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21.
融合表达猪圆环病毒2型ORF1和ORF2基因真核质粒的构建及对小鼠的免疫原性 总被引:2,自引:0,他引:2
用PCR法扩增出猪圆环病毒2型的Rep蛋白基因(933bp)和Cap蛋白基因(705bp),将其定向克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点上,构建真核表达质粒pcDNA-ORF1-ORF2。将构建好的重组质粒pcD-NA-ORF1-ORF2按100μg/只腿部肌肉注射BALB/c小白鼠,同时设pcDNA-ORF1、pcDNA-ORF2、pcDNA3.1-(+)、PCV2全毒疫苗和PBS为对照,共免疫2次,间隔2周。分别于首免后第0、7、14、21、28、42天用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖效应,用ELISA法检测小鼠的抗体水平;并于首免后第0、7、14、21、28天测定脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例,对该核酸疫苗的免疫原性进行初步评价。结果显示,重组质粒能诱导鼠体产生较强的细胞免疫和体液免疫,并从免疫后第7天起所测各组数据均显著高于(P〈0.05)或极显著高于(P〈0.01)其他试验组。结果表明,将ORF1和ORF2基因共同用于PCV2核酸疫苗的研发具有很好的前景,为研究新型猪圆环病毒疫苗奠定了基础。 相似文献
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1 试验材料与方法 1.1 材料:选用1991年我司自产的杂交稻种汕优63、协优63两组合;小包装袋为省种子部门统一制作使用的无毒、微透气、包装量为1.5公斤的无色透明塑料袋。 1.2 方法:1991年11月,对两组试验材料选择含水量分别为11%、12%、13%、14%、15%的五个等级种子作为处理,每处理装种1.5公斤,机械密封, 相似文献
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夏秋季节湿润多雨,正是采集野生蘑菇的好时机,由于蘑菇种类繁多,形态相似,如果误食了毒菌,1个50克重的极毒蘑菇足可致死1个人。蘑菇中毒具有一般食物中毒的特点。因此在发病初期容易被误认为是一般的食物中毒。又由于剧烈地吐、泻,也会误认细菌性痢疾或肠炎等其它病症。一般食蘑菇中毒有以下症状:1)中毒后出现剧烈恶心、呕吐、腹痛、腹泻。2)流口水、流泪、出虚汗、昏迷、精神烦躁不安、抽风。3)肝大、肝痛、黄疸、血转氨酶增高、全身痛痒发紫。因此不能随便采食不认识的蘑菇,必须找有经验的人识别之后,方可食用。现将常见的几种毒蘑菇介绍如下: 1 毒伞Amanita phalloides别名毒鹅膏 菌盖径4~9厘米,钟形,渐凸起至扁平,后中部钝或稍凸起,盖面湿时稍粘,干时有丝光,有放射状暗条纹,灰绿色,中部色暗,盖 相似文献
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采用水域浮床无土栽培技术,在池塘表面种植生菜。结果表明:此技术是一种资源节约型的可循环无公害耕作模式,能够提高SD,降低TN、NH4+-N、NO2-N、NO3-N、TP、COD等污染物的含量。10%和20%处理组对TN、NH4+-N、NO2-N、NO3-N、TP、COD的去除率分别为5.63~35.22、10.00~41.46、13.11~39.47、6.67~43.48、33.33~42.31、2.17~16.23和8.12~36.20、20.00~46.34、22.95~48.72、13.33~35.29、33.33~46.15、3.13~19.41,去除效果显著大于对照组达到净化养殖水体的效果。同时,生菜是一种可食用的常见蔬菜,能够提高养殖者的经济收入。 相似文献
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设计1对针对猪圆环病毒2型(PCV2)全基因组的特异性引物,从疑似断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的病料中经PCR直接扩增出PCV2全基因组,再与载体pMD18-T Simple连接后构建重组质粒pMD18-T Simple-PCV2(命名为P-S-PCV2)。用ORF9特异的限制性内切酶Bpu10Ⅰ对P-S-PCV2进行酶切、补平连接反应,构建了ORF9基因缺失突变的重组质粒(命名为P-S-PCV2-J)。用SacⅡ对基因缺失突变的重组质粒进行酶切,获得的线性化基因突变PCV2基因组在体外进行自身环化,形成了相应缺失基因DNA(命名为PCV2-J)。用PCV2-J缺失突变株进行细胞转染、动物致病性和免疫原性、T淋巴细胞亚群的动态变化等部分生物学特性的研究。结果显示:PCV2-J转染IBRS-2细胞后,电镜观察可见病毒颗粒,PCR-RFLP检测有突变株生长;PCV2-J接种仔猪后无临床典型大体病变,PCR-RFLP检测淋巴结中有PCV2-J突变病毒的感染;PCV2-J免疫仔猪后的抗体水平在第2周开始上升,与对照组相比差异显著,CD3+下降,与对照组无差异,CD4+下降,第1周与对照组差异显著,CD8+与对照组差异不显著。结果表明,ORF9基因缺失突变的PCV2仍具有复制感染能力,但免疫原性减弱。 相似文献
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为了研究四川乐山某猪场爆发的保育猪严重呼吸道疾病的主要病原,试验采用病理剖检、病毒检测、细菌分离鉴定、生化鉴定、动物回归试验以及多杀性巴氏杆菌种特异性KMT基因的PCR检测对病原进行鉴定。结果表明:发病猪有严重肺炎症状,支气管内部有少量泡沫,腹股沟淋巴结出血、水肿,其他实质器官未见明显病理变化;病毒检测结果显示为蓝耳病病毒阳性,猪瘟病毒、伪狂犬病毒、圆环病毒2型阴性;从病猪肺脏中分离获得大肠杆菌和1株蓝耳病病毒继发的高致病性多杀性巴氏杆菌;该分离菌株对多种药物均高度敏感。 相似文献
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