次氯酸消毒液对猪源病原体的消杀效果     

肖琦  赵霞玲  钱雯娴  朱家平  张冯禧  尹力鸿  温立斌  何孔旺 《江苏农业科学》2021,49(21):170-174

为评价次氯酸消毒液(以下简称消毒液)对猪源病原体的消杀作用,以猪场常见的5种病原菌和5种病毒为研究对象,测试消毒液在不同浓度和不同作用时间下的消杀效果.悬液定量杀菌试验结果表明,消毒液原液(次氯酸含量为210 mg/L)和1:2倍稀释消毒液(次氯酸含量为105 mg/L),作用30 s即可杀灭猪链球菌2型(SS2)、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪丹毒杆菌(ER)和猪大肠杆菌(ETEC);1:4倍稀释消毒液(次氯酸含量为52.5 mg/L)作用1 min能杀灭HPS、ER和ETEC,作用5 min能杀灭SS2和APP,杀灭对数值均>7.00,杀灭率均为100％.病毒灭活试验结果表明,消毒液原液作用1 min对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪细小病毒(PPV)的平均灭活对数值均≥5.00,杀灭率均≥99.999％;1:2倍稀释消毒液作用1 min对PEDV的平均灭活对数值为4.00、杀灭率为99.990％;消毒液原液作用5 min和10 min,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的杀灭率为99.899％,对猪伪狂犬病病毒(PRV)的杀灭率为92.921％,对猪圆环病毒2型(PCV2)的杀灭率为90.00％.表明次氯酸消毒液在推荐浓度下对猪场常见病原菌有快速高效的消杀效果,对PEDV和PPV等病毒亦有良好的消杀作用.  相似文献   

猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及在疫苗评价中的应用(英文)     

俞正玉  徐向伟  孙冰  何孔旺  郭容利  杜露平  温立斌  张雪寒  茅爱华  倪艳秀  李彬 《农业科学与技术》2014,(9):1487-1490

[目的]建立检测猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的TaqMan荧光定量PCR方法。[方法]根据TGEV基因组中保守的N基因序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有N基因的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。[结果]该试验建立的荧光定量PCR方法在102~1010拷贝/μl之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.99以上,扩增效率在90%~110%之间。该方法的检测灵敏度为10拷贝,敏感性较高,而且特异性较好,与猪的其他病毒核酸均无交叉反应;批内和批间的变异系数低于3%,表明该方法的重复性较好。应用该方法可以对疫苗的免疫效力进行定量检测和评价,也可以对临床病料进行检测。[结论]该研究建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,可为TGEV的流行病学调查、疫苗开发和发病机制等研究提供可靠的工具。  相似文献   

猪链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶基因缺失株的构建及其致病性     

祝昊丹  倪艳秀  周俊明  俞正玉  茅爱华  吕立新  何孔旺 《江苏农业学报》2014,(6)

为了研究丝氨酸/苏氨酸磷激酶(STK)在猪链球菌致病过程中的作用,利用大肠杆菌-猪链球菌穿梭质粒p SET4s构建STK基因缺失株△stk。结果显示,stk基因缺失后,缺失株△stk易形成长链状结构;缺失株的半致死剂量(LD50)较亲本株高7倍,对CD1小鼠的致病能力降低;体内定植试验结果表明缺失株△stk在小鼠体内各器官的定植能力显著降低。这些数据表明STK与猪链球菌2型(SS2)的致病性相关。  相似文献   

优化致仔猪水肿病大肠杆菌培养物方法的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

吕立新  何孔旺  还红华  邵国青  倪艳秀  王继春  刘冬霞 《江苏农业科学》2003,(1):53-55

为摸索提高致仔猪水肿病大肠杆菌培养菌数的简单易行的方法，以普通肉汤和马丁汤为基础培养液，分别调整培养成分、通气培养和人工调节培养液的pH值，结果表明：通气培养和维持适宜的pH值能大幅度提高菌数，且马丁汤培养液明显优于普通肉汤培养液。  相似文献   

