水貂铜绿假单胞杆菌的诊治   总被引：1，自引：0，他引：1  

魏玉荣  沈国顺  常爽  刘丽娜 《现代畜牧兽医》2005,(12):39-39

山东荣城某规模水貂场饲养水貂万余只,2004年9月下旬,突然有数只水貂死亡。且死亡的水貂数量逐渐增加,每日都有40～50只水貂死亡,10月初送病貂死貂到本实验室求诊。1临床症状据畜主描述,这些水貂通常是在晚上拒食,而在第二天早晨即发现有几只生病,相继有几只死亡。我们的实验室  相似文献   

鹅细小病毒主要免疫原性蛋白VP3基因遗传变异及其原核表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

毕玉海  丁壮  徐明  李志杰  常爽  黄海楠  宋子运  尹仁福  杜眉 《中国兽医学报》2007,27(2):172-175

根据鹅细小病毒(GPV)B株全基因序列,设计并合成了1对特异性引物,采用PCR技术对GPV GD-01株的VP3基因进行扩增,将目的基因克隆到pGEM(R)-T后测序,分析了GPV GD-01株VP3基因的遗传变异情况,并进行原核表达.结果表明,GPV GD-01株VP3基因全长1605bp,编码534个氨基酸(DQ665790),与已发表的GPV、番鸭细小病毒(MDPV)的核苷酸、氨基酸同源性分别为96.15%、80.1%,97.78%、89.13%,说明GPV VP3基因具有较高的遗传稳定性.结合亲水性、表面极性、抗原位点分析比较GPV、MDPV VP3基因,为研究GPV和MDPV感染谱差异的分子机制提供了一定的理论基础.原核表达显示,VP3蛋白的最高表达量占整个菌体蛋白含量的29.9%,经表达条件优化可产生大量可溶性VP3表达蛋白.SDS-PAGE与Western-blot分析显示,表达的VP3蛋白的相对分子质量约60000,并能与鼠抗GPV阳性血清反应,证明具有一定的反应原性,为进一步研制基因工程疫苗及诊断制品奠定了基础.  相似文献   

血清Ⅰ型鸭源副粘病毒HN蛋白基因的遗传变异及原核表达   总被引：1，自引：3，他引：1  

刘艳华  丁壮  常爽  毕玉海  徐明 《中国兽医学报》2007,27(3):315-318

参考GenBank发表的鹅副粘病毒（GPMV）SF02株基因组核苷酸序列，设计并合成了1对特异性引物，采用RT—PCR技术扩增鸭源血清I型禽副粘病毒DP1／0z株的HN基因，并进行遗传变异及原核表达研究。结果显示，HN基因共1716bp，编码571个氨基酸，存在6个潜在的糖基化位点和13个完全保守的半胱氨酸（C）残基。与GenBank中收录的鹕源副粘病毒HN基因核苷酸和氨基酸的同源性分别为81．3％～98．3％和87．2％～98．4％，系统进化树分析表明DP／02株与鹅源副粘病毒处于同一进化分支。经SDS—PAGE、Western—blot分析，原核表达的HN蛋白相对分子质量在63000左右，1mol／L（终浓度）IPTG时间梯度诱导，3h时HN蛋白表达量最高，占整个菌体蛋白含量的30％，且能与鼠抗鸭源血清I型禽副粘病毒阳性血清反应。  相似文献   

蜡梅嫩枝扦插技术     

闫瑞凤  常爽 《中国花卉盆景》2001,(7)

蜡梅的常规繁殖以嫁接为主,但由于受诸多条件的限制,有时成活率较低。我们经过多年的反复试验,采用嫩枝扦插技术繁育,获得成功,不仅省工、省时、省投资,而且生根快,成活率高。●扦插时间以气温较高的6～8月为最佳时期。●插床准备插床须选在遮荫或能搭建荫棚的地方。首先将  相似文献   

类人猪H3N2流感病毒与禽H5流感病毒重组:一个潜在的公共威胁     

王广美  丛彦龙  丁壮  常爽  张泉鹏  孙玉章  王晓莉 《中国兽医学报》2010,30(9)

将2007年7月-2008年10月从吉林省猪群中分离到的3株H3N2亚型流感病毒,分别命名为A/swine/Jilin/A/2007(Sw/Jilin/A/07),A/swine/Jilin/B/2007(Sw/Jilin/B/07)和A/swine/Jilin/C/2008(Sw/Jmn/C/08).结合已知猪流感病毒(SIV)内部基因序列,设计合成6时特异性引物,通过RT-PCR技术分别扩增出6段内部基因,并与GenBank中相关序列进行比较,分析3株流感病毒内部基因的遗传进化关系.结果表明:在PB2、PB1、PA和NP的进化树上,3株H3N2分离株处于近代人源谱系内;在M和NS进化树中,Sw/Jilin/A/07和Sw/Jilin/B/07处于近代人源谱系内,而Sw/Jilin/C/08与禽源谱系内的H5亚型病毒亲缘关系最近.  相似文献   

