鸡新城疫病毒V4株的生物学特性研究   总被引：4，自引：1，他引：3  

夏平安  侯安祖 《中国畜禽传染病》1994,(6):45-46

鸡新城疫病毒Ｖ４株对１日龄雏鸡安全；对１０日龄雏鸡一次饮水或滴鼻免疫，半年内，ＨＩ抗体平均效价为２＾５左右；以１００ＥＩＤ５０Ｆ系标准强毒（毒力为１０＾８．５ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ）攻击，保护率１００％。并成功地培育了能在５６℃水浴中处理５小时而血凝效价稳定的耐高温毒株Ｖ４－９２，该毒株在２５℃至少保存５周，血凝效价不降。  相似文献   

MxA抗病毒蛋白的研究概况   总被引：1，自引：0，他引：1  

尹彦涛  夏平安  崔保安  赵云航  王建举  党占国  柴春霞 《中国畜牧兽医》2008,35(1):87-89

MxA抗病毒蛋白是新发现的由I型干扰素(IFN α/β)诱导产生的分布于细胞质中的78 kD的蛋白质,具有广谱的抗病毒作用。随着对MxA研究的深入,现已清楚,MxA蛋白对多种RNA病毒和部分DNA病毒均有抑制作用（Arloric等,1990;Ordien等,2001）,而且其水平高低可以作为机体IFN诱导状态的适宜标志。因此开展MxA蛋白研究具有很高的医学价值。  相似文献   

猪肺巨噬细胞FcγR Ⅲ受体基因的克隆与序列分析   总被引：3，自引：1，他引：2  

徐红运  夏平安  王中明  张凤华  卢高峰  刘玉松  崔保安 《中国畜牧兽医》2010,37(4):66-71

为研究猪肺巨噬细胞FcγRⅢ的生物学功能,本研究应用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞总RNA中克隆出猪FcγRⅢ的cDNA序列,并对其进行了分析。结果表明,克隆到的序列长820 bp,包含有1个771 bp完整开放阅读框(ORF),与Gen-Bank中登录的猪FcγRⅢ序列(AF237453)的核苷酸同源性为99.9%;与人、牛、马、绵羊、猕猴、狗、猫、小鼠氨基酸同源性分别为61.6%、62.9%、55.3%、62.2%、63.0%、59.0%、61.8%和53.2%;蛋白质分子结构预测结果表明,该分子由信号肽(20个氨基酸)、胞外区(185个氨基酸)、跨膜区(23个氨基酸)和胞内区(28个氨基酸)组成,在胞外区存在2个Ig样结构域。猪肺巨噬细胞FcγRⅢ基因的成功克隆,为进一步研究其结构与功能奠定基础。  相似文献   

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体间接ELISA方法的建立     

李素平  赵琳  夏平安  汪银锋  王中明  邱璜  刘明莉  徐红运 《江西农业学报》2009,21(3)

采用纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒重组核衣壳蛋白作为ELISA试验的标准抗原,通过优化ELISA各种条件,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。该方法具有良好的特异性和重复性。  相似文献   

PRRSV Hn-1/06株GP5蛋白基因的克隆及表达载体的构建     

卢高峰  夏平安  邱璜  李伟娟  王中明  刘明莉 《安徽农业科学》2008,36(26)

[目的]克隆PRRSVHn-1/06株GP5蛋白基因并构建其原核表达载体。[方法]根据PRRSV美洲株ATCC-VR2332的ORF5基因序列设计特异性引物,用RT-PCR方法从Hn-1/06株中扩增得到GP5蛋白基因的片段,与PTG19-T载体连接获得其阳性克隆PTG19-T-ORF5。以该基因片段为模板分别设计ORF5完整序列和删除信号肽的ORF5序列两条引物,进行PCR扩增,将目的片段与原核表达载体pET32a连接,并对其进行酶切鉴定。[结果]扩增得到GP5蛋白基因全长序列603 bp,编码200个氨基酸残基;具有3个潜在的N-糖基化位点和9个半胱氨酸;分子量为22.4 kD,等电点为8.550;双酶切pET32a-ORF5鉴定,结果与预期一致,证实重组质粒构建成功。[结论]成功构建了PRRSVHn-1/06株GP5蛋白基因的表达载体,为深入研究GP5蛋白的本质与功能及其致病性奠定基础。  相似文献   

