禽呼肠孤病毒感染鸡胚成纤维细胞后IL-17、IL-18和IFN-γ mRNA转录水平的动态变化     

张昆丽  谢芝勋  黄莉  谢丽基  邓显文  谢志勤  刘家波  范晴  罗思思 《中国兽医学报》2015,(3):345-349

为了分析禽呼肠孤病毒(avian reovirus,ARV)S1133株感染鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF)后,对其细胞因子IL-17、IL-18和IFN-γmRNA转录水平的影响,探讨禽呼肠孤病毒感染机制和宿主之间的作用关系。本试验将ARV-S1133感染CEF细胞后,运用荧光定量PCR技术,测定和分析ARV结构蛋白σC和CEF细胞的IL-17、IL-18及IFN-γ的mRNA动态转录水平。结果表明,ARV-S1133感染CEF细胞10h后病毒结构蛋白σC mRNA的相对表达量开始迅速上升,在48h达到最高峰(13 162.73倍);ARV-S1133感染后引起CEF细胞中的IL-17、IL-18和IFN-γmRNA表达量发生变化,IL-17和IFN-γmRNA转录水平在感染早期迅速上调,感染后6h达到第一个峰值,分别上调8.77倍和11.17倍,随后下降,在感染36、48、60h后大幅度上升,且在48h达到峰值,表达量分别为97.19倍和111.58倍。IL-18mRNA转录水平在整个感染过程中表达量较低,在感染6h后微量上调(1.39倍),在感染中后期,其表达量呈下调趋势,感染48h时,IL-18mRNA表达量最低,与对照组相比下调0.19倍;5个不同滴度的ARV病毒感染CEF细胞24h后,3个细胞因子mRNA的表达量与病毒滴度线性相关,IL-17和IFN-γmRNA转录水平与病毒滴度正相关,IL-18mRNA转录水平与病毒滴度负相关。结果表明,ARV感染后可诱导CEF分泌IL-17、IL-18、IFN-γ的mRNA转录水平上调,说明IL-17、IL-18、IFN-γ可能与禽呼肠孤病毒的复制和致病机制相关。  相似文献   

网络语境下游客感知表征和投射形象比较研究——以济南千佛山风景区为例     

程建灿  袁莹  黄莉  王巧云  李霄鹤 《四川林业科技》2022,(4):109-116

为了探究风景名胜区游客感知与官方投射形象的差异化程度及原因,以济南千佛山风景名胜区作为研究对象,运用ROST CM软件对其官方网站与游客评论内容中的高频词汇分别进行筛选,进行维度、情感分析对比并绘制词云图和语义网络图,进而对研究地旅游形象投射和感知进行比较研究。研究表明：风景区官方投射与游客感知的形象具有一定的差异且风景区和游客最重视的旅游目的地要素是旅游资源,千佛山风景区具有积极正面的旅游形象且吸引游客的两大要素是“三大名胜”称号和地理位置优势。针对研究结果,提出以下四点建议：发挥风景区独特优势,打造多样活动场所,加强多方位宣传力度,建立健全媒体监督机制。  相似文献   

基于SOPARC和KDE视角下的嵩口古镇游客游憩行为研究     

邹诚  玄锦  王梓凌  黄莉  林润泽  曾真  李霄鹤 《山东林业科技》2021,(2):23-30

以福州市嵩口古镇为研究对象,采用游憩行为观察法(SOPARC)、核密度估算法(KDE)以及问卷调查法等方法来综合分析各类游客的游憩行为特点和嵩口古镇各类旅游景点的实际使用影响因素,运用核密度估算法深入探讨古镇各类游客的空间分布特征.研究结果表明:1)不同群体和性别的游客都倾向于游憩古镇,表明古镇被用于游憩的对象范围十分...  相似文献   

快速城镇化背景下行道树的生境胁迫及其适应性设计     

李岚彬  黄莉  郭联欢  闫淑君  黄启堂 《黑龙江农业科学》2019,(7)

