柠条容器育苗播种时间与生长规律的研究     

梁咏亮  李新志  王小玉 《宁夏农林科技》2007,(3):5-7

通过对沙生树种柠条在同一基质配方、同一容器、同一管理水平条件下进行不同播种时间的工厂化育苗试验,定期观测、统计分析苗高、地径、地上干重、地下干重、总干重和地上地下干重比等生长指标,初步得出柠条容器苗的苗期生长变化规律。筛选出宁夏当地工厂化育苗最佳播种、施肥、出圃时间。  相似文献   

重组伪狂犬病病毒SA215(C)株的构建及其对小鼠的免疫原性     

王新  郭万柱  王印  徐志文  颜其贵  朱玲  王小玉  周婷 《中国兽医学报》2008,28(4):407-411

为了研制猪2型圆环病毒（PCV2）基因工程疫苗,以伪狂犬病病毒（PRV）基因缺失疫苗株SA215为病毒载体,通过同源重组,构建了共表达PCV2ORF2基因和绿色荧光蛋白基因重组伪狂犬病病毒SA215（C）株。经PCR、Southern blotting、Western blotting等证实SA215（C）构建正确,并能表达具有活性的ORF2基因蛋白和荧光蛋白。SA215（C）在IBRS-2、ST细胞中的增殖滴度与亲本株SA215相比无显著差异,表明外源基因的插入不影响病毒增殖。用SA215（C）免疫BALB/c小鼠10周后检测免疫小鼠PCV2抗体和PRV中和抗体及细胞免疫反应。结果显示,SA215（C）诱导小鼠产生了PCV2和PRV抗体并出现PCV2的细胞免疫反应。另外,以105TCID50的SA215（C）株接种BALB/c小鼠,接种后28d再接种1次,2次接种后2周,用107TCID50PRVFa和PCV2强毒联合进行攻击,结果免疫小鼠抵抗住强毒的攻击,获得了保护;表明该毒株具有很强的免疫原性,为研制安全、有效的PCV2-PRV二价基因工程疫苗奠定了基础。  相似文献   

运用RT-PCR／酶切技术快速检测猎传染性胃肠炎病毒     

韩国全  郭万柱  王利娜  王印  岳玉红  林华  王小玉 《黑龙江畜牧兽医》2008,(8)

猪传染性胃肠炎（TGE）是由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪的一种急性高度接触性传染病,临床特征为严重腹泻、呕吐和脱水,不同年龄和品种的猪都易感,1513龄以内的仔猪病死率很高,尤其是10龄以内的仔猪死亡率可达100％。本试验的目的在于建立快速检测TGEV的RT—PCR／酶切方法,为该病的诊断、检测和流行病学调查研究提供更为敏感和可靠的手段。  相似文献   

我国进出口农产品转基因成分检测与分析     

成晓维  王小玉  朱绍智  胡松楠  冯家望  邝筱珊  游淑珠  唐食明 《中国农业大学学报》2014,19(3):43-48

对进出口农产品的转基因成分进行调查研究,分析转基因农产品的检出情况,探讨转基因农产品检出情况与转基因成分的关系,并总结转基因农产品的风险因素。研究采用荧光PCR法对425份进出口农产品样品进行转基因成分检测。结果表明:所检样品中检出含转基因成分的有36份,阳性率为8%。检出的转基因成分主要为转基因大豆、大米、玉米和油菜籽。研究结论是我国进出口农产品中存在转基因成分。进口农产品方面,大豆、玉米及其制品是含有转基因成分的高风险产品;出口农产品方面,大米及其制品是含有转基因成分的高风险产品。  相似文献   

猪II型圆环病毒四川分离株鉴定及其ORF2基因序列分析     

王新  郭万柱  朱玲  徐志文  颜其贵  王印  王小玉  罗燕  周婷 《畜牧市场》2009,(11):21-22

猪圆环病毒（Porcinecircovirus,PCV）,属于圆环病毒科（Circoviridae）,圆环病毒属（Circovirus）,血清型为PCV—1和PCV－2。PCV—1首先由Tis2cher于1974年从PK-15猪肾传代细胞系中分离获得,PCV－2首先由Clark报道了是断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原,  相似文献   

减毒猪霍乱沙门菌C500作为基因疫苗运载体的研究现状     

韩国全  郭万柱  林华  张博  王利娜  李小欢  王小玉 《猪业科学》2009,26(6):80-83

基因疫苗具有众多的优点,被誉为疫苗研究的第3次革命,但是在畜牧生产的使用中存在系列亟待解决的问题,其中关键的问题就是如何将基因疫苗表达质粒导入到动物机体免疫细胞,减毒胞内寄生菌的应用很好的解决这一问题.目前我国仔猪副伤寒弱毒活疫苗使用的基本都是C500株,以其作为猪群重要传染病基因疫苗运载体的应用研究具有重要临床应用价值,对猪霍乱沙门菌疫苗株C500作为基因疫苗运载体的研究现状予以概述.  相似文献   

ORF3基因缺失对猪圆环病毒Ⅱ型感染复制能力的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨晓农  郭万柱  徐志文  王新  殷华平  王小玉  龙虎 《中国兽医学报》2008,28(9)

