克伦特罗残留GC-MS检测方法的建立及对自制试纸条性能的确证     

邓瑞广  张海棠  王自良  钟华  张改平 《中国农学通报》2008,24(11):32-37

建立了猪尿液中盐酸克伦特罗（CL）残留的GC-MS检测方法,并对自主研制的CL残留快速检测免疫金标试纸条（CL-Strip）进行了比较分析。结果表明,GC-MS的检测限为0.5ng/ml,CL-Strip的检测限为1.0ng/ml;CL-Strip与GC-MS两者的加标测定实验结果完全一致;用CL-Strip检测出的100份阴性尿样和18份阳性尿样,与GC-MS检测结果完全一致。说明CL-Strip与GC-MS同样灵敏、准确、稳定,由于CL-Strip具有简便、直观、快速、敏感、特异、准确等优点,建议在CL残留快速检测中推广应用。  相似文献   

克伦特罗残留GC-MS检测方法的建立及对自制试纸条性能的确证     

邓瑞广  张海棠  王自良  钟华  张改平 《勤云标准版测试》2008,(11)

建立了猪尿液中盐酸克伦特罗(CL)残留的GC-MS检测方法,并对自主研制的CL残留快速检测免疫金标试纸条(CL-Strip)进行了比较分析.结果表明,GC-MS的检测限为0.5ng/ml,CL-Strip的检测限为1.0ng/ml:CL-Strip与GC-MS两者的加标测定实验结果完全一致;用CL-Strip检测出的100份阴性尿样和18份阳性尿样,与GC-MS检测结果完全一致.说明CL-Strip与GC-MS同样灵敏、准确、稳定,由于CL-Strip具有简便、直观、快速、敏感、特异、准确等优点,建议在CL残留快速检测中推广应用.  相似文献   

仔猪大肠杆菌病多价卵黄抗体粉的特性及应用   总被引：23，自引：0，他引：23  

李学伍  张改平  阎玉河  邓瑞广 《中国兽医杂志》2000,26(10):56-57

仔猪大肠杆菌病所导致的仔猪腹泻占仔猪腹泻病的 45 %,造成的经济损失相当惊人 ,历史较长的老场 ,其大肠杆菌的血清型越多 ,有的猪场血清型多达 40余种 ,加之这些菌株抗药范围不断扩大 ,对该病的控制极为不利。多价卵黄抗体粉既无毒副作用 ,长期使用又不使菌株产生耐药性 ,对治  相似文献   

抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定   总被引：5，自引：4，他引：1  

王自良  张改平  杨艳艳  张海棠  王选年  邓瑞广 《核农学报》2006,20(4):336-340,317

苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1∶19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶8.1×102,腹水为1∶6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR。本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验。  相似文献   

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体识别的抗原表位分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

肖治军  张改平  杨汉春  杨艳艳  李学伍  邓瑞广  赵东 《河南农业科学》2006,(11):105-109

用鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)及其重组表达蛋白VP2,VP3和单抗做各种ELISA试验,测定单抗识别的IBDV蛋白抗原及其多肽片段,并分析单抗识别IBDV抗原表位的空间关系。结果表明,抗IBDV单抗A,B,C,D,E,G与重组表达蛋白VP2呈阳性反应,而与表达蛋白VP3呈阴性反应,单抗C与表达蛋白VP2和VP3均呈阳性反应;单抗A,B,D,E,G识别IBDV VP2蛋白上相近或相似的抗原表位,均识别VP2蛋白多肽序列PJ1,PJ2,PJ5,PJ14,属于同一类群的构像性单克隆抗体。  相似文献   

IPMA筛选猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体方法研究     

杨艳艳  乔松林  李睿  郭军庆  李青梅  滕蔓  王丽  赵东  李学伍  邓瑞广  张改平 《华北农学报》2019,34(3)

