侵染广西甜椒的西瓜银斑驳病毒分子鉴定     

谢慧婷  崔丽贤  秦碧霞  陈锦清  李战彪  蔡健和 《植物病理学报》2021,51(3):474-477

During a survey in 2019, sweet pepper plants (GXTJ) showing symptoms of ring spots and chlorotic on leaves and fruits were collected in Wuming district of Guangxi province. Serological tests by DAS-ELISA demonstrated that the GXTJ was reacted positively against to antisera of watermelon silver mottle virus (WSMoV), but negatively against to antisera of the tomato spotted wilt virus (TSWV), cucumber mosaic virus (CMV) and tobacco mosaic virus (TMV). Total RNA was extracted and 2 pairs specific primers were designed to amplify the WSMoV N gene sequence by RT-PCR. Two expected fragments (769 bp and 654 bp) were obtained from GXTJ, The results of sequence analysis showed that the sequence of N gene was 828 nt and sharing 100% identity with WSMoV isolates from Taiwan (X78556, U78734). Base on the phylogenetic analysis, the N gene sequence of WSMoV-GXTJ was grouped in the same clades as WSMoV isolates from Taiwan. These results indicate that the virus isolate from sweet pepper in Guangxi is an isolate of WSMoV.  相似文献   

百慕大成熟胚的组织培养及植株再生   总被引：22，自引：3，他引：19  

胡张华  陈火庆  吴关庭  金卫  章锡良  郎春秀  黄锐之  陈笑云  刘智宏  夏正红  陈锦清 《草业学报》2003,12(1):85-89

百慕大是一种难以培养的草坪草。本研究首次以百慕大成熟胚为外植体，通过对胚性愈伤组织的发生进行植株再生。结果表明，百慕大成熟种子的出愈能力很强，且不同的基本培养基诱导效果相近，但初生愈伤组织呈无定型棉絮状，不能再生成株。采用提高培养基中蔗糖和琼脂浓度以及在培养基中附加适宜浓度ABA，CH和一定比例的生长素与细胞分裂素的方法，对初生愈组织实施继代改造，高频诱导出致密颗粒状的，具有高度再生能力的胚性愈伤组织，此类胚性愈伤组织在含有2.0mg/L 6－BA，1.0mg/LK和0.5mg/L NAA的分化培养基上再生频率较高。  相似文献   

Anti—SAD基因植物表达载体的构建     

黄锐之  刘智宏  郎春秀  胡张华  陈锦清 《浙江农业学报》2001,13(5):272-275

硬脂酰－ACP脱饱和酶（SAD；EC1．14．99．）是植物中广泛存在的酶系，在脂肪酸合成途径中脱饱和的起始阶段中起催化作用，在脂肪酸饱和度调控中起着关键作用。本研究通过对已克隆的硬脂酰－ACP脱饱和酶基因分析，合成了SAD基因保守区域基因片段，并将该片段插入载体pIG121的Sac I位点，构建了Anti-SAD植物表达双元载体，为进一步开展植物脂肪酸成份基因工程调控研究提供了基础。  相似文献   

甘蓝型油菜及近缘种中异质型ACCase亚基accd编码基因的克隆及序列分析     

王伏林  吴关庭  郎春秀  刘仁虎  陈锦清 《农业生物技术学报》2008,16(4)

采用RT-PCR方法,以甘蓝型油菜、甘蓝、芥菜型油菜和白菜型油菜的幼嫩叶片cDNA为模板对异质型乙酰辅酶A羧化酶（ACCase）的β-CT亚基（羧基转移酶）的accd编码基因进行扩增,得到长度分别为1470bp、1470bp、1464bp和1464bp的编码序列,分别可编码490、490、488和488个氨基酸的蛋白质。序列分析表明,来自4个油菜近缘种的accd基因高度同源,编码的蛋白质都具有相似的锌指结构和C-末端5个相同的基元,其中基元I（GSMGSVVG）和基元II（PLIIVCASGGARMQE）在所有植物及大肠杆菌的β-CT亚基中普遍存在。Southern杂交显示该基因在甘蓝型油菜及其近缘种的基因组中呈单拷贝。  相似文献   

