猪CD127流式单克隆抗体的研制          下载免费PDF全文

赵久刚  杨溢欢  潘红梅  朱丹  龙熙  涂志  张凤鸣  郭宗义  陈四清  蓝静 《南方农业学报》2018,49(3):572-579

[目的]研制出猪CD127(调节因子IL-7受体α链)流式单克隆抗体,为研究分析猪淋巴细胞亚群,尤其是猪Treg细胞亚群提供流式细胞分析抗体,也为进一步探究猪抗病性状与免疫机制间的关系打下基础.[方法]克隆猪CD127基因片段,通过原核载体诱导表达出相应的融合蛋白,以纯化后的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,然后取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,综合ELISA和流式细胞仪检测筛选出亚克隆抗体,并采用Western blotting验证所得亚克隆抗体能否与猪淋巴细胞上的CD127特异性结合.[结果]猪CD127基因cDNA全长1999 bp,第49~1428 bp为开放阅读框(ORF),编码459个氨基酸,其中前21位氨基酸为信号肽,成熟肽N端第1~219位氨基酸为胞外蛋白,第220~242位氨基酸为跨膜蛋白,第243~459位氨基酸为胞内蛋白.以pET28a和pET32a原核载体诱导表达CD127胞外片段可获得大小介于34~43 kD的融合蛋白,经Ni亲和层析柱纯化后用于免疫Balb/c小鼠,6只免疫小鼠血清中的多克隆抗体均能对猪淋巴细胞中的CD3阳性细胞(CD3+)进行共标记,其中以M2和M4两只免疫小鼠抗血清对CD3+的共标记效果较优,分群清晰;但流式细胞仪检测发现,仅2.3%的CD3+能与M2混合池培养基上清液中的分泌抗体共标记,而67.0%的CD3+能与M4混合池培养基上清液中的分泌抗体共标记,且分群清晰.从M4混合池中筛选出6株效价稳定的亚克隆细胞株(1E2、1D8、2F3、2F8、3C6和4E1),且以1D8、2F3、2F8和3C6亚克隆抗体标记的CD3+较多,其培养基上清液中的分泌抗体在猪胸腺和肌肉样品中均能检测出大小约50 kD的单一目的条带.[结论]制备获得的猪CD127流式单克隆抗体可与T淋巴细胞表面的IL-7受体特异性结合,同时在流式细胞仪检测过程中可用于猪Treg细胞亚群检测.  相似文献   

猪场医疗废弃物处理现状及对策          下载免费PDF全文

邱进杰  郭宗义  王可甜 《中国猪业》2018,13(11):52-54

本文针对当前养猪场对医疗废弃物不分类或分类不规范、简单就地掩埋或焚烧等处理方式中存在的问题,提出处理猪场医疗废弃物应该有明确的规定和措施,以促进猪场医疗废弃物的规范管理和科学处理,达到高效防控猪场疾病、有效保护生态环境、稳步促进人类健康的目的。  相似文献   

荣昌猪初产繁殖性状的全基因组关联研究     

吴平先  陈力  龙熙  柴捷  张廷焕  徐顺来  郭宗义  王金勇 《畜牧兽医学报》2023,54(1):103-112

旨在鉴定荣昌猪初产繁殖性状的重要变异位点和基因,为荣昌猪繁殖性状的遗传改良提供重要的分子标记和基因资源。本研究选取429头荣昌母猪进行猪50K芯片基因分型,经过质量控制和基因型填充后,保留35 046个SNPs用于分析。采用主成分分析法研究群体结构,利用混合线性模型(mixed-linear model, MLM)将出生年、出生月作为固定效应,将主成分值作为协变量对总产仔数、活产仔数、死胎数和初生窝重性状进行全基因组关联分析(GWAS)。结果显示,在全基因组显著水平上鉴定出2个影响荣昌猪初生窝重的SNPs和1个影响荣昌猪死胎数的SNP;在潜在显著水平上鉴定到5个影响荣昌猪总产仔数的SNPs, 3个影响荣昌猪活产仔数的SNPs和10个影响荣昌猪死胎数的SNPs。通过全基因组关联分析筛选到1个显著的SNP(SSC17:57 315 180 bp)同时影响荣昌猪总产仔数、活产仔数和初生窝重,1个显著的SNP(SSC1:279 214 647 bp)同时影响荣昌猪活产仔数和总产仔数,暗示基因在不同性状间具有一因多效性。本研究根据候选基因的相关分子生物学功能,确定BMP7基因为影响荣昌猪总产仔数...  相似文献   

重庆市地方猪遗传资源现状分析与对策探讨     

陈红跃  张科  范首君  王华平  郭宗义 《黑龙江畜牧兽医》2015,(2):14-16

<正>重庆市位于青藏高原与长江中下游平原的过渡地带,属亚热带季风性湿润气候,域内江河纵横,峰峦叠翠,地形复杂,以"山城"著称。多样化的地理生态形成了若干个小区,在长期的社会经济发展过程中,经过巴渝人民的驯养和精心选育,形成了丰富多彩各具特色的地方畜禽遗传资源。经过畜禽遗传资源调  相似文献   

