国分离株rnpB基因序列的相似性为91.0%,与猪附红细胞体上海分离株rnpB基因序列相似性为90.0%~91.0%。系统进化分析显示猪附红细胞体rnpB基因与小附红细胞体rnpB基因分布在不同聚簇上,与16S rRNA基因序列鉴定结果一致。 相似文献
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猪附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和系统进化分析 总被引：11，自引：3，他引：11
从确诊为猪附红细胞体感染的猪场，无菌采集血样，抽提猪附红细胞体基因组DNA，采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增，对扩增产物进行克隆和测序。从3个地理位置不同的猪场均成功地扩增出长度为1469bp的核苷酸序列。系统进化分析表明，3个猪场样品所测序列一致性达99．52％以上，具有相同的基因型，但与国外报道的猪附红细胞体Illinois株同源性为95％，属于同一基因群，但基因型不同；所有种类的附红细胞体和血巴尔通氏体组成同一进化分支，这类血营养菌与支原体科，支原体属的病原最靠近(75％)，而与立克次氏体目的病原较远(70％)。上述研究证实，广东所流行的猪附红细胞体是一种新基因型的猪附红细胞体，建议命名为猪附红细胞体广东株型；为反映进化关系，猪附红细胞体和其它血营养菌应划归于支原体科的支原体属。 相似文献
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从自然感染附红细胞体的湖北黄牛无菌采集血液,分离附红细胞体并提取病原基因组,用血营养菌的16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1.5kb的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析.结果表明该片段全长为1 471 bp（GenBank收录号为AY946266）,同源性分析表明该序列与Neimark公布的温氏附红细胞体（AF016546）的16S rRNA基因序列同源性达到98.7%,证实该病原为温氏附红细胞体,从分子生物学水平证实了温氏附红细胞体在湖北省的存在.将该序列与5种支原体、14种血营养菌及边缘无浆体等的相应序列进行比较,建立系统发育树,结果表明温氏附红细胞体同边缘无浆体的关系较远,而与肺炎支原体组的亲缘关系较近. 相似文献
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近年来,国外对一些猪的病原菌正式更改了名称. 1血猪支原体(Mycoplasma haemosuis) 1932年,Doyle在2～8月龄猪中见到一种立克次氏体样或无形体样的疾病,特征为黄疸,呼吸困难,衰弱和发热.1950年,Splitter等见到以上疾病,将其,病原定名为猪附红细胞体(Eperythrozoon suis).此病原的分类一直未定,Levins(1961)将其归为立克次氏体属.1997年,Rikihisa等测定了16s rRNA基因序列.1999年,Johansson等发现其基因序列与其他立克次氏体微生物相同较少,而与支原体微生物比较接近. 相似文献
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为了从分子水平上证实奶牛附红细胞体的存在及研究其分类学地位,利用原核生物16S rRNA基因通用引物对分离纯化的疑似奶牛附红细胞体进行16S rRNA基因的PCR扩增及克隆测序。结果扩增出长约1.5 kb的目的片段,测序结果表明:目的片段长度为1 439 bp,其核苷酸序列与国外已发表的牛温氏附红细胞体(E.wenyoni)的16SrRNA基因片段同源性高达97.1%,暂称为中国广西株(E.wenyoniCGX)。系统发育进化树显示:E.wenyoni和其他血营养菌在系统进化关系上组成了一个大的进化分支,与支原体科、支原体属的病原最接近(75%),而与立克次体科的病原较远(55%)。分析结果支持了Nei mark等和Messick等提出的将这类血营养菌划归支原体科、支原体属的建议。 相似文献
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猪附红细胞体病诊断方法研究进展 总被引：2，自引：1，他引：1
附红细胞体病(eperythrozoonsis)是由附红细胞体(eperythrozoon)感染动物机体后,寄生于宿主红细胞表面、血浆及骨髓等处引起的一种以发热、黄疸、贫血为主要临床特征的人畜共患传染病(Kreier等,1976).附红细胞体在<伯杰细菌鉴定手册>中列为立克次体目,无浆体科,附红细胞体属(Gwaltney等,1995).近几年对猪附红细胞体病原基因进行序列分析研究认为,猪附红细胞体应更名为猪嗜血性支原体或猪支原体. 相似文献
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猪附红细胞体病是由猪附红细胞体引起的一种以黄疸和贫血为主要特征的人畜共患传染病。该病流行范围广泛,对养猪业危害严重。根据其16 S RNA序列,现将猪附红细胞体划为支原体属的单个新种。猪附红细胞体主要通过接触被病原污染的血液、胎盘感染、蚊虫叮咬等途径传播。猪附红细胞体对干燥敏感,对低温的抵抗力较强;对青霉素类药物不敏感,但对强力霉素敏感。通过引种时做好种猪的选育、在夏秋季节加强畜舍消灭蚊蝇工作、加强饲养管理以增强猪体抵抗力、采用敏感药物进行早期治疗等相关措施可对该病起到积极预防作用。论文主要对猪附红细胞体的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断、预防及治疗等进行了综述。 相似文献
10.
