实时荧光定量聚合酶链反应原理和在预防兽医学中的应用及研究进展     

曹军平  刘秀梵 《中国动物检疫》2008,25(7):56-57

聚合酶链反应(PCR)是检测核酸的强力方法。由于PCR技术简便易行、灵敏度高等优点,该技术被广泛应用于基础研究,成为分子生物学必不可少的研究工具。由于传统的PCR技术存在不能准确定量,且操作过程中易污染而使得假阳性率高等缺点,使其应用受到局限。  相似文献   

抗精神分裂症药物对吐鲁番斗鸡5-HTT和TPH1基因表达的影响     

张梅  张苗苗  李岩  张璐  刘秀霞  李一丹  钟新献  李应生  李海英  常国斌  陈国宏  廖和荣 《中国畜牧兽医》2018,45(2):510-517

为探讨不同抗精神分裂症药物对吐鲁番斗鸡攻击行为影响的分子机理,试验将36只斗鸡随机分为12组,并选取利培酮、阿立哌唑、盐酸曲唑酮、盐酸舍曲林4种抗精神分裂症药物,且每种药物设有低剂量组（L）、正常剂量组（N）及高剂量组（H）,每天人工口服给药。分别在第1、2、5、8、11、14天时,翅下静脉采血,并采用实时荧光定量PCR法对口服不同剂量药物的吐鲁番斗鸡各阶段血液中5-羟色胺转运体（5-hydroxy-tryptamine transporter,5-HTT）、色氨酸羟化酶1（tryptophan hydroxylase 1,TPH1）的mRNA表达量进行检测。结果显示,口服4种药物后,利培酮组和阿立哌唑组斗鸡血液中5-HTT、TPH1基因mRNA的表达变化具有相似性,5-HTT基因整体呈下降趋势,TPH1基因均表现为波动性上升,且利培酮组TPH1基因mRNA的表达量及上升幅度高于阿立哌唑组;盐酸曲唑酮组和盐酸舍曲林组5-HTT基因mRNA的表达均从第5天开始呈直线上升,并于第14天达到峰值,且盐酸舍曲林组TPH1基因的表达呈微上调,盐酸曲唑酮组则无明显变化。利培酮组和阿立哌唑组斗鸡攻击行为减弱与其血液中5-HTT基因mRNA的低表达有关,本试验结果为进一步研究药物影响吐鲁番斗鸡攻击行为的分子机理提供了重要参考依据。  相似文献   

我国禽病的流行动态及防控策略     

刘秀梵  张小荣 《兽医导刊》2018,(19)

正一、新城疫新城疫多年来困扰我国养禽业发展:1990年以来,免疫鸡群非典型ND频发,水禽特别是鹅发生临床ND,引起大批死亡;其他禽种发生ND屡屡报道。近5年来,情况发生了巨大变化:免疫鸡群非典型ND极少发生,鹅发生临床ND得到控制,很少分离到强毒;其他禽种(除鸽外)发生ND报道减少;规模养殖场很难分离到ND强毒。  相似文献   

H5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律的研究   总被引：16，自引：5，他引：11  

薛峰  张评浒  刘晓文  唐应华  龙进学  高崧  刘秀梵 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2005,26(2):1-3

通过对父母代肉鸡、水禽禽流感病毒H5血清血凝抑制抗体水平连续跟踪监测。探讨Hs亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律。结果表明：雏鸡7日龄时母源抗体水平达最大值,20日龄时母源抗体下降到极低水平,雏鸡最佳首次免疫日龄为10日龄左右,二次免疫应根据鸡群母源抗体水平于首次免疫后100d左右进行。雏鹅、鸭3日龄进行首次免疫,水禽对禽流感疫苗产生良好的免疫应答,并于免疫后25-30d达到抗体高峰,但首次免疫抗体维持时间不长,最佳二次免疫时间应在首次免疫后30d左右进行。  相似文献   

新城疫病毒F48E8株核衣壳蛋白基因在鸡痘病毒中的表达及其部分序列分析     

姜焱  刘伟忠  吴艳涛  彭大新  张如宽  刘秀梵 《农业生物技术学报》1999,7(3):231-236

通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增了新城疫病毒(NDV)F48E8株核衣壳蛋白(NP)基因,并克隆到pUC18中,得阳性克隆pUCNP.应用分子克隆技术,将NP基因导入鸡痘病毒(FPV)转移载体pFG1175-1中P7.5启动子的下游,得到含NDV NP基因的质粒pFGNP1175-1.利用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV疫苗株282E4感染3～4 h的鸡胚成纤维细胞,采用蓝斑筛选方法纯化多次,得到稳定的重组FPV.用狄高辛标记的探针进行斑点杂交实验,结果表明pFGNP1175-1已与FPV 发生同源重组;用抗NDV的SPF鸡的阳性血清进行间接免疫荧光实验,证实重组FPV在感染细胞中表达了F48E8株NP蛋白.该基因两端部分序列与已发表的D26株NP基因对应区域的核苷酸同源性为89.1%,推断的氨基酸同源性则为93.1%.  相似文献   

