血清2型猪链球菌河南分离株毒力基因的鉴定及其cps2j全基因序列分析     

张九州  李乔晶  郑逢梅  常洪涛  陈陆  杨霞  姚惠霞  王川庆  迪丽拜尔·阿木提 《中国预防兽医学报》2011,33(12)

为了解血清2型猪链球菌(S.suis2)河南分离株的毒力基因型及cps2j全基因突变情况,本研究扩增S.suis2毒力基因gdh、cps2j、mrp、ef 、sly、orf2和fbps,并对s.suis2的cps2j进行全基因序列测定和同源性分析.结果表明,gdh、cps2j、mrp、ef、sly、orf2和fbps基因在8个S.suis2分离株中的检出率分别为100％(8/8)、100％(8/8)、62.5％(5/8)、75％(6/8)、87.5％(7/8)、100％(8/8)和100％(8/8);其中cps2j全基因核苷酸及推导的氨基酸序列与来源不同的S.suis2分离株同源性分别达98％和97％以上,以该基因构建的系统发育树表明8株S.suis2河南分离株与国内外不同参考株同源性高,亲缘关系密切.  相似文献   

河南省肉牛群中流行疫病的调查     

常洪涛  王川庆  陈陆  方先珍  赵明军 《中国兽医杂志》2006,42(9):30-31

为进一步了解和掌握疫病对我省农区肉牛生产的危害程度，以制定切实可行的综合防制措施，我们对河南省肉牛群疫病进行了调查研究，报告如下。 1资料的收集和整理 调查时间为2002-2004年，选择当地政府支持、杂交改良效果好、秸秆资源丰富、群众养牛积极性高、规模养牛条件具备、基础设施完善、气候条件适宜、有一定肉牛生产基础并具有代表性的太康、商丘、鲁山、鹿邑、滑县、内乡、唐河、鄢陵、伊川、镇平、开封等11个县市进行了疫病调查，每县抽样调查2个行政村，村的人口规模与经济条件在全县范围内处于中等水平；  相似文献   

河南省部分中小型猪场种公猪猪瘟野毒感染的分子流行病学调查     

常洪涛  杜纪梅  杨霞  赵军  陈陆  王新卫  姚惠霞  王川庆 《安徽农业科学》2012,40(33):16173+16215

[目的]了解河南省部分中小型猪场公猪精液中猪瘟野毒的感染状况。[方法]应用RT-PCR方法对河南省10个中小型猪场的58份种公猪精液进行了猪瘟野毒感染情况的调查。[结果]7个猪场的猪瘟野毒检测结果呈阳性,占总检测场数的70%;10份精液的猪瘟野毒检测结果呈阳性,样品阳性率为17.24%。[结论]河南省大部分中小型猪场存在种公猪猪瘟野毒感染的现象,且感染状况较为严重。  相似文献   

鸭源鸡杆菌双重PCR检测方法的初步建立     

皇甫和平  杨霞  赵军  王川庆  陈陆  常洪涛  王新卫  刘红英  姚慧霞 《中国预防兽医学报》2013,35(8)

为建立鸭源鸡杆菌(G.anatis)双重PCR检测方法,并对鸡杆菌分离株进行种类鉴定,本研究根据GenBank中G.anatis12656-12株的gtxA基因序列设计一对PCR引物,合成扩增rpoB基因的引物作为内参基因,建立了G.anatis双重PCR检测方法.检测结果显示:以G.anatis Yu-PDS-RZ-1-SLG株DNA为模板进行的双重PCR检测能够扩增出两条目的片段;其它16株细菌包括副鸡禽杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、福氏志贺菌和奇异变形杆菌均只扩增出了一条目的片段;该方法可以检测到浓度为6.5×102 cfu/mL的G.anatis;34株鸡杆菌分离株均扩增出了两条预期大小的目的片段.此外,序列分析结果表明,10株鸡杆菌河南分离株的rpoB基因序列与鸭源鸡杆菌种参考株(CCUG15563)的同源性最高(97.5％～99.0％),属于鸭源鸡杆菌种.本研究建立的G.anatis双重PCR检测方法,可用于含gtxA基因鸡杆菌菌株的鉴定及临床病原学诊断.  相似文献   

新生仔猪急性腹泻疫情中5种病毒感染的分子检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

常洪涛  杜季梅  陈陆  赵军  郭占达  王川庆 《饲料工业》2013,(11):61-64

为查明河南省新生仔猪急性腹泻疫情的主要病因,研究分别应用RT-PCR和PCR方法对98个猪场送检的181份发病仔猪病料进行了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(GARV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的分子检测。结果显示,PEDV阳性检出率高达71.27%,与TGEV、GARV、CSFV和PRV的混合感染阳性检出率分别为2.76%、2.21%、56.91%和17.13%,与CSFV、PRV的三重混合感染阳性检出率为17.10%,而与TGEV、GARV的三重混合感染阳性检出率仅为0.55%;TGEV、GARV、CSFV和PRV的阳性检出率分别为5.52%、2.21%、69.06%和44.20%,CSFV和PRV的混合感染阳性检出率为32.04%;腹泻病原检测阳性猪场在河南省分布较为均匀,秋、冬季节比例较多,但春、夏季季节呈逐步上升趋势;规模化猪场阳性场所占比例远高于中小型猪场。研究结果证实新生仔猪急性腹泻疫情在河南全省猪场感染和流行极为普遍;季节性已日趋不明显;PEDV是引起此次疫情的最主要病因,但CSFV和PRV扮演着推波助澜的重要角色。  相似文献   