猪附红细胞体PCR检测方法的建立和初步应用 总被引：22，自引：1，他引：22
基于猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的序列特点，设计合成种特异性引物，建立了猪附红细胞体PCR检测方法。该方法能特异性扩增523bp的猪附红细胞体16SrRNA基因片段，而对猪丹毒杆菌G4T10株、猪链球菌STl71株、多杀性巴氏杆菌E0630株、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体、鸡毒支原体和猫血巴尔通氏体CA株的基因组DNA没有扩增带出现。对猪附红细胞体基因组DNA的最小检测量为160pg。通过对38份临床样品的检测，8份为猪附红细胞体感染阳性，其余为阴性。结果表明，建立的PCR检测方法具有极高的敏感性和特异性，可用于急性猪附红细胞体病和临床健康带菌猪的诊断。 相似文献
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无菌采集自然感染附红细胞体的牛血液,提取全血基因组,用血营养菌16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1 500 bp的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析.结果,所克隆的牛附红细胞体基因片段大小为1 454 bp,GenBank登录号为FJ375309(丰都株).序列比对结果显示,牛附红细胞体丰都株与武汉株(AY946266)最高,达99.7%,与支原体科代表种同源性为60.7%～76.2%,而与立克次氏体科的立克次氏体和无形体科的无形体同源性仅为51.4%～56.4%,表明牛附红细胞体应归为支原体科,附红细胞体属,而不应属于立克次氏体目,无浆体科.对国内外牛温氏附红细胞体的亲缘关系分析表明,牛温氏附红细胞体无明显的地域性差别趋势. 相似文献
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无菌采集感染温氏附红细胞体(E.wenyoni)的牛血液,抽提E.wenyoni基因组DNA,参考GenBank发表的E.wenyoni 16S rRNA基因序列(AF016546),设计1对特异性引物,扩增并克隆E.wenyoni 16S rRNA部分基因,基因产物大小为1 005 bp.序列比较结果显示,所测序列与参考序列(AF016546)同源性最高.达97.9%.系统发育分析表明,所测序列与支原体属病原代表种的序列接近.同源性约为70%,而与无浆体科病原代表种的序列相差较远,同源性约为50%.可见,E.wenyoni应归为支原体属,而不应属于立克次氏体目、无浆体科. 相似文献
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根据GenBank上发表的猪附红细胞体16S rRNA基因序列(登录号U88565)设计合成2对引物,建立了猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法,经酶切分析、单管巢式PCR进一步鉴定后进行序列测定,并与血涂片染色镜检、常规PCR进行了比较。结果:扩增的猪附红细胞体基因序列与GenBank中发表的猪附红细胞体基因序列(U88565)同源性为96%;特异性试验表明,设计的引物不能扩增弓形虫、链球菌、大肠杆菌、葡萄球菌及羊附红细胞体等病原体;敏感性试验表明,单管巢式PCR诊断方法最低能够检测出0.116 fg的标准模板DNA。通过对75份血液样本的检测表明,建立的单管巢式PCR方法明显优于血涂片染色镜检法及常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性。本试验建立的单管巢式PCR诊断方法具有特异、敏感、实用等优点,为猪附红细胞体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。 相似文献
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奶牛附红细胞体的分类鉴定及诊断方法的建立 总被引：5，自引：0，他引：5
