猪流行性腹泻病毒 TaqMan 荧光定量 PCR 方法的建立与应用简     

李 彬 刘浩飞 孙 冰茅爱华  杜露平何孔旺郭容利  温立斌张雪寒倪艳秀  周俊明吕立新俞正玉  王小敏胡屹屹  祝昊丹于 洋 《江苏农业学报》2014,(1):125-129

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以水灭火在东南林区的运用     

周俊明 《森林防火》2011,(2)

分析了以水灭火东南林区运用的优势,从建立灭火水源补给系统,发挥现有以水灭火装备最大效能、加强双具备能力建设等三方面,阐述在东南林区如何运用好以水灭火方式。  相似文献   

猪IL-1β与IL-18SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立     

何孔旺  俞正玉  倪艳秀  吕立新  周俊明  张雪寒  李彬  汪伟  温立斌  王小敏  范红结  茅爱华  郭容利 《江苏农业学报》2011,(6):1289-1294

IL-1β和IL-18是重要的促炎症细胞因子,在介导机体炎症反应中起重要作用.为了建立在体外定量检测猪细胞因子IL-1β和IL-18mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法,依据GenBank中登录的猪细胞因子基因IL-1β、IL-18及管家基因β-actin核苷酸序列,设计特异性引物,经RT-PC...  相似文献   

次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)基因在猪链球菌不同血清型中的分布     

倪艳秀  周俊明  张雪寒  温立斌  吕立新  郭容利  俞正玉  茅爱华  何孔旺  陆承平 《江苏农业学报》2008,24(6)

参照GenBank上已发表的次黄嘌呤核甘酸脱氢酶（IMPDH）基因序列,设计引物,对34个猪链球菌不同血清型（缺12型）国际标准株进行了IMPDH基因的PCR检测及序列分析。结果表明：除17型、24型、32型、33型和34型外,其他29个血清型都为阳性,其核苷酸序列的同源性为88．3％～100．0％,所推导的蛋白质序列的同源性为94．7％～100．0％。为进一步研究IMPDH的生物学特性和功能奠定了基础。  相似文献   

类猪圆环病毒因子P1核酸链型和极性的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

温立斌  何孔旺  倪艳秀  张雪寒  李彬  王小敏  郭容利  周俊明  俞正玉  茅爱华  吕立新 《华北农学报》2012,(3):120-122

研究报道类猪圆环病毒因子P1的核酸链型和极性的研究结果。采用氯化铯平衡密度梯度离心获得较为纯净的病毒粒子后,提取病毒DNA,经S1核酸酶消化、特异性单引物第一轮PCR扩增结合常规第二轮PCR扩增等研究,结果表明,类猪圆环病毒因子P1为单股、负链基因组。  相似文献   

猪Hokovirus PCR检测方法的建立及其应用     

李彬  马俊杰  毛立  温立斌  张雪寒  倪艳秀  周俊明  何孔旺 《中国预防兽医学报》2012,34(2):108-111

猪Hokovirus(PHoV)是近年来在香港发现的一种猪细小病毒。为及时评估该病毒在我国的感染及流行情况,本研究根据GenBank中登录的PHoV核苷酸序列设计并合成一对特异性引物,建立了PHoV的PCR检测方法。研究结果表明,所建立的PCR检测方法特异性强,对其它的猪主要病毒无交叉反应;敏感性较高,最低可以检测2.4×104拷贝/μL;而且重复性较好。采用该方法对2009年～2010年我国华东地区猪场的318份临床样品进行检测,结果显示38份样品为PHoV阳性,表明我国猪群中存在PHoV感染。本研究建立的PCR方法可以作为在临床上检测PHoV的一种有效手段。  相似文献   

猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)重组蛋白的酶活性和免疫原性检测     

张雪寒  何孔旺  周俊明  倪艳秀  俞正玉  吕立新 《农业生物技术学报》2009,17(6)

通过PCR方法从猪链球菌2型(Streptococcus suis)05ZYH33分离株基因组中扩增出次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因(inosine 5-monophosphate dehydrogenase,impdh),长度1 064 bp.PCR产物和pET28a载体分别经过EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,连接,成功地构建了重组表达质粒pET28a-impah,并转入大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)中,经过1 mmol/L IPTG诱导获得表达,蛋白大小35kD.表达蛋白具有良好的抗原性和酶活性.蛋白经过亲和层析纯化后,在37℃,pH7.0～9.0表现出较强酶活性,NADH A_(340)介于0.662～0.816之间.  相似文献   

花生新品种泰花4号的特征特性及高产技术     

蔡吉云  周俊明  谢吉先  成宝余  蒋国策 《安徽农学通报》2004,10(6):33-33,73

泰花4号为泰州市旱地作物研究所选育的花生新品种,具有早熟、高产、优质、专用及抗性较强、稳产性较好的特点,适宜全国长江流域的沙土、沙壤土地区种植.介绍其特征特性,结合示范结果,提出泰花4号的高产技术.  相似文献   

猪链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶基因缺失株的构建及其致病性     

祝昊丹  倪艳秀  周俊明  俞正玉  茅爱华  吕立新  何孔旺 《江苏农业学报》2014,(6)

为了研究丝氨酸/苏氨酸磷激酶(STK)在猪链球菌致病过程中的作用,利用大肠杆菌-猪链球菌穿梭质粒p SET4s构建STK基因缺失株△stk。结果显示,stk基因缺失后,缺失株△stk易形成长链状结构;缺失株的半致死剂量(LD50)较亲本株高7倍,对CD1小鼠的致病能力降低;体内定植试验结果表明缺失株△stk在小鼠体内各器官的定植能力显著降低。这些数据表明STK与猪链球菌2型(SS2)的致病性相关。  相似文献   

猪链球菌2型IMPDH基因功能结构域的研究     

刘亚彬  何孔旺  倪艳秀  周俊明  张雪寒  陆承平 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2009,30(2)

在猪链球菌毒力相关基因orf2和mrp之间发现一个新的开放阅读框,经酶活性染色试验证实该阅读框编码的蛋白具有次黄嘌呤核苷酸脱氧酶(IMPDH)活性,该阅读框共计957 bp,编码319个氨基酸.经Interpro和PHD软件分析,推测该蛋白的功能结构域存在于9～798 bp基因片段所编码的多肽中,特对这790个碱基依次缺失,以找寻酶的催化部位和底物结合部位.4个缺失基因和全长基因经过基因克隆,表达出5种相应的蛋白.免疫印迹证实这5种蛋白可被猪链球菌2型(SS2)的抗血清识别,且其中的4种蛋白含有IMPDH单抗(1A8)识别表位;通过活性染色,初步确定了SS2中IMDPH的催化部位和底物结合部位.  相似文献