鸡新城疫病毒自然弱毒株（V4）及其耐热变种（HR）免疫原性测定     

江杰元  何孔旺等 《江苏农业科学》1992,(1):55-56

从澳大利亚引入鸡新城疫自然弱毒V4及耐热变种HR分别点眼接种免疫5日龄雏鸡，无任何临床反应，15天后攻击强毒，免疫雏鸡全部存活，对照组全部死亡，两毒株经尿囊腔接种10日龄鸡胚，96小时后仍存活，血凝抑制试验检测，免疫后7天免疫组抗体平均滴度2^4.4和2^3.7，14天抗体滴度更高，同居感染也出现抗体应答，但不能保护强毒攻击。  相似文献   

利用多重RT-PCR对口蹄疫病毒分型     

刘耀方  何孔旺  张德坤  黄炯  陆承平 《江苏农业科学》2007,(5):136-139

根据已经发表的口蹄疫病毒(FMDV)全基因序列,设计了一套引物,建立多重RT-PCR方法,区分A型、AsiaⅠ型、O型3种血清型的病毒。该方法对O型病毒的敏感性为101.00LD50,对AsiaⅠ型病毒的敏感性为101.25LD50,对A型病毒的敏感性为101.00LD50。该方法具有良好的特异性,能够区分保存适当的病料,可以用于病毒的分型。  相似文献   

PCR方法检测2型猪链球菌2种毒力因子   总被引：21，自引：4，他引：21  

何孔旺  陆承平  倪艳秀  王继春  姚火春 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2002,23(3):1-4

根据 2型猪链球菌毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)与细胞外蛋白因子 (EF)基因 (mrp与 epf)序列 ,分别设计、合成一对引物 ,建立聚合酶链反应 (PCR)方法。该方法扩增出 2型菌株的 mrp大小为 885 bp,epf为 62 6bp,而对马链球菌兽疫亚种 (C群 )、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌、猪肺炎霉形体等 PCR均未扩增出任何条带。用 Xba 和 H ae 分别酶切 PCR扩增产物 ,均获得与预计一致的酶切图谱 ,PCR扩增产物测序结果显示 :其基因序列分别与 Gen Bank上公布的mrp全基因第 5 0 0～ 1 3 1 5位碱基及 epf全基因第 2 441～ 3 0 2 8碱基对一致。PCR检测的敏感度可达 1 0 0个细菌。用建立的 PCR对从病猪体内分离的菌株进行检测 ,检测的 1 5株 2型分离株中有 1 3株 mrp与 epf均为阳性 ,为典型的高毒力表现型菌株 (mrp epf ) ,1株为 mrp epf- ,1株为 mrp- epf- 。  相似文献   

我国牛猪轮状病毒部分分离株的亚组鉴定     

何孔旺  林继煌 《江苏农业科学》1995,(6):54-55

利用轮状病毒亚组特异性单克隆抗体进行捕捉法ＥＬＩＳＡ，对我国４株牛轮病毒分离株和４株猪轮状病毒江苏分离株进行了亚组抗原特异性鉴定，结果证实，所有被测试的牛，猪轮状病毒国内分离株，在亚组抗原特异性上均属第Ｉ亚组，未发现有属于第ＩＩ亚组的毒株。  相似文献   

一例波杂山羊葡萄球菌病与大肠杆菌病混合感染的初步诊断     

张则斌  王芳  徐为中  范志宇  何孔旺  高成华  王平生 《安徽农业科学》2007,35(36):11843-11844,11846

安徽省固镇某羊场3～4月间发生了一起疫情,部分未成年波杂山羊尤其羔羊出现连续发病和死亡。通过采取病死羊病料做病原分离鉴定,结合发病情况、临床症状、剖检病变和药物治疗结果,将该次疫情初步诊断为波杂山羊葡萄球菌病和大肠杆菌病混合感染。  相似文献   

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白2基因克隆、序列分析及表达     

王芳  何孔旺 《农业生物技术学报》2005,13(2):175-178

参照猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniac)血清5型菌株序列ZA6774设计1对特异性引物，用PCR方法扩增转铁结合蛋白2(Tbp2)基因，得到1条1624bp的片段，然后克隆到pMD18-T载体中，经测序比较，与参考序列的核苷酸同源性达99．8％，从T-载体中切下目的片段后，定向克隆到pET32a( )中，转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)，经诱导后，SDS-PAGE电泳，Tbp2高效表达，Western-blotting鉴定呈阳性。  相似文献