埕东油田西区强化泡沫驱试验研究     

黄翔  吴晓东 《长江大学学报》2010,7(2):50-53

针对埕东油田西区强化泡沫驱先导试验区的油藏特点及水驱开发现状,利用加拿大的CMG数值模拟软件,对强化泡沫驱注入主段塞大小、注入泡沫剂浓度、聚合物浓度、前置段塞大小、注入方式等参数进行了优化研究,并依此制定了开发方案。优化的注入前置段塞0.02PV（1800mg/L聚合物＋0.75%泡沫剂）＋主段塞0.3PV（氮气＋1600mg/L聚合物＋0.5%泡沫剂）,注入方式采用气液交替注入,交替周期10d。矿场实施后,注水波及体积扩大,驱油效率提高,采收率提高1.18%,累积增产原油1.4×104t。  相似文献   

水牛朊蛋白成熟片段基因的克隆与原核表达   总被引：1，自引：1，他引：1  

袁志栋  王志亮  刘雨田  吴晓东  赵永刚  刘海生 《中国农业科学》2006,39(12):2590-2596

【目的】克隆、分析水牛朊蛋白（prion protein，PrP）成熟片段基因，并获取纯化的表达产物。【方法】将应用PCR技术扩增的水牛成熟PrP的核酸序列克隆到表达载体pET-32a，并分析其序列；把阳性克隆质粒pET-32a-BPrP转化表达菌BL21(DE3)，鉴定纯化的表达产物。【结果】水牛朊蛋白成熟片段核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其他牛科动物的成熟PrP核酸、氨基酸序列间的相似性分别在97.1%和97.2%以上，并且发现水牛成熟PrP有5个重复序列，编码的氨基酸序列其中有2个九肽和3个八肽重复序列。具有较高的表达水平的PrP融合蛋白被纯化后，用Western印迹实验证明该蛋白具有PrP抗原活性。【结论】首次报道了克隆、分析水牛朊蛋白成熟片段基因，发现水牛成熟PrP有5个重复序列，并获得了具PrP抗原活性的水牛成熟PrP融合蛋白。  相似文献   

新疆野生北山羊小反刍兽疫病毒分子特征     

汪萍  夏俊  王文  马晓艳  吴晓东  苗书魁  马文戈  黄忠武  魏玉荣  陆桂丽  沙依兰·卡依扎  米晓云  黄炯 《中国动物检疫》2021,38(5):31-36

为了解新疆野生北山羊小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)的分子特征,根据GenBank公布的PPRV基因组序列设计并合成引物,采用RT-PCR方法和基因测序技术获得病毒全基因序列,应用分子生物学分析软件,对分离的PPRV毒株进行序列分析。结果显示,本次分离的PPRV毒株(China/XJAKS/2017)属于基因IV型,基因组全长15 954 nt,编码6种结构蛋白和2种非结构蛋白;在系统进化上,与国内新疆分离株China/XJBZ/2015、China/XJYL/2013同源率分别高达99.0%、99.6%,与国外的巴基斯坦和塔吉克斯坦分离株亲缘关系最近。结果表明,PPRV已经在家养动物与野生动物之间传播。结果提示,PPRV传入野生动物群为我国消除PPR带来极大困难,需加强我国边疆地区PPR免疫隔离带建设,并对野生动物PPRV分子流行病学特点进行追踪监测。  相似文献   

青藏高原高山嵩草叶、根抗寒性生理特征     

李莉莎  徐海燕  吴晓东  毛楠  甘子鹏  薛守业 《草地学报》2020,28(6):1544-1551

为探讨青藏高原高山嵩草（Kobresia pygmaea）叶、根抗寒性生理特征,本研究对返青期、草盛中期、草盛后期和枯黄期青藏高原高山嵩草叶和根中丙二醛、脯氨酸、可溶性糖含量及超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性进行测定。结果显示：叶片中丙二醛和可溶性糖含量在枯黄期达到最高,而脯氨酸含量在返青期最高;根中丙二醛含量在植物生长后期较低,可溶性糖和脯氨酸含量在后期则较高;叶片中3种抗氧化酶活性在植物生长后期呈显著下降趋势（P<0.05）;而根中3种抗氧化酶活性在植物生长后期较强;不同物候期各生理指标叶片中含量均高于根;器官、物候期以及器官和物候期的交互作用能够显著影响高山嵩草的渗透调节物质和抗氧化酶活性（P<0.05）,且不同物候期其不同器官生理指标的相关性不同。综上所述,高山嵩草叶片和根中的渗透调节物质和抗氧化系统对不同物候期的环境变化积极响应,这可能是其适应高寒环境的生理机制。  相似文献   