我国部分地区禽病原性大肠杆菌的分离与鉴定   总被引：70，自引：4，他引：66  

高崧  刘秀梵  张如宽  焦新安  文其乙  吴长新  唐一鸣  朱晓波  李琮  陈娟  崔力兵  崔洪平 《畜牧兽医学报》1999,30(2):164-171

从江苏、广东、河南、新疆、四川、北京、黑龙江等１８个省、市、自治区临 有典型大肠杆菌病病变的病禽１０５１羽采集病料,分离培养和鉴定出５９５株大肠杆菌。经Ｏ血清型测定,除１４４株未能定型、１１株自凝外,共出４４０个分离株的Ｏ血清型。这些 ５０个血清型,但以Ｏ１８、Ｏ７８、Ｏ２、Ｏ８８、Ｏ１１、Ｏ２６、Ｏ４、为、Ｏ１２７６、Ｏ１３１等１０个血清型为主,这些分离株覆盖了６０个血清型,但以血Ｏ１８、Ｏ７８  相似文献   

新城疫病毒特异性糖蛋白基因探针的制备及应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘伟忠　姜　焱吴艳涛  张如宽刘秀梵 《畜牧兽医学报》1999

  相似文献   

鸡Toll样受体15单克隆抗体的制备及其初步应用     

李梦妮  王航  傅思瑶  杨梓纯  许炎辉  樊毛迪  高崧  刘秀梵 《畜牧兽医学报》2022,53(2):576-587

旨在制备鸡Toll样受体15 (ChTLR15)的特异性单克隆抗体(mAb),并初步应用.利用PCR技术扩增ChTLR15第162-386位氨基酸,克隆于载体pET-30a中进行诱导表达,获得高纯度的重组ChTLR15 (162-386 aa)蛋白.然后采用皮下多点注射方式将ChTLR15免疫6周龄的雌性BALB/c小...  相似文献   

基于植被供水指数的藏北地区土壤湿度反演研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

周逍峰  聂艳  刘秀芸  梁美盈  谭盈  于婧 《中国农业信息》2018,30(4):95-106

【目的】利用光学遥感数据获取的植被供水指数来反演西藏那曲地区的土壤湿度,结合高分辨率的遥感数据(GF-1)和中低分辨率的遥感数据(Landsat、MODIS)分别建立土壤湿度反演模型,通过比较不同空间尺度反演模型的精度和适用性,拓宽国产高分遥感数据在农牧业信息定量获取等方面的应用范围,为"天地网一体化"的现代农业信息获取和农情信息遥感监测提供理论基础。【方法】以西藏那曲地区为研究区,以代表高、中、低分辨率卫星数据的高分一号(GF-1)、Landsat-8及MODIS影像数据和土壤湿度实测数据为数据源,利用植被供水指数(Vegetation Supply Water Index,VSWI)构建土壤湿度反演模型,比较3种遥感影像在反演土壤湿度方面的差异。【结果】(1)VSWI反演土壤湿度的最佳深度为10 cm左右;(2)基于GF-1、Landsat-8和MODIS构建的反演模型得到的土壤湿度预测值与实测值的均方根误差分别为5.145、5.227和6.298,可见GF-1和Landsat-8的反演效果相当,均优于MODIS的反演效果;GF-1土壤反演模型的拟合效果最佳;(3)研究区土壤湿度在空间上呈东南向西北递减的趋势,与实地采样点的土壤湿度分布趋势一致,说明利用高分辨率遥感数据监测土壤湿度是可行的。【结论】利用GF-1遥感数据和植被供水指数可以实现对藏北地区的土壤湿度反演,研究结果可以为干旱或者半干旱地区大范围的土壤墒情监测提供理论依据和实践参考。  相似文献   

甘肃高山细毛羊和湖羊HIF-2α基因遗传特性与高原低氧适应性分析     

党鹏举  李少斌  王继卿  刘秀  洪魏  胡江  罗玉柱 《华北农学报》2016,(3):88-93

为探讨HIF-2α基因核苷酸序列变异与绵羊高原适应的相关性,以540只(甘肃高山细毛羊200只,湖羊340只)绵羊为研究对象,采用PCR-SSCP技术分析HIF-2α基因第11外显子和内含子部分区段在甘肃高山细毛羊和湖羊中单核苷酸多态性(SNPs)。结果显示:HIF-2α基因扩增片段在2个绵羊品种中共检测到4种等位基因(A、B、C和D)和10种基因型(AA、BB、CC、DD、AB、AC、BC、AD、BD和CD),存在6个SNPs位点,其中外显子11检测到5个SNPs位点(G/A、G/C、C/T、T/C、G/A、),内含子11检测到1个SNPs位点(G/A),甘肃高山细毛羊未检测到DD基因型。2个绵羊品种的优势基因型均为AB,基因型频率分别为34.50%和16.47%。HIF-2α基因在2个绵羊品种中具有丰富的多态性,且等位基因频率在品种间存在极显著差异(P0.01)。推测在高海拔低氧适应过程中,HIF-2α基因的基因型可能受到了选择,随着长期的高海拔低氧环境的选择,有利于低氧适应的基因型在高海拔绵羊品种中受到选择并富集,携带基因型AA、BB和AB的绵羊可能更加适应高海拔低氧环境,而携带基因型CD、BD和DD的绵羊对高海拔低氧环境适应的能力可能较差。  相似文献