不同饲养方式对育肥猪后期饲喂效果研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

郭宗义  涂志  朱丹 《中国猪业》2016,(8):60-61

选择62头100 kg左右的洋三元商品猪,分为大圈群养和限位栏单体饲养,在相同的饲养管理条件下饲养34天,测定其日增重和饲料报酬;试验结束后每组选择6头猪进行屠宰,测定其肉质性状。结果表明限位饲养组的日增重和饲料报酬优于群养组,而群养组的肉质优于限位饲养组。  相似文献   

生物制品免疫生猪引起的反应及应对措施     

周万超  郭宗义 《畜禽业》2009,(3)

<正>生物制品是应用微生物(细菌、噬菌体、立克次体、病毒等)、微生物代谢产物、寄生虫和动物的毒素、人或动物的血液或组织等,直接制成或用现代生物技术、化学方法制成,作为预防、  相似文献   

福利养猪之“120模式”     

刘良  毛建军  郭宗义  王介平  唐钦 《畜禽业》2009,(9):4-5

在饲料水平相同的条件下,同一遗传条件的发挥主要就取决于饲养环境。生态福利养猪日益被国人所认识,介绍了农村条件下进行福利养猪的"120模式"的概念、实施方法、优点和存在的问题。  相似文献   

南方规模化猪场面临霉菌毒素困扰     

郭宗义  魏文栋 《猪业科学》2006,23(6):50-53

霉菌毒素是某些霉菌在饲料上生长繁殖过程中产生的有毒二次代谢产物,目前已经检测到的霉菌毒素已经超过350种,对猪产生危害最大最常见的主要是黄曲霉毒素。呕吐毒素、玉米赤霉烯酮。本文针对南方的气候和自然条件．介绍了霉菌毒素对规模化猪场的严重危害和广泛存在的原因,介绍了霉菌毒素的类型以及霉菌毒素中毒的症状、预防措施和控制措施。  相似文献   

大约克专门化父系选育进展报告   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈四清  魏文栋  王金勇  郭宗义  李社成  张凤鸣  景绍红 《畜禽业》2000,(5):35-37

大约克专门化父系经 ４个世代的半封闭群体继代选育,主要生产性能指标取得了显著进展,全面完成和超额完成选育任务指标,后备猪生长发育、肥育性能、繁殖性能及配套利用效果,１～４世代均有明显提高和改进。４世代与１世代比较,６月龄后备公猪作重、体长由９０．４ｋｇ、１１７．６ｃｍ提高到９１．８ｋｇ、１１９．８ｃｍ,后备母猪由８０．８ｋｇ、１１４．７ｃｍ提高到８８．３ｋｇ、１１８．８ｃｍ;肥育猪９０ｋｇ体重日龄由２０９．８ｄ缩短到１７９．６ｄ,比选育指标缩短０．４ｄ．日增重由４８３．７ｇ增加到 ６８２ｇ,耗料指数由３．３６下降到 ２．８８,比选育指标下降０．３２,胴体瘦肉率由５９．６５％提高到６３．６７％,超选育指标１．６７个百分点;ＰＨ值、失水率等主要肉质指标有所改善;经产猪产仔数１２．５４头,比基础群提高０．４５头;与Ⅲ系配套生产的杂优猪日增重６８３ｇ,耗料指数３．０９,胴体瘦肉率５８．１９％。  相似文献   

品种与营养水平及其互作对猪肉质的影响     

欧秀琼  钟正泽  黄健  江山  郭宗义  陈代文  张克英 《四川畜牧兽医》2000,27(11):17-17,19

试验选用荣昌公猪(去势)45头,长白母猪(未去势)45头,采用2×3因子设计,共6个处理,每个处理5个重复,研究品种与营养水平及其互作对猪肉质的影响.营养水平设高(DE3.3Mcal/kg)、中(DE3.0Mcal/kg)及低(DE2.7Mcal/kg)三个水平,日粮蛋白质水平则根据能量水平及饲养阶段作相应调整,赖氨酸均占日粮粗蛋白质含量的0.5%.试验结束后,每个处理选择5头接近处理平均体重的猪只进行屠宰,测定肉色、pH1值、失水率、贮存损失及肌肉大理石纹.结果表明:品种是决定猪肉质的主要因素,荣昌猪各项肉质指标均显著或极显著地优于长白猪(P＜0.05,P＜0.01);营养水平对猪肉质也有一定影响,pH1值、失水率及贮存损失不同营养水平间存在显著或极显著差异(P＜0.05,P＜0.01);肌肉大理石纹评分存在极显著的品种与营养水平间的互作效应(P＜0.01).  相似文献