快速城镇化进程对行道树生境造成巨大的威胁,严重制约了行道树的生长及其功能发挥,然而目前关于行道树生境的研究成果较为鲜见。本文通过对福州市5个市辖区72条不同功能区的道路进行调查,发现行道树生境存在空间不足、透水度差、地面覆盖结构简单等生境胁迫问题。在此基础上,从城市快速扩张、设计考虑不周、管护方式欠妥及部门管理权责不清等4个方面探讨其产生的原因,并提出了适应行道树生境的道路规划设计要点,旨在为福州市及其他地区道路规划设计以及行道树种植提供有益借鉴。  相似文献   

郴州市苏仙区近年稻瘟病发生特点 原因及综合防控对策     

黄莉 《现代农业科技》2019,(20)

苏仙区近年稻瘟病发生严重,通过全面调查,总结特点,分析原因,提出综合防控对策,初见成效。  相似文献   

花生种子白藜芦醇含量QTL定位分析     

喻博伦  黄莉  邱西克  郭建斌  姜成红  蔡岩  廖伯寿  姜慧芳  陈玉宁  刘念  陈伟刚  吕建伟  宋延滨  罗怀勇 《中国油料作物学报》2018,40(1):35

本研究利用“中花10×ICG 12625”衍生的RIL群体共140个家系及其亲本为材料，通过高效液相色谱检测各家系在2014年及2015年收获的花生种子中的白藜芦醇含量。结果表明，RIL群体白藜芦醇含量变异范围为38.27~352.08 μg/ kg。通过两年重复检测，获得稳定高白藜芦醇含量材料4份(QT0339、QT0369、QT0450和QT0454)，含量为143.90~215.60 μg/ kg，在2014年环境中，这四份材料白藜芦醇含量分别超过高值亲本32.31 %、5.80 %、86.46 %和79.52 %，在2015年环境中白藜芦醇含量分别超过高值亲本106.04 %、49.78 %、7.90%和52.87%。利用前期通过该群体构建的遗传连锁图谱，应用WinQTLCart 2.5软件定位到花生种子白藜芦醇含量相关QTL13个，贡献率在2.2 %~7.4 %之间，其中qRB8.1a以及qRB8.1b为两年环境中重复检测到的QTL。本文研究结果为培育白藜芦醇含量高的花生新品种提供理论依据。  相似文献   

禽呼肠病毒S1基因编码蛋白合成机制研究进展     

谭伟  黄莉  谢芝勋 《动物医学进展》2018,(4)

禽呼肠病毒是正呼肠病毒属的重要成员之一,能感染禽类,直接危害肉鸡、蛋鸡、幼龄火鸡和雏番鸭的生长发育,甚至引起死亡,从而导致严重的经济损失。近年来,人们对禽呼肠病毒分子生物学方面的研究已有不少进展,特别是关于禽呼肠病毒的S1基因编码蛋白的机制。禽呼肠病毒的基因组含有10个双链RNA基因片段,其中的9个基因片段均是以核糖体扫描翻译机制来合成对应的病毒蛋白。但S1基因片段的结构较为特殊,其RNA基因片段含有3个相互重叠的基因编码区,并利用不同的翻译机制分别合成3种蛋白,即非结构蛋白p10、p17和结构蛋白σC。这3种蛋白的主要作用分别是引起病毒感染的细胞与周围正常细胞之间的融合,促进病毒在细胞内的繁殖,帮助病毒吸附易感细胞表面的受体等。论文着重介绍禽呼肠病毒S1基因编码蛋白的相关合成机制。  相似文献   

草石蚕新型垄式复合栽培技术应用及对产业可持续发展的初步探讨   总被引：2，自引：0，他引：2  

李程  郭松  王志强  裴红霞  黄莉 《宁夏农林科技》2019,(3)

以贺兰县地方特色蔬菜草石蚕为试材,采用了新型垄式复合栽培方法,技术构成包括:茬口设计、整地起垄、播种、复合套种、田间管理、病虫害综合防治、采收分级、选种和留种等内容。此外,对产业的可持续发展进行了5个方面的初步探讨。  相似文献   

