贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的变异分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

汤德元  赵启祖  李春燕  刘霞  邹兴启  范运峰  曾智勇  朱永兴 《畜牧兽医学报》2009,40(8)

为了调查猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的变异情况,笔者收集了贵州省16家规模化养殖场153份疑似PRRS的样品,通过RT-PCR检测和ORF5基因序列的测定,结果表明:所有样品之间ORF5基因的同源性为98.7%～100%,氨基酸的同源性为98.5%～100%;与美洲型代表毒株VR-2332、国内标准毒株CH-1a和欧洲型代表毒株LV基因序列的同源性分别为89.2%～90%、94.8%～95.6%、59.7%～60.2%,氨基酸序列同源性分别为88.8%～89.3%、92.7%～94.2%、54.9%～55.3%,遗传衍化关系分析表明流行毒株属于美洲型.ORF5基因发生离散性变异,可以分为3个簇,与中国其他地区分离的高致病性PRRS病毒关系密切,而与早期分离的PRRS毒株关系疏远,说明猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因存在变异现象.  相似文献   

犬瘟热病毒贵州株CDV-GZ1的分离与鉴定     

曾智勇  周莉  汤德元  肖超能  刘志杰  梁海英 《贵州农业科学》2012,(2):109-112

为丰富我国犬瘟热病(CD)的流行病学资料,同时为CDV贵州分离株主要抗原基因及结构研究奠定基础,对贵阳市某宠物医院犬瘟热病毒金标卡检测呈阳性病死犬的肝脏、肺脏、淋巴结等组织,取适量经混合研磨过滤后,同步接种于Vero传代细胞上进行病毒分离培养,并对该分离毒株进行理化特性、电镜形态、血清学和核酸检测等系列鉴定。结果表明:在Vero细胞上盲传至第6代时稳定出现特征性的CPE,该毒株为RNA囊膜病毒,电镜下可见胞浆包涵体、病毒粒子呈晶格状排列,病毒可被犬瘟热阳性血清中和,分离病毒为犬瘟热病毒并被命名为CDV-GZ1株。  相似文献   

猪圆环病毒Ⅱ型在育肥猪机体内的残留时间检测     

甘振磊  汤德元  罗险峰  曾智勇  王凤  李春燕 《贵州农业科学》2012,40(10)

为弄清猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)对其正常生长及繁殖性能的影响,采用ELISA及PCR检测方法,对1例感染PCV病毒的长白猪进行PCV2的抗体水平检测及其在猪机体的残留时间研究.结果表明:ELISA检测,2月龄、4月龄、6月龄和8月龄的血清抗体值分别为0.445、0.522、0.396和0.225,PCV2抗体水平呈先增高后降低的趋势;PCR检测诊断,不同时期的检测结果均为阳性,但病情逐渐恢复到正常状态,生产性能有所下降.该猪感染PCV2后患病猪病情即使逐渐好转,但PCV2仍在机体内长期存留,使猪群长期不断地向外界排毒,给周围的环境造成严重危害.  相似文献   

猪圆环病毒2型贵州毒株的分离与鉴定     

刘志杰  曾智勇  周莉  梁海英 《贵州农业科学》2012,40(11):162-164

为分离和鉴定出猪圆环病毒2型(PCV2)贵州株,对送检的3份感染病料进行了分离,并将其分离毒株分别同步接种于PK-15细胞,再特异性扩增和克隆所分离毒株的全基因序列。结果表明:成功分离出3株PCV2贵州株,命名为GZ-QZ1株(1 767bp)、GZ-RH1株(1 767bp)和GZ-CS1株(1 768bp);3株PCV2贵州株全基因组之间的核苷酸相似性为94.6%～99.9%,其中ORF2核苷酸相似性为90.2%～99.9%;ORF2氨基酸一致性GZ-QZ1和GZ-RH1为100%,二者与GZ-CS1的氨基酸一致性均为88.1%。3株PCV2贵州株之间同源,但GZ-CS1存在一定变异。  相似文献   

贵州白香猪γ干扰素基因的克隆与序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

曾智勇  周莉  刘志杰  梁海英 《贵州农业科学》2012,(8):151-153

为获得贵州白香猪γ干扰素基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪γ干扰素基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序分析。结果表明,pIFN-γ基因全长501bp,可编码166个氨基酸,其中前23位氨基酸为信号肽序列;pIFN-γ含有2个潜在N-糖基化位点;贵州白香猪与国内地方猪种之间pIFN-γ基因差异不大,具有很近的亲缘关系,其中与藏猪、成华猪、枫径猪、梅山猪的同源性达100%,而与内江猪的亲缘关系相对较远,与荣昌猪(DQ902588)亲缘最远。  相似文献   