为了得到一种能够高通量检测细胞培养物的方法,并将其用于筛选特异性强、敏感度高的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体。用每孔能感染约100个细胞的病毒量接种单层覆盖96孔板的Marc-145细胞,12 h后用含3%H_2O_2的甲醇固定细胞,以制备免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)反应板。以100μL/孔的量将融合后继续培养10 d的杂交瘤细胞的培养上清加入至IPMA反应板,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG-HRP作为二抗,以3-氨基-9-乙基咔唑(AEC)作为显色底物,于倒置显微镜下进行观察。结果表明,共筛选出1D1、7G8等39份PRRSV单克隆抗体,这39份单抗能够使PRRSV中高致病毒株HN07-1和经典毒株BJ-4感染的Marc-145细胞被特异性染色,而对猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻病毒感染的Marc-145细胞无交叉染色。因此,构建的IPMA方法能够敏感、准确地捕捉到PRRSV单克隆抗体。  相似文献   

Ⅰ型与Ⅱ型IBDV前体多聚蛋白B细胞抗原表位的预测与比较     

肖治军  张改平  乔松林  赵东  李学伍  邓瑞广  杨艳艳  邢广旭  郅玉宝  杨继飞  柴书军 《中国家禽》2009,31(21)

用生物信息学方法比较了GenBank中9株Ⅰ型IBDV与2株Ⅱ型IBDV基因片段A前体多聚蛋白的推导氨基酸(aa)序列,预测并分析了上述两型IBDV毒株前体多聚蛋白的线性B细胞抗原表位.结果表明,两型IBDV毒株的前体多聚蛋白有75个aa残基的差异,其上大多数预测B细胞抗原表位的位置及其指数值均无明显差异;但两型IBDV在第3～10位中的aa残基差异影响了该序列肽的预测指数和结构,以及与Ⅰ型IBDV多抗的反应性.  相似文献   

磺胺二甲基嘧啶残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及其性能测定   总被引：2，自引：1，他引：1  

张改平  刘庆堂  邓瑞广  杨苏珍  李学伍  赵东  邢广旭 《中国预防兽医学报》2009,31(1)

应用磺胺二甲基嘧啶(SM2)单克隆抗体(mAb)成功研制出SM2残留快速检测阻断ELISA试剂盒(SM2-Kit).研究结果表明,SM2-Kit的标准曲线呈典型的S型,相关系数R2=0.9911,符合4参数logit曲线拟合,线性检测范围为0.625μg/L～80μg/L,灵敏度为0.9 μg/L,半数抑制浓度(IC50)为5.82μg/L,检测限为1μg/L;饲料样、猪尿样的平均添加回收率分别为83.4%、89.5%,平均批内和批间变异系数均低于15%;SM2-Kit与磺胺甲基嘧啶的交叉反应率(CR%)为2.08%,与其它磺胺类药几乎没有反应性;基质对SM2-Kit的检测结果影响不大;试剂盒在4℃可保存6个月.  相似文献   

动物病毒microRNA的研究进展     

薛白  王树芬  鲍登克  邓瑞广  李学伍 《河南农业科学》2012,41(6):15-18

MicroRNAs(miRNAs)是一种含有约22～25个核苷酸的非编码单链RNA分子,广泛存在于人类及其他各种生物中。它通过与靶mRNA特异性的碱基互补配对,引起靶mRNA降解或者抑制其翻译,从而调节基因的转录后表达水平。病毒microRNA是新发现的一类miRNA,综述了近年来病毒microRNA的产生、作用机制、生物学功能及其在动物上的研究进展。  相似文献   

盐酸金霉素人工抗原的合成及鼠源多抗血清的制备     

李靓  职爱民  李青梅  刘庆堂  侯玉泽  胡骁飞  邓瑞广  张改平 《河南农业科学》2012,41(7):138-141

采用碳二亚胺法将金霉素(chlortetracyline,CTC)偶联到载体蛋白BSA(牛血清白蛋白)和OVA(鸡卵清蛋白)上,形成免疫原BSA-CTC与包被原OVA-CTC。通过紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行抗原鉴定,用间接ELISA测定多抗血清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性。结果表明,在UV下出现了明显特征峰,BSA-CTC的峰与BSA、CTC相比均发生改变,表明半抗原与载体成功偶联。共免疫了5只小鼠,pAb效价均达到1×10-3,其中3号小鼠多抗血清抑制效价最低,IC50(半数抑制质量浓度)为71.47ng/mL。由此得出,获得了高效价、强特异的盐酸金霉素多抗血清,为盐酸金霉素单抗的制备奠定了基础。  相似文献