转基因烟草中外源基因实时荧光定量PCR检测方法的建立     

王盛  谢芝勋  谢丽基  谢志勤  黄莉  罗思思  邓显文  黄娇玲  刘加波 《广西农业科学》2015,46(5)

[目的]建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法,为转基因植物中外源基因拷贝数的检测提供参考.[方法]采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,检测转基因烟草中外源绿色荧光蛋白基因(GFP)的拷贝数,以烟草单拷贝的内源核糖核酸还原酶基因(RNR2)作为内参基因,建立相对定量的双标准曲线法检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法.[结果]构建RNR2基因、GFP基因实时荧光定量PCR的标准曲线,分别为y=-0.2858x+5.6695和y=0.2826x+2.1048,R2分别为0.9994和0.9989,相关性较高.在检测的5株转基因烟草中GFP基因的拷贝数分别为5、8、19、28和45,非转基因烟草植株的GFP基因拷贝数为0.[结论]建立的转基因烟草中外源基因SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法具有简单、快速、准确等优点,可用于基因工程中对优良转化植株的筛选及外源基因表达量的快速检测和定量分析.  相似文献   

8种猪呼吸道和繁殖障碍病病原体GeXP检测方法的建立   总被引：4，自引：0，他引：4  

张民秀  谢芝勋  邓显文  谢志勤  谢丽基  黄莉  黄娇玲 《中国农业科学》2015,48(24):4996-5006

【目的】建立了一种同时鉴别H1、H3亚型猪流感、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪瘟、猪日本乙型脑炎、猪圆环病毒病、猪细小病毒病和猪伪狂犬病8种病毒性呼吸道和繁殖障碍病病原体的GeXP 高通量检测方法。【方法】根据这8种病原体的基因保守序列,设计并合成了9对特异性引物, 在每对特异性引物的5′端均加上一段通用引物,形成特异性嵌合引物。运用GeXP单重PCR方法,以单一病毒cDNA/DNA为模板验证引物的可行性;建立GeXP多重PCR方法,以单一病毒cDNA/DNA模板、阳性cDNA/DNA混合模板验证GeXP多重检测体系的特异性和准确性;将含猪圆环病毒、猪细小病毒和猪伪狂犬病病毒靶基因的克隆质粒及体外转录的RNA（H1、H3亚型猪流感、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪瘟、猪日本乙型脑炎）分别梯度稀释为10³,10²,10¹拷贝/µL,运用GeXP多重PCR方法进行单一病原体灵敏度分析;根据单一病原体的灵敏度分析结果,优化各对特异性嵌合引物的工作浓度,将含有体外转录好的6种RNA模板和3种克隆质粒等量混合,将混合物梯度稀释为10⁴,10³,10²,10¹拷贝/µL,运用GeXP多重PCR方法分析同时检测8种病原体的灵敏度。运用建立好的GeXP多重检测体系对23份临床样品进行检测,并与常规单重PCR进行比较,对该GeXP多重检测体系的临床应用进行评价。【结果】基于GeXP系统的单重PCR检测体系和GeXP多重PCR检测体系均能扩增出特异性片段,验证了引物的可行性、GeXP多重检测体系的特异性和准确性;GeXP多重检测体系的单一病原模板灵敏度分析结果显示,多重检测体系对单一病原体检测的下限均为10¹拷贝/µL;GeXP多重检测体系在8种病原体同时检测的灵敏度分析结果显示,多重检测体系可在10³拷贝/µL水平可同时检测到8种病原体;比较GeXP多重PCR检测方法和常规PCR方法对临床样品的检测结果,两种检测方法的检测结果相符。【结论】成功建立了基于GeXP系统的多重PCR检测体系,可以同时检测8种猪呼吸道和繁殖障碍性疾病病原体;本研究建立的同时鉴别8种猪呼吸道和繁殖障碍性疾病病原体的GeXP检测方法具有高通量、特异性强和灵敏度高的特点,为猪病毒性呼吸道和繁殖障碍性疾病的分子诊断提供了新型的检测方法。  相似文献