设计1对特异性引物AF-P1/AF-P2,从疑似PCV2感染的病料中扩增获得1 767 bp的PCV2全基因组(命名为PCV2-CD),克隆至pMD18-T Simple载体构建重组质粒pTS-PCV2-CD.序列分析表明:PCV2-CD与GenBank中公布的12个PCV2毒株间的同源性高达95.0%～100%.用Nco Ⅰ酶切pTS-PCV2-CD获得4 459 bp线性目的DNA片段,补平CATG 4个碱基、连接环化构建ORF3基因插入缺失重组质粒pTS-PCV2-CD-C并测序.用Sac Ⅱ酶切pTS-PCV2-CD-C.回收1 771 bp线性目的片段,体外连接环化构建了ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C.PCR-RFLP检测表明,在脂质体转染法转染mPCV2-C、培养并盲传4代的IBRS-2细胞中(PCVl阴性),特异性检测到mPCV2-C的DNA;电镜观察发现,在盲传6代的IBRS-2细胞胞核内观察到突变毒株的病毒颗粒.试验结果表明:ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C具有感染性,能够在IBRS-2细胞中复制增殖,证实ORF3基因不是PCV2复制的必需基因.  相似文献   

猪圆环病毒Ⅱ型ORF3基因缺失突变毒株对仔猪的致病性及免疫原性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨晓农  郭万柱  徐志文  朱玲  王新  曾秀  王小玉 《畜牧兽医学报》2008,39(8)

15头28～30日龄健康仔猪分成A、B、C3组（5头／组）,分别肌注接种PCV2ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C、亲本毒株PCV2-CD以及生理盐水。用PCR-RFLP和PCR方法,分别从A组和B组屠宰仔猪的腹股沟淋巴结中特异性检测到mPCV2-C和PCV2-CDDNA,发现mPCV2-C能够在仔猪体内复制增殖。组织病理学结果表明;A组和B组腹股沟淋巴结、肝细胞及肺泡壁上皮细胞呈现病变,其中B组病变较严重,证实ORF3基因缺失未改变PCV2的组织嗜性。外周血T淋巴细胞亚群含量动态检测结果表明：与C组相比,A组、B组外周血CD3^＋、CD4^＋细胞百分含量降低,而A组CD8^＋细胞于免疫后第14天回升,高于B组和C组,表明ORF3基因缺失使病毒对T淋巴细胞亚群的影响有所减弱,并有诱导仔猪细胞免疫应答的趋势。上述结果提示ORF3缺失致使病毒的致病力有降低的趋势。PCV2抗体动态检测发现：mPCV2-C明显诱导了仔猪的体液免疫,具有良好的免疫原性。mPCV2-C可作为PCV2基因缺失疫苗候选毒株。  相似文献   

猪流感病毒H3N2亚型的分离鉴定与全基因组序列测定     

孙志勇  郭万柱  韩国全  陈进会  王小玉  徐志文 《畜牧兽医学报》2008,39(2):195-200

通过鸡胚接种、MDCK细胞培养、血凝及血凝抑制试验、RT-PCR等方法,笔者在四川首次分离并鉴定了1株既能在鸡胚上稳定传代又能在MDCK细胞上稳定产生CPE的H3N2亚型猪流感病毒,命名为A／swine／Sichuan／01／2006（H3N2）;NS基因的测序结果表明：该病毒分离株与A／swine／HongKong／4361／99（H3N2）、A／NewYork／429／2003（H3N2）、A／Queensland／6／2000（H3N2）、A／New South Wales／4／1999（H3N2）等具有代表性的标准毒株的同源性都达到99％;从MDCK细胞中抽提流感病毒基因组进行全基因克隆,构建了11个包含全基因8个基因片段的文库。全基因测序结果表明,A／swine／Siehuan／01／2006（H3N2）共8个节段,全基因序列共计13577bp;基于HA、NA推导蛋白的无根进化树结果显示,四川分离株与人流感标准株A／Queensland／6／2000（H3N2）、A／South Australia／81／2000（H3N2）有较近的亲缘关系,而与猪流感标准株A／swine／Spain／42386／2002（H3N2）的亲缘关系较远。  相似文献   

猪呼肠孤病毒SC-A株的分离鉴定及σ2基因的克隆与序列分析     

曾智勇  郭万柱  徐志文  梁海英  宋振辉  殷华平  王新  王小玉 《中国兽医学报》2008,28(7)

通过在病毒培养液中添加胰酶的方法,从仔猪腹泻粪样中分离并鉴定了1株能在Vero细胞上稳定产生CPE,并以细胞颗粒增多、肿胀、漂落为特征的猪呼肠孤病毒SC-A株。在感染细胞中,病毒胞浆包涵体及特征性微管样结构明显,病毒粒子多呈典型的晶格状排列,大小约70 nm。S2基因的克隆测序结果表明,SC-A S2全基因(DQ396805)大小为1 331 bp,其开放阅读框编码一个由418个氨基酸组成,相对分子量约为47 140的σ2蛋白;与标准株T1L、T2J、T3D的核苷酸序列和推导氨基酸序列的同源性分别为86.9%、76.7%、85.4%及94.6%、93.3%、98.3%。以σ2氨基酸序列构建的进化树分析显示,标准株及野外分离株可被划分为A(T3)、B(T2)、C(T1)3个群;除T3C31外,其余3型野外分离株及SC-A株和所有血清1型均位于C群中。  相似文献