为了从分子水平上确定奶牛附红细胞体（E．wenyoni）的分类学地位及建立奶牛附红细胞体感染诊断方法。本研究通过利用原核生物16S rRNA基因通用引物，对分离得到的奶牛附红细胞体（广西株，E．wenyoni-GX）进行16SrRNA基因的克隆及测序。并建立系统发育进化树；同时根据测序结果设计诊断引物，建立奶牛附红细胞体感染的PCR诊断方法。结果扩增出长约1．5kbp的奶牛附红细胞体的16SrRNA基因片段；特异性试验和敏感性试验表明。所建立的PCR方法与常见支原体、细菌及原虫元交叉反应，能检测奶牛附红细胞体最低DNA量为0．145fg。通过试验结果分析，建议将奶牛附红细胞体这类血营养菌划归入支原体科、支原体属；同时，所建立的PCR诊断方法是特异、敏感、快速的，可应用于临床检测。 相似文献
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猪附红细胞体病的研究进展 总被引：9，自引：0，他引：9
自从Ｄｏｙｌｅ１９３２年在印度首次报道了“猪的一种立克次氏体病或类微粒孢子虫病”（Ｄｏｙｌｅ,１９３２）以来 ,世界各地 ,特别是近几年 ,从仔猪到怀孕母猪均有猪附红细胞体病发生的大量报道。该病已造成了巨大的经济损失 ,引起我国许多养猪者的极大关注。１病原过去认为 ,猪附红细胞体是一种寄生在猪红血球上的立克次氏体。近几年 ,对病原的基因序列(１６ＳｒＲＮＡ)分析结果表明 ,猪附红细胞体不应属于立克次氏体。猪附红细胞体无细胞壁 ,无鞭毛 ,对青霉素类不敏感 ,而对强力霉素敏感。宜将猪附红细胞体列入柔膜体纲支原体属 (Ｍｙ… 相似文献
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近年来．猪附红细胞体病在河南省部分地区猪群中流行。猪附红细胞体病又称猪红皮病。是由立克次氏体目,乏浆体科,附红细胞体属。立克次氏体病原一猪附红细胞体引起的．其主要特征是“猪无名高热”。也有人认为该病是单细胞原虫的一种．属寄生虫病。病原体依附于红细胞上或红细胞内．有时也在血浆中游离．最终造成红细胞的改变而容易被吞噬破坏．从而造成红细胞数量的减少,而导致贫血、发育缓慢、料肉比提高等生产障碍。经济损失惨重． 相似文献
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利用半套式PCR扩增16S rRNA基因检测牛和猪附红细胞体 总被引：3，自引：0，他引：3
根据GenBank收录的猪和牛附红细胞体16SrRNA基因序列设计1对通用引物，在其上游引物内侧叉设计1条分别针对猪和牛附红细胞体的特异性引物。以这4条引物对出现附红细胞体痛典型症状及疑似症状的猪和牛的血样DNA进行半套式-PCR扩增。结果显示，该反应阳性率为58．3％，低于临床解剖和镜检结果。对谈基因的序列测定结果进行分析，表明不同动物附红细胞体的16SrRNA基因同源性在80％以上。从谈基因来看，附红细胞体与立克次氏体没有同源性，而与肺炎支原体和穿透支原体亲垮关系较近。 相似文献
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王红梅 《中国兽医寄生虫病》2002,10(2):23
今年夏季以来,廊坊农校兽医院已收治了两例猪附红细胞体病例,并对患病猪群进行普检,发现整群发病率达31.7%.
猪附红细胞体病病原为立克次氏体目(Rickellsiales),附红细胞体属(Eperythrozoon),乏质体科(Anaplasmataceae)的猪附红细胞体(Eperythrozon suis).它寄生于猪红细胞内或游离于血浆中,具有典型的细胞壁,以二分裂方式在红细胞内增殖.该病主要以急性黄疸性贫血和发热为特征.
…… 相似文献
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随着畜牧业的不断发展和野生动物保护力度的加大,动物疫病呈现新的特点--多种动物共患传染病发病率不断提高,给畜牧业生产、动物保护和人类健康均带来了严重危害,应引起高度重视。当前重点要搞好八种多种动物共患传染病的防治。1附红细胞体病本病是由附红细胞体寄生于动物或人红细胞表面及血浆中引起的一种热性、传染性疾患。对病原的基因序列(16SrRNA)最新研究结果表明,附红细胞体不应属于立克次体,是柔膜体纲支原体属,应称为嗜血性支原体。近几年在全国各地大面积流行,造成严重损失。本病以8-10月湿热季节多发,猪、兔、牛、羊、马、骡、… 相似文献