家蚕空泡型ATP酶（V-ATPase）基因的基本信息及表达特征   总被引：1，自引：0，他引：1  

王鑫  李懿  陈全梅  衣启营  谢康  吴用  赵萍 《中国农业科学》2014,47(8):1611-1621

【目的】鉴定家蚕（Bombyx mori）中的空泡型ATP酶（vacuolar-type ATPase, V-ATP酶）A、B亚基的编码基因,并调查其在家蚕幼虫5龄第3天不同组织和上蔟时期丝腺不同区段的表达特征。【方法】利用生物信息学的方法鉴定家蚕的V-ATP酶A、B亚基的编码基因并在线预测V-ATP酶两个亚基所具有的结构域,采用软件将其分别与其他物种中V-ATP酶A、B亚基的氨基酸序列进行同源序列比对和进化树的构建,通过荧光定量PCR技术分析家蚕V-ATP酶A、B亚基的编码基因在5龄第3天家蚕各组织的表达情况。进一步利用向家蚕幼虫上蔟时期的气孔注射pH值指示剂溴酚蓝,对丝腺进行染色,通过颜色变化对丝腺不同区段的pH值进行调查。最后,采用荧光定量PCR对家蚕上蔟时期丝腺不同区段V-ATP酶A、B亚基编码基因的表达情况进行分析。【结果】获得了家蚕V-ATP酶A、B亚基的编码基因BGIBMGA008295(GenBank登录号NM_001098359.1)和BGIBMGA002241(GenBank登录号NM_001098358.1)。结构域预测发现这两个亚基均具有3个非常保守的结构域,分别为位于N端的β筒结构域、序列中部的核苷酸结合结构域和C端结构域。将这两个基因编码的V-ATP酶A、B亚基的氨基酸序列与其他物种V-ATP酶A、B亚基的氨基酸序列进行同源性比对和进化树的构建,同源比对结果发现不同物种中V-ATP酶A、B亚基的氨基酸相似度为90%,保守结构域间相似度高达95%以上,说明不同物种间V-ATP酶A、B亚基高度保守。进化树显示家蚕V-ATP酶A、B亚基与同属于鳞翅目的其他昆虫的V-ATP酶A、B亚基亲缘关系较近。5龄第3天家蚕各组织中V-ATP酶A、B亚基编码基因的荧光定量PCR结果显示,这两个基因主要在中肠、脂肪体、生殖腺和丝腺中表达。使用溴酚蓝染色的方法分析上蔟期丝腺不同区段的pH情况,结果显示家蚕后部丝腺、中部丝腺后区和中区为中性或碱性环境,中部丝腺前区pH急剧下降到酸性环境,前部丝腺也为酸性环境。进一步对V-ATP酶A、B亚基编码基因在上蔟期丝腺不同区段进行表达情况分析,发现V-ATP酶A、B亚基基因在前部丝腺和中部丝腺前区高量表达,推测V-ATP酶可能与这两个区域低pH环境的产生和维持相关。【结论】明确了V-ATP酶在家蚕各组织的表达情况,V-ATP酶可能与中部丝腺前区和前部丝腺腺腔的酸化相关,这为进一步研究V-ATP酶的生理功能提供了理论依据。  相似文献   

副猪嗜血杆菌感染豚鼠试验及在其体内的分布   总被引：1，自引：0，他引：1  

高鹏程  储岳峰  赵萍  贺英  逯忠新 《畜牧兽医学报》2009,40(9)

