猪繁殖与呼吸综合征病毒流行株Nsp2基因的克隆及序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

闫东明  卢士英  任洪林  周  宫彬彬  郑鑫  杜运升  王光明  柳增善 《中国畜牧兽医》2010,37(9):48-51

采用RT-PCR方法,从吉林省部分地区猪场的病料中扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的Nsp2基因并测序。应用DNAStar 7.0、ClustalX 1.83、MEGA 4.0软件对测序结果进行分析,并与NCBI上已登录的PRRSV代表毒株的Nsp2基因进行序列比对,结果显示,得到的Nsp2基因与VR-2332、CH-1a等代表毒株的一致性为62.0%～87.5%,与国内高致病性PRRSV毒株JXA1、HUB2等的一致性为97.8%～98.9%;氨基酸序列比对结果显示与VR-2332、CH-1a等代表毒株的一致性为34.4%～59.0%,与国内高致病性PRRSV毒株JXA1、HUB2等的一致性为95.1%～98.4%。因此,引起吉林省部分地区猪场发生猪繁殖与呼吸综合征的PRRSV与国内流行的高致病性PRRSV毒株亲缘关系较近。  相似文献   

A型肉毒毒素基因的克隆及序列分析     

李兆辉  潘风光  王光明  任洪林  孟宪梅  卢士英  柳增善 《吉林畜牧兽医》2010,31(9):11-13

目的:克隆肉毒梭菌(Clostridium botulinum)A型肉毒毒素(BoNTa)编码基因。方法:提取肉毒梭菌国际标准株(62A)基因组DNA,根据肉毒梭菌BoNTa基因(GenBank登录号M30196)序列设计引物,采用LA-PCR方法,扩增出目的基因片段,与pMD18-T载体连接,通过酶切鉴定、测序分析克隆到的A型肉毒毒素基因序列。结果:该基因片段与Genbank中的BoNTa基因序列(GenBank登录号M30196)一致性为100%,预测氨基酸序列一致性为100%。结论:成功克隆肉毒梭菌的A型肉毒毒素基因序列,为肉毒梭菌的快速检测,以及进一步用基因工程方法生产A型肉毒毒素奠定了基础。  相似文献   

小鼠IL-1Ra蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备     

战俊澎  邹德颖  常江  杨馨  郭珣  张凯  刘益辛  胡盼  卢士英  李岩松  柳增善  任洪林 《江苏农业科学》2022,50(9):37-42

以小鼠脾脏cDNA为模板，用降落PCR扩增IL-1Ra基因片段，IL-1Ra基因片段长约为537 bp。将IL-1Ra扩增片段和原核表达载体pET-30a(+)连接构建重组表达质粒，在37℃诱导表达，重组表达的小鼠IL-1Ra蛋白的分子质量为19 ku。用纯度较好的小鼠IL-1Ra重组蛋白免疫兔子，制备特异性多克隆抗体；测定多克隆抗体的效价达到1∶4 096 000。经Western-Blot鉴定该抗体可与Raw264.7细胞中表达的小鼠IL-1Ra天然蛋白发生特异性结合。利用实时荧光定量PCR和Western-Blot检测表明布鲁氏菌S2弱毒株感染Raw264.7细胞(小鼠单核巨噬细胞)后小鼠IL-1Ra上调表达。本研究成功制备了小鼠IL-1Ra重组蛋白和兔抗多克隆抗体，为深入探讨小鼠IL-1Ra与布鲁氏菌感染之间的关系提供工具。  相似文献   

兽医公共卫生学研究生课程体系建设与能力培养     

柳增善  朱海超  柳溪林  任洪林  卢士英  李岩松  王洋  刘明远  胡盼 《中国兽医杂志》2023,(4):154-157

<正>兽医公共卫生 (Veterinary public health, VPH) 是公共卫生的重要组成部分，以兽医学知识、技能和资源为基础，运用公共卫生原理和手段，保护和改善人类健康和福利。人类社会进步的长远目标是生活质量的不断提高和生命的尽量延长，公共卫生是体现和衡量长短期目标的重要指标，其发展质量直接标志着社会精神文明和物质文明发展的深度。VPH完全具备公共卫生的社会共同性，无时不在，无处不有，人人参与，人人共享。  相似文献   

小鼠IL-1β原核表达及其与在布鲁氏杆菌侵染巨噬细胞中差异表达的初步研究     

杨馨  邹德颖  张凯  常江  常恒祯  战俊澎  郭珣  刘益辛  程梦妍  韩成  胡盼  卢士英  李岩松  柳增善  任洪林 《湖北农业科学》2022,61(6):112-116+121

为研究IL-1β在布鲁氏杆菌（Brucella）侵染小鼠巨噬细胞过程中的表达情况，首先构建重组小鼠IL-1β原核稳定表达系统，免疫新西兰兔获得多克隆抗体，通过ELISA检测血清效价，并通过Western blot分析其活性，再以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为1∶100（细菌∶细胞）建立猪种布鲁氏杆菌S2株侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7的模型，利用RT-PCR检测细菌侵染过程中IL-1β和MyD88 mRNA的变化水平；Western blot分析IL-1β在蛋白水平的变化。结果表明，重组蛋白IL-1β分子质量31 ku，多克隆抗体效价为1∶256 000，并且具有良好的特异性；与对照组相比，感染后IL-1β mRNA和IL-1β蛋白表达上调，胞内细菌数减少。猪种布鲁氏杆菌S2株侵染巨噬细胞IL-1β的表达量随时间变化并影响胞内活菌数。  相似文献