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建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性、特异性、重复性和干扰性试验,建立鉴别检测PCV2/PCV3的双重FQ-PCR方法。结果显示:该方法可特异性扩增PCV2、PCV3核酸,与猪伪狂犬病病毒(PRV)等8种病原及阴性对照无交叉反应,特异性较强;对PCV2和PCV3阳性质粒标准品的最低检出限均可达10 copies/μL,敏感性较高;PCV2/PCV3批内/批间重复试验变异系数(CV)值均在3%以下,表明方法稳定性、重复性较好;干扰性试验表明在两种病毒阳性质粒起始模板相差较大时该方法不会影响对其中任一病毒核酸的检出和准确定量。对42份临床疑似PCV感染样品检测结果与PCV2 、PCV3基因测序结果符合率100%。本研究建立的双重FQ-PCR方法具有敏感性高达10 copies/μL、特异性强、在同一反应体系中能同时快速鉴别检测PCV2、PCV3等优点,可用... 相似文献
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脱硫石膏改良碱土过程中特征值变化的研究 总被引:5,自引:1,他引:4
本文通过田间试验,研究了脱硫石膏在改良碱土过程中对碱土特征值(盐分组成、pH值、碱化度、土壤渗透性及硬度)的影响。结果表明:施用脱硫石膏后,碱土各特征值都发生了显著变化,主要表现在碱化度从改良前的30%以上降低到了改良后的5~10%之间;pH值从改良前的9.4以上降低到了改良后的8.2以下;碳酸根、重碳酸根离子明显减少,硫酸根、钙离子及钠离子含量有所增加;土壤渗透性提高了3~8倍;土壤硬度测定值虽仍偏大,但却表现为随着脱硫石膏的施入而减小的趋势。 相似文献
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近年来,临朐县奶牛的改良工作已取得实质性的进展,奶牛的养殖已逐步成为农业经济新的增长点,在养殖奶牛的过程中,奶牛真胃疾病高发病率的风险一直存在着,一旦爆发奶牛真胃疾病必然降低奶牛养殖的经济效益,成年奶牛真胃疾病对其综合生产性能影响较大,必须重视消除各种病因以降低发病率.本文结合长期一线兽医临床实践总结本病的主要致病因、显症表现和防治方法,希望可以与其他业内工作者互为参考,提高我国奶牛行业的整体水平. 相似文献
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冬季气候条件差,对蛋鸡产蛋有很大影响,容易造成产蛋量大幅度下降。1冬季蛋鸡产蛋量下降的主要原因1.1日照时间减少,光照不足蛋鸡产蛋是一个生殖生理过程,受体内多种激素的调节影响,可见光作为一种“信号”通过鸡的视网膜神经传导至大脑皮层、下丘脑等多处神经中枢部位,中枢神经系统根据光信号情况,刺激调控体内一系列激素分泌活动,从而间接地调控了产蛋这一生殖生理过程,冬季日照时间最短,光照强度不足,达不到蛋鸡高产蛋的要求,造成产蛋量下降。1.2天气寒冷,环境温度低尤其是比较简陋的鸡舍,保温性能差。鸡是恒温动物… 相似文献
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非洲猪瘟病毒p54蛋白的表达及单抗制备 总被引:1,自引:0,他引:1
为制备非洲猪瘟病毒p54蛋白的单克隆抗体,本研究扩增p54蛋白的胞外区编码基因,分别克隆到p ET30a和p GEX-6p-1中,构建了p54-p ET30a和p54-p GEX-6p-1重组质粒;将质粒分别转化到大肠杆菌BL21中,表达C末端带6个His、N端带有GST的p54重组蛋白;利用亲和层析的方法,富集和纯化带His标签的p54蛋白;以带His标签的p54蛋白为抗原,免疫BALB/C小鼠,制备单克隆抗体;以带有GST标签的p54蛋白为抗原,对制备的单抗进行特异性验证。结果显示:大肠杆菌能高效表达带His标签和GST标签的非洲猪瘟p54蛋白;His标签的p54蛋白免疫BALB/C小鼠后,得到了3株单克隆抗体;Western blot结果表明,3株单克隆抗体能与带有GST标签的p54蛋白相互反应。本研究成功制备了p54的单克隆抗体,为进一步开展非洲猪瘟ELISA、Western blot和细胞免疫荧光检测技术的开发研究奠定了基础。 相似文献
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