为了评估副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)对豚鼠的毒力以及在豚鼠组织器官的分布,作者采用改进的寇氏法测定了H.parasuis血清5型标准株对豚鼠的LD50,以1 LD50剂量经鼻腔、气管、肺、腹腔、肌肉和皮下接种感染豚鼠,比较不同途径感染H.parasuis对豚鼠致病性的差异;以1 LD50剂量气管接种豚鼠,接种后在不同时间取豚鼠的脑、心、肝、肺、脾和肾组织,制作石蜡切片,用免疫组化技术检测H.parasuis在豚鼠上述组织的分布.结果显示该H.parasuis血清5型标准株的LD50为1.33×109 CFU,LD50的95%可信限范围为1.35×109～1.30×109 CFU;感染试验结果显示,气管、肺和腹腔3个接种途径试验组豚鼠出现了4/8、2/8和5/8的死亡;在气管感染豚鼠6 h后,首先在肺脏组织呈现阳性结果,在感染8 h后,上述组织中都出现了阳性结果.结果表明气管、肺、腹腔和肌肉4个途径都可以使H.parasuis对豚鼠致病,免疫组化检测并结合细菌分离结果表明H.parasuis感染后能侵染肺、心、肝、脾和肾组织,并能突破血一脑屏障而侵染脑组织.  相似文献   

《40个基因组完全重测序揭示蚕的驯化事件及其相关基因》在线支撑材料     

夏庆友  郭一然  张泽  李东  玄兆伶  李卓  代方银  李英睿  程道军  李瑞强  程廷才  蒋涛  赛琳·贝凯  徐讯  刘春  查幸福  樊伟  林英  沈以红  蒋岚  杰弗里·詹森  伊恩丝·黑尔曼  唐思  赵萍  徐汉福  余昶  张国捷  李俊  曹建军  刘仕平  何宁佳  周妍  刘慧  赵静  叶辰  杜周和  潘国庆  赵爱春  邵浩靖  曾巍  吴平  李春峰  潘敏慧  李晶晶  殷旭阳  李大为  王娟  郑会松  王文  张秀清  李松岗  杨焕明  鲁成  瑞斯摩·尼尔森  周泽扬  汪建  向仲怀  王俊 《蚕学通讯》2009,29(3):7-30

1材料与方法 1．1样品收集 为了囊括全世界实验室所保存的主要的蚕系统,我们收集了各种的地理区域的品系,如中国、日本、欧洲和热带地区（主要是东南亚：印度,柬埔寨和老挝）,和突变系统。列于表S1的29个家蚕品系来自中国西南大学蚕学与系统生物学研究所。  相似文献   

复合PCR鉴定胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌方法的建立及初步应用   总被引：2，自引：1，他引：1  

贺英  赵萍  储岳峰  高鹏程  逯忠新  赵海燕 《江西农业大学学报》2009,31(1)

在已经建立的胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件和引物的筛选,成功地建立了APP、HPS复合PCR诊断方法,利用一次PCR反应,即可同时扩增APP的442 bp,和HIS的1090 bp的特异性片段,并应用于临床检测.该方法的建立对临床上进行这2种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义.  相似文献   

绿色生机腐植酸叶面肥在番茄上的应用效果   总被引：2，自引：0，他引：2  

吴迪  赵萍  黄立梅 《现代农业科技》2009,(20):103-104

为验证绿色生机腐植酸蔬菜专用型叶面肥在蔬菜上的应用效果,探讨其最佳施用浓度,进行了番茄叶面喷施肥效试验。结果表明：喷施叶面肥可明显改善番茄农艺性状,显著提高产量和品质,其中800倍稀释液叶面喷施处理的番茄产量最高,较清水对照增产15.1t/hm2,增幅14.7%;果实中VC、可溶性蛋白和可溶性糖含量最高,分别增加41.9%、33.0%和50.0%,有机酸含量最低为3.80mg/g.Fw,糖酸比提高到适宜水平为13.21,为推荐施用浓度。  相似文献   

玉米大垄双行深耕施肥播种机设计与试验     

赵萍  张焕章  田悦  王瑞丽  吕长义 《吉林农业大学学报》2018,(2)