单抗介导牛海绵状脑病免疫组化检测方法的建立及其应用   总被引：1，自引：1，他引：1  

王志亮  吴晓东  刘雨田  邹艳丽 《中国农业科学》2005,38(1)

 中国鲁西黄牛重组PrPc成熟蛋白免疫PrPc基因敲除小鼠，利用淋巴细胞杂交瘤技术，经免疫组织化学试验筛选出单抗4C11可特异识别牛海绵状脑病标准阳性牛脑样品上PrPSc核心片段。以单抗4C11为核心试剂，建立了单抗介导牛海绵状脑病免疫组织化学检测方法，并已颁布成为中华人民共和国国家标准GB/T19180-2003（牛海绵状脑病诊断技术）。已应用于中国牛海绵状脑病的持续监测，至2002年底共检测了全国各地3344份牛脑样品，结果全为阴性，且每批次所设的阳性对照样品检测结果均呈阳性，与Roche公司单抗6H4检测结果的符合率为100％。  相似文献   

小反刍兽疫病毒分离株China/Tib/07辅助质粒及微型基因组的构建和鉴定     

刘文华  王志亮  包静月  吴晓东  刘华雷  赵永刚  刘秀梵 《畜牧兽医学报》2011,42(10)

本研究旨在构建小反刍兽疫病毒(PPRV)的辅助质粒和微型基因组并验证其功能,为建立PPRV反向遗传操作平台奠定基础.首先构建表达PPRV分离株China/Tib/07的N、P和L蛋白的辅助质粒pCI-N、pCI-P和pCI-L.通过间接免疫荧光试验验证3个辅助质粒转染细胞后的蛋白表达情况,并从mRNA水平上验证蛋白表达的正确性;扩增PPRV基因组两末端序列和eGFP报告基因,三者通过overlap-PCR连接并克隆至转录载体pOL-TV5中构建微型基因组.将构建的微型基因组分别与辅助病毒和3个辅助质粒进行共转染.经鉴定各辅助质粒完全正确,构建的微型基因组不论与辅助病毒还是与3个辅助质粒共转染,报告基因均表达.本试验成功构建了PPRV分离株的表达N、P和L蛋白的3个辅助质粒以及微型基因组,并用微型基因组验证了3个辅助质粒可以作为PPRV反向遗传操作的辅助质粒,为该病毒感染性克隆的构建奠定了基础.  相似文献   

携带小反刍兽疫病毒H基因的重组山羊痘病毒构建和鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

南文金  王清华  赵永刚  吴晓东  包静月  王志亮 《中国动物检疫》2011,28(7):33-35,39

将小反刍兽疫病(PPRV)毒糖蛋白基因H插入到山羊痘病(GPV)毒通用转移载体PtkPgpt-egfpP启动子P7.5的下游,构建了重组山羊痘病毒转移载体PtkPgpt-egfpPpprv-H。该重组转移载体转染感染山羊痘病毒疫苗株的绵羊睾丸细胞中,通过同源重组获得小反刍兽疫病毒H基因重组山羊痘病毒,通过纯化和PCR鉴定,证明小反刍兽疫病毒H基因插入到山羊痘病毒基因组中。本研究为进一步研究PPRVH基因重组山羊痘病毒的免疫原性奠定了基础。  相似文献   

抗尼帕病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定     

蒋皓静  吴延功  吴晓东  王志亮  赵永刚  单虎 《中国预防兽医学报》2011,33(3):239-241

为制备抗尼帕病毒(NiV)的单克隆抗体(Mib),本研究以原核表达并纯化的NiV核蛋白(N蛋白)为免疫原,按常规方法免疫小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞进行筛选,阳性孔经两次有限稀释法克隆,最终获得两株稳定分泌抗N蛋白MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为A6和C5.Western blot分析表明....  相似文献   

亚硫酸氢钠在砀山酥梨上的应用研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

王义彰  吴晓东 《果树科学》1991,8(2):97-99

  相似文献   

免疫组织化学方法检测牛海绵状脑病(BSE)和羊痒病(Scrapie)     

刘雨田吴晓东  邹艳丽王志亮 《中国动物检疫》2004,21(3):20-23

按照本实验室建立的牛海绵状脑病免疫组织化学方法，将自制单克隆抗体4C11与PK酶消化处理的牛海绵状脑病阳性切片和羊痒病阳性切片进行反应，发现单抗4C11不仅能与牛海绵状脑病阳性切片发生强烈的免疫反应，而且也能与羊痒病阳性切片发生强烈的免疫反应。从阳性切片和阴性切片的实验来看，单克隆抗体4C11没有非特异性染色反应，并且也没有背景染色。用瑞士进口单抗6H4进行的对照实验获得了同样的结果。因此，可以用自制的单克隆抗体4C11替代昂贵的进口单抗6H4来监测我国的牛海绵状脑病和羊痒病。  相似文献