绿荫公园榉树病虫害调查研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

闫瑞凤  李文胜  常爽  史根花 《河南林业科技》2009,29(1):17-18

通过调查的方法确定榉树树叶枯黄、早落的原因,为蚜虫危害所致,并探索防治蚜虫的方法。  相似文献   

"拯救"NA-1株鹅源副黏病毒辅助质粒的构建及鉴定     

宋子运  丁壮  徐明  马爱霞  杜眉  常爽  毕玉海  尹仁福 《中国兽医学报》2008,28(5):515-518

将本实验室保存的NA-1株鹅源副黏病毒（GPMV）经SPF鸡胚增殖,收集尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank已收录的ZJ1株GPMV基因组序列,设计了4对特异性引物,利用RT-PCR法分别特异性的扩增出病毒NP、P和L基因片段,并将目的基因片段消化、回收纯化,克隆pCI-neo表达载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒选取阳性克隆酶切、PCR鉴定并进行序列测定,结果表明NP、P和L基因正确克隆到pCI-neo表达载体中,并分别命名为pCI-NP、pCI-P和pCI-L。将构建好的pCI-NP、pCI-P和pCI-L重组质粒单独转染Vero细胞,在荧光显微镜下观察到特异绿色荧光,表明NP、P和L蛋白得到成功表达。  相似文献   

鹅副粘病毒NA-1分离株HN蛋白基因的克隆与序列分析   总被引：9，自引：0，他引：9  

王学理  丁壮  左玉柱  向华  常爽  黄海楠  宣华 《中国预防兽医学报》2005,27(1):18-21

鹅副粘病毒分离株NA-1经11日龄鸡胚增殖后纯化.提取病毒的基因组RNA,采用RT-PCR扩增出与预期设计的1.7kb大小相符合的特异条带.将扩增产物提纯后克隆入pMD 18-T载体,经纯化、筛选及酶切鉴定后,初步获得了含鹅副粘病毒HN基因的阳性克隆,并对阳性克隆进行测序.测序后拼接得出HN基因的全序列长度为1 740bp,该基因的ORF总长为1 716 bp,编码571个氨基酸.与GenBank下载的15株参考毒株比较HN基因编码区全核苷酸序列,发现所测NA-1毒株与参考毒株YG97核苷酸序列同源性为97.3%,与F48E9同源性为84.5%,与La Sota为82.2%.同源性分析表明NA-1相对于NDV在HN基因上发生了较大的变异.  相似文献   

中国内蒙自治区马饲育环境土壤中马红球菌的分布     

丁壮  Shinji TAKAI  Hiroo MADARAME  常爽  黄海楠  霍晓伟  高明华  谭忠田  高双成  Fumiko HATORI  Yukako SASAKI  Tsutomu KAKUDA  Shiro TSUBAKI 《中国兽医学报》2008,28(1):40-44

对中国内蒙古自治区饲育马土壤环境中马红球菌的分布知之甚少;为此,在中国内蒙古通辽近郊、内蒙古南部锡林郭勒盟大草原、内蒙古东部呼伦贝尔大草原等马场共收集了108份土壤样品进行了马红球菌的检测。结果,锡林郭勒盟大草原和呼伦贝尔大草原的马红球菌分离率为25.9%～30.0%,通辽近郊土壤中分离率高达82.3%。这说明在通辽近郊马红球菌的分离菌数是草原土壤中马红球菌分离菌数的10倍。应用PCR技术检测了488株的毒力相关基因,相对分子质量分别为15000～17000（VapA）和20000（VapB）。所有的分离株都未检出毒力相关基因。这些无毒力分离株的质粒资料显示,各种大小的潜在质粒的发生率为13.3%～21.5%。本研究结果截然不同于我们新近对蒙古国的调查结论：马红球菌在蒙古国乌兰巴托的马群中不存在。造成这一差异的原因可能在于蒙古国的游牧生活和内蒙古的非游牧生活。  相似文献   

不同处理方法对波尔山羊杂交羊同期发情效果的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

林峰  陈玉霞  王凤云  常爽  孙克宁  高腾云 《河南农业科学》2009,(8)

为了提高山羊的繁殖力,研究了3种处理方法对波尔山羊杂交羊同期发情效果的影响。结果表明:采用CIDR+PMSG+PG法与CIDR+FSH+PG法,母羊的同期发情率显著高于采用2次PG法的(P<0.05),而采用CIDR+PMSG+PG法的又略高于CIDR+FSH+PG法的,但差异不显著(P>0.05);采用CIDR+PMSG+PG法的母羊受胎率与产羔率略高于采用CIDR+FSH+PG法与2次PG法的,但差异不显著(P>0.05)。CIDR+PMSG+PG法处理效果优于其他2种方法,且操作简便,费用低,易于推广应用。  相似文献