7种中草药提取物对猪链球菌的体外抑菌试验   总被引：9，自引：0，他引：9  

张红英  崔保安  夏平安  王亚宾  王默  高一梅 《河南农业科学》2006,(7):113-114

为了观察中草药对猪链球菌的体外抑菌效果,将所选中草药按常规法制备水提取物、醇提取物,用试管2倍稀释法检测中草药水提物、醇提物对猪链球菌的体外抑菌作用。结果表明,所选7种中草药对猪链球菌均具有一定的抑菌作用,其中黄连醇提物的抗菌活性最强,仙鹤草、地锦草醇提物抗菌活性较强,板蓝根、马齿苋醇提物抗菌活性较弱。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株GP5基因的克隆及在293T细胞中表达     

党占国  夏平安  高进勇  尹彦涛  王建举  崔保安  陈溥言 《河南农业大学学报》2008,42(2):196-199

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ATCC VR-2332株GP5基因序列设计1对特异性引物,应用RT—PCR方法扩增PRRSVHn／06-1分离株GP5基因片段．将扩增片段克隆到真核表达载体pcDNA3．0中,测序后用DNAstar序列分析,构建的pcDNA—GP5重组质粒瞬时转染293T细胞,48h后用Western-blot检测。证明GP5基因在293T细胞中获得了表达,可与PRRSV阳性血清发生特异性反应．  相似文献   

河南省南阳地区黄牛狂犬病防制研究     

侯安祖  周晓明  张国宪  侯世宽  李金中  杨盛华  夏平安 《中国兽医学报》1991,(3)

由河南省南阳地区患“怪叫病”黄牛脑组织分离鉴定了5株狂犬病病毒,建立了检测狂犬病病毒抗原的夹心间接斑点酶联免疫吸附试验、检测狂犬病病毒抗体和中和抗体的夹心阻断酶联免疫吸附试验和微量免疫酶试验.应用所建立的方法,结合小鼠中和试验,对疫区牛、马、猪、羊、犬、猫、鸡、鼠和蝙蝠9种动物的1138份血清标本进行了检测,结果发现阳性率达12.65%,其中疫点内牛、猪、犬、猫和鼠的阳性率更高,为20%左右.根据动物群中较高阳性率,亦即隐性感染动物的存在,提出了南阳地区黄牛狂大病除因疯犬或带毒犬咬伤所致者外,可能还有因其他动物如鼠等咬伤甚至非咬伤感染途径的存在.在确定病性以及上述流行病学调查的基础上,实施了以管(制)、免(疫)、灭(扑杀)为中心的综合防制措施,经3年的工作,收到了明显的防制效果.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白的高效表达及间接ELISA方法的建立   总被引：4，自引：0，他引：4  

夏平安  尹彦涛  李素平  党占国  王建举  王中明  李伟娟  崔保安 《中国兽医学报》2009,29(5)

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 美洲株 ATCC VR2332 的 N 蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从PRRSV Hn-1/06株中克隆了大小为372 bp的 N 蛋白基因(EU025136).将 N 蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-N,在IPTG的诱导下成功表达了相对分子质量约为33 000的可溶性融合蛋白N-His;经SDS-PAGE和凝胶薄层扫描分析,融合蛋白的表达量约占细菌总蛋白量的29%.将融合蛋白加入镍琼脂糖凝胶树脂层析柱,经300 mmol/L咪唑磷酸盐缓冲液洗脱,其纯度可达,91%.用Western blotting分析纯化后的融合蛋白,显示良好的生物学活性.利用纯化融合蛋白作包被抗原及优化ELISA反应条件,建立了可检测抗PRRSV N 蛋白抗体的间接ELISA方法(N-ELISA),并将所建立的N-ELISA与国外进口的PRRS检测试剂盒IDEXX-ELISA对200份临床送检血清进行平行检测,阳性符合率为92.7%.结果表明,本试验建立的N-ELISA与IDEXX-ELISA具有同样高的特异性.  相似文献   

猪繁殖和呼吸综合症病毒河南地方株ORF5／6基因的克隆及真核表达     

党占国  李志勇  夏平安  陈溥言  崔保安  李伟娟  王中明 《畜牧兽医科技信息》2008,(8)

应用RT-PCR方法分别扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)河南地方株的ORF5和0RF6基因。将扩增基因克隆入真核表达载体pcDNA3.0中,设计不同引物自行构建重组质粒PcDNA-ORF5、ORF6和pcDNA-ORF5/6。运用磷酸钙法将重组质粒分别瞬时转染293T细胞,经流式细胞和westbloting试验分析表明共表达重组质粒PcD-NA-ORF5/6表达蛋白能够与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,而pcDNA-ORF5-ORF6在293T细胞很难检测到蛋白表达。该结果表明蛋白质生物活性和其蛋白质空间构象有一定关系,也为下一步进行构建PRRSV假型病毒来研究ORF5/6蛋白的结构与功能的关系奠定了基础。  相似文献