细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用     

师润  杨霞  陈陆  刘红英  常洪涛  余秋颖  明星  郑关民  王川庆 《畜牧兽医学报》2013,(2):276-282

为研究细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用,分别用酪氨酸蛋白激酶、酪氨酸蛋白磷酸酶、蛋白激酶C、Ca2+通道等信号转导抑制剂染料木黄酮、原钒酸钠、星状孢子素、硝苯地平和微丝蛋白聚合抑制剂细胞松弛素B处理鸡肠上皮原代细胞后,采用细胞免疫组织化学染色检测人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮原代细胞侵袭率,用间接免疫荧光双重标记检测ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞后F-肌动蛋白分布的变化。结果显示,染料木黄酮、硝苯地平和细胞松弛素B能显著抑制人源福氏志贺菌ZD02株内化,星状孢子素和原钒酸钠对ZD02株的内化无影响,人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞时F-肌动蛋白发生聚集。本研究表明人源福氏志贺菌ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞过程中需要酪氨酸蛋白激酶、Ca2+通道活化以及细胞微丝重排。  相似文献   

乙型脑炎病毒荧光定量PCR的建立及对病毒体外复制动态的研究     

王帅涛  王新卫  陈陆  赵军  常洪涛  杨霞  刘红英  王川庆 《中国兽医学报》2013,33(6)

根据乙型脑炎病毒(JEV)NS3基因保守序列设计并合成一对引物,以构建的重组质粒作为阳性标准品,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测JEV的SYBR Green I荧光定量PCR方法.该方法在1.92×108～1.92×101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中19拷贝/μL的病毒核酸,敏感性是常规RT-PCR方法的10倍;检测时间缩短了50％,该方法不与其它猪源病毒发生交叉反应;在重复性试验中,批间、批内变异系数均小于1.2％.应用本方法对JEV在BHK-21细胞上繁殖滴度进行定量检测,绘制JEV在BHK-21细胞上的一步生长曲线,并与TCID50方法绘制的复制动态曲线进行比较.结果显示,两种方法测定的JEV在BHK-21细胞上的复制动态具有一定的平行关系,对于制备灭活疫苗而言,荧光定量PCR方法更快速和敏感,所测得的抗原含量更精确,有利于企业机动灵活地安排生产.  相似文献   

猪圆环病毒2型(PCV2)河南分离株进化分析及ORF2基因的表达     

陈陆  杨霞  王江辉  常洪涛  董加才  刘矿  刘红英  王川庆 《农业生物技术学报》2009,17(4)

根据GenBank中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus2,PCV2)的核苷酸序列设计2对引物,使用扩增全基因的引物对来源于河南省焦作、开封和滑县的3株PCV 2型JZ株、KF株和HX株的ORF2基因进行扩增,扩增片段克隆到pMD18 T上,获得重组质粒pMD18-T-ORF2,并对其进行测序,测序结果登录在GenBank上,登录号分别为EF028202、EF064149和EF467928.序列分析表明,PCV2河南分离株ORF2基因与其它PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为92.4%～99.6%,氨基酸序列同源性为90.6%～97.9%,进化分析表明,河南分离株处于同一分支,与欧洲株亲缘关系较近.应用另一对引物从重组质粒pMD18-T-ORF2中PCR扩增出587 bp不包含核定位信号序列的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET-32a-ORF2,经IPTG诱导表达了ORF2基因编码的结构蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting检测,表达的重组蛋白分子量约为40 kD,可被PCV2阳性血清识别,说明PCV2 ORF2基因得到成功表达.  相似文献   

猪圆环病毒2型河南地方流行株的分离及PCR鉴定     

常洪涛  郝华芳  陈陆  杨霞  王川庆 《饲料工业》2009,30(23)

<正>猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Disease PCVD)是由猪圆环病毒(Porcinecircovirus,PCV)所引起的哺乳仔猪和育肥猪的临床或亚临床型传染病,被世界各国兽医界公认为目前最重要的猪传染病之一。PCV是迄今发现的最小的动物DNA病毒,有两个血清型,即PCV-1和PCV-2。PCV-1无致病性,广泛存在于猪体内和猪的传代细胞系中;而PCV-2则具有致病性,可  相似文献   

河南省部分地区规模化猪场繁殖障碍性疫病的血清学调查     

常洪涛  姚惠霞  李鸿雁  陈陆  杨霞  赵军  王川庆 《安徽农业科学》2010,38(34):19521-19522,19525

[目的]了解河南省部分地区规模化养猪场繁殖障碍性疫病的流行情况,为有目的、有重点地开展相应的猪繁殖障碍性疫病免疫预防工作提供参考。[方法]对河南部分猪场送检于河南农业大学动物疫病检测诊断中心的血清进行监测,其中6 825、2 609、1 177、123和53份血清分别用于检测猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪细小病毒病和衣原体病抗体。[结果]血清学监测结果显示,血清中猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪细小病毒病和衣原体病相应抗体阳性率分别为63.28%、61.44%、25.49%、39.84%、5.66%。[结论]河南省部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病的防疫工作亟待加强,猪伪狂犬病的防治需要进一步强化,衣原体病已得到有效控制。  相似文献