针对东北地区玉米大垄双行种植的农艺要求,同时考虑机具多次进地造成的频繁扰动及压实土壤、播种对行困难、动力消耗大等问题,研制了一种玉米大垄双行深耕施肥播种机,该机可在一个作业行程内完成土壤深松、分层施肥、起垄整形、播种覆土等多项作业。通过经验设计并结合理论计算确定了排肥部件、仿形连接机构、整垄装置及播种装置的结构及参数,对关键受力部件机架进行了有限元分析与优化。样机田间试验结果表明:该机垄形平整,播深合格率为93.30%,株距合格率为96.25%,漏播指数为2.5%,重播指数为3.75%,整地和播种均能达到行业标准及农艺要求。  相似文献   

天然色素及枸杞色素的提取和抗氧化作用的研究进展     

吴灿军  赵萍  王雅  张轶  杨明峰 《陕西农业科学》2010,56(1):103-107

天然色素常被应用于食品、医药、纺织、化工等领域,有着非常广阔的市场前景。枸杞色素是天然食用色素主要的一种,它资源丰富,来源广泛,营养价值高,因此从枸杞里面提取色素并进行开发研究是近年的热点。本文主要对天然食用色素的发展、分类、特点、性质、提取、纯化技术、稳定性、抗氧化性和枸杞色素的研究情况进行了全面的综述,为色素的进一步开发和研究提供了科学的参考和依据。  相似文献   

副猪嗜血杆菌分型血清的制备及其在流行病学研究上的应用     

储岳峰  高鹏程  赵萍  贺英  樊祜卿  逯忠新  赵海燕 《江苏农业学报》2010,26(5)

用副猪嗜血杆菌1~15血清型参考菌株和2株澳大利亚分离株高免健康家兔制备副猪嗜血杆菌分型血清,建立副猪嗜血杆菌KRG血清学分型方法(基于热稳定抗原免疫扩散试验的血清学分型方法),并用该方法对田间分离的62株副猪嗜血杆菌进行血清型鉴定。结果顺利制备出了副猪嗜血杆菌15个血清型菌株的分型血清,建立了副猪嗜血杆菌KRG分型方法,62株副猪嗜血杆菌分离株中血清5型占22.5%、4型占16.1%、12型占14.5%、不能分型的菌株占16.2%。试验建立的副猪嗜血杆菌KRG分型方法,可为中国副猪嗜血杆菌血清学分型提供技术支持;血清型5、4、12为中国部分地区近2年最流行的血清型,为副猪嗜血杆菌病的防制提供了有效的参考依据。  相似文献   

铁皮石斛的种子培养   总被引：10，自引：0，他引：10  

谢启鑫  宋小明  黄东华  李宝光  赵萍 《北方园艺》2010,(8):90-91

以铁皮石斛成熟种子为外植体,研究原球茎的诱导、增殖、分化和生根的最佳培养条件。结果表明:1/2 MS基础培养基最适合铁皮石斛的种子培养,45 d时原球茎诱导率达到95%;原球茎增殖的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+20%马铃薯提取液,每代增殖16倍,原球茎形态好、变异少;原球茎团于1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.25 mg/L+20%马铃薯提取液的培养基上可诱导丛芽分化,于MS+NAA 0.5 mg/L+20%香蕉汁+活性炭5g/L的培养基上易于诱导不定根的形成,60 d后可形成健壮的完整小植株。  相似文献   

温度和光照对金边瑞香花芽分化的影响   总被引：5，自引：0，他引：5  

黄冬华  周超华  宋小民  陶秀花  谢启鑫  李宝光  赵萍 《园艺学报》2010,37(10):1685-1689

研究了温度和光照对金边瑞香花芽分化的影响,温度是影响金边瑞香花芽分化的主要因子,20 ~ 25 ℃金边瑞香植株可以完成花芽分化的各个过程,10 ~ 18 ℃植株一直处于营养生长状态而未进行花芽分化。金边瑞香花芽分化对光周期不敏感,但散射光比直射光更有利于其花芽分化。  相似文献