四川省仔猪球虫病的流行病学调查   总被引：16，自引：0，他引：16  

杨光友曾智勇  郭莉徐玉辉  王淑贤陈勇蓝洪  李庆海 《中国兽医科技》2004,34(3):31-34

2002年7～9月抽样调查了四川省12个市、县16个猪场的球虫病流行情况。结果，仔猪球虫阳性场占93．75％(15／16)，仔猪球虫总感染率为25．36％(107／422)；猪等孢球虫阳性场占87．50％(14／16)，猪等孢球虫总感染率为18．72％(79／422)；在球虫阳性的仔猪粪样中初步鉴定出5种球虫，即粗糙艾美球虫、蒂氏艾美球虫、猪艾美球虫、豚艾美球虫及猪等孢球虫。  相似文献   

鸡球虫病保护性免疫机理探讨     

曾智勇  杨光友  梁海英 《中国家禽》2003,7(Z1):139-141

在大力倡导绿色无污染食品的今天,药物残留给食品安全带来了严重隐患,鸡球虫病的免疫研究也因此成为目前研究的热点。20世纪80年代后,随着细胞生物学和分子生物学等学科的发展,鸡球虫病的免疫学研究也由组织学水平推进到细胞和分子生物学水平。本文主要针对鸡球虫病保护性抗原和免疫机理作一探讨。  相似文献   

乙型脑炎病毒NS1和NS1-2A蛋白的真核表达及其差异性研究     

刘巧玲  黄涛  汤德元  曾智勇  石柯  林泠  任杰 《中国畜牧兽医》2020,47(7):2190-2199

为深入研究乙型脑炎病毒（JEV）NS1和NS1-2A蛋白的表达和免疫效果差异,本试验构建并扩增C-端含Flag标签的NS1和NS1-2A基因,利用T4 DNA连接酶分别连接到质粒pcDNA3.1（+）上,构建重组质粒pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag。将这两种真核表达质粒分别转染BHK-21细胞,利用RT-PCR、IFA和Western blotting检测NS1和NS1-2A蛋白在体外的表达情况,用pcDNA3.1-NS1-Flag、pcDNA3.1-NS1-2A-Flag和pcDNA3.1（+）免疫BALB/c小鼠,检测这两种蛋白在体内的表达差异。结果显示,试验成功构建了NS1和NS1-2A基因的真核表达载体pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag,IFA和Western blotting鉴定NS1和NS1-2A蛋白成功表达,重组质粒pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag免疫小鼠后可诱发机体产生特异性体液免疫,pcDNA3.1-NS1-2A-Flag联合免疫组小鼠血清抗体效价和INF-γ细胞因子分泌水平比pcDNA3.1-NS1-Flag免疫组高,且与pcDNA3.1（+）空载体免疫组差异极显著（P<0.01）;pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag免疫组小鼠体内的INF-γ分泌量会增多,免疫第4周达到最高后逐渐降低。pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag免疫小鼠能够刺激JEV特异性抗体的分泌和增强机体的细胞免疫功能,且NS1-2A联合基因的免疫效果优于NS1单一基因,为进一步研究JEV的非结构蛋白功能、研发NS1和NS1-2A基因疫苗奠定基础。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪流感病毒二重RT-PCR 检测方法的建立     

王洪光  汤德元  曾智勇  罗险峰  李春燕  郝飞  刘建  李达 《猪业科学》2014,(8):98-99

为建立可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）与猪流感病毒（SIV）二重RT-PCR 方法,研究根据GenBank 登录的相关病毒基因序列,选择保守区域设计引物,经过反应条件的优化,建立了可同时检测以上2 种病毒的RT-PCR 诊断方法,扩增的目的片段长度分别为364 bp（PRRSV）和981 bp（SIV）。通过实验证明该方法具有良好的特异性和较高的敏感性,对PRRSV 和SIV 的核酸检测最低浓度分别为 3.2×10-3 ng 和2.7×10-3 ng。应用该方法对32 、份临床样品进行检测发现PRRSV 阳性率为43.8%,SIV 阳性率为31.3%,二重感染率为9.4%。该方法的成功建立为快速高效地检测以上2 种病毒提供了有力手段。  相似文献   

应用六重PCR方法对猪流产死胎病原的快速检测     

梁海英  曾智勇  王伟丞  汤德元  刘钊 《猪业科学》2014,(10):74-74

试验采用猪繁殖障碍性病毒性疫病六重PCR检测方法对贵州省贵阳市某猪场送检的死胎病料进行了PRV、PPV、PCV2、PRRSV、CFSV和JEV的快速检测,结果表明该猪场送检的流产死胎同时感染有PRV和PCV2,表明种猪场应重视繁殖障碍性病毒性疫病的免疫预防,否则将造成不必要的损失。  相似文献