广西主栽水稻品种抗水稻齿叶矮缩病鉴定          下载免费PDF全文

谢慧婷  崔丽贤  李战彪  秦碧霞  陈锦清  蔡健和 《南方农业学报》2017,48(7):1211-1215

[目的]了解广西主栽水稻品种对水稻齿叶矮缩病的抗性水平,为病害的综合防控及抗病育种研究提供理论依据.[方法]采用苗期人工接种鉴定方法,结合发病症状和RT-PCR检测结果,明确45份广西主栽水稻品种对水稻齿叶矮缩病的抗性水平.[结果]测试的45个主栽水稻品种中未发现对水稻齿叶矮缩病抗病的品种,其中表现高感的有41个,占测试品种的91.11%,表现中感的有4个,占测试品种的8.89%.[结论]目前的广西主栽水稻品种对水稻齿叶矮缩病缺乏抗病性.  相似文献   

兔病毒性出血症病毒中国株(JX/CHA/97)全基因组分子克隆及序列分析     

倪征  方维焕  张玉颖  云涛  陈锦清  刘光清 《中国预防兽医学报》2006,28(6):668-671,675

本研究首次完成了免病毒性出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）中国分离株JX／CHA／97全基因组序列的测定与分析。研究结果表明，JX／CHA／97株的全基因组由7437个核苷酸组成，其基因组构成为：5＇端有一个长度仅为9nt的非编码区，随后有2个阅读框架（ORFs）．分别编码一个聚合蛋白和一个结构蛋白。在基因组的3＇端也有一个非编码区，长度为59nt。另外，采用RACE方法获得了RHDV的poly（A）尾序，证明该结构至少含有27个A。根据RHDV衣壳蛋白的基因序列，将JX／CHA／97株与来自世界各地的22株RHDV分离株的基因组序列进行了比较与分析，并绘制了系统发生树。结果表明，RHDV各分离株之间存在较高的序列同源性，可以将它们至少分为6个拓朴群，提示RHDV有朝不同方向发生进化的趋势。  相似文献   

油菜农杆菌转基因体系的建立及转PEP反义基因油菜的获得   总被引：21，自引：0，他引：21  

郎春秀  胡张华  刘智宏  黄锐之  陈锦清 《浙江农业学报》1999,11(2):55-58

本研究建立了油菜农杆菌转基因技术体系,用根癌农杆菌共培养法将ＰＥＰ反义基因导入甘蓝型油菜主栽品种浙油７５８和浙优油１号,获得高含油量的油菜植株。实验所用外植体为培养８￣１０ｄ的无菌苗下胚轴;农杆菌为ＥＨＡ１０１（含ＡｎｔｉＰＥＰ／ＰＩＧ１２１）,外植体经农杆菌感染后共培养２ｄ,转入含５００ｍｇ／Ｌ羧Ｃｈｕ青霉素的ＭＳ培养基上,１周后转入含羧Ｃｈｕ青霉素及潮霉素的培养基上,以后每２周继代一次至出现抗  相似文献   

高羊茅CBF转录激活因子基因片段的克隆   总被引：4，自引：0，他引：4  

吴关庭  胡张华  郎春秀  陈笑芸  陈锦清  夏英武 《核农学报》2004,18(5):353-356

根据拟南芥CBF基因序列的保守区设计 1对特异引物 ,采用PCR方法从高羊茅基因组中扩增出 1个DNA片段并克隆到pUCm T载体中。经序列测定和分析 ,该片段长 60 8bp ,与 3个拟南芥CBF基因的核苷酸及其推导氨基酸序列分别具有 81～ 84%和 75～ 79%的同源性 ,而且推导氨基酸序列中包含有同源性更高的AP2DNA结合域以及CBF蛋白的两段特征序列PKK RPAGRxKFxETRHP和DSAWR。这些结果表明 ,本研究克隆的片段为高羊茅CBF基因片段  相似文献   

大肠杆菌异质型ACCase亚基基因accB重组表达载体的构建和原核表达     

王伏林郎春秀  吴关庭陈锦清 《中国农学通报》2009,25(23):74-77

摘要：克隆大肠杆菌乙酰辅酶A羧化酶（Acetyl CoA Carboxylase, ACCase）的生物素羧基载体蛋白（biotin carboxyl carrier protein,BCCP）亚基基因accB,构建accB的原核表达载体pGEX-4T-accB,转化大肠杆菌BL21（DE3）工程菌株, IPTG诱导进行融合表达,成功诱导表达了GST-accB融合蛋白,大小为43KDa。  相似文献   

高羊茅遗传转化研究进展     

吴关庭  陈锦清 《草业科学》2006,23(12):51-55

高羊茅Festuca arundinacea是一种在世界温带地区广泛种植的很重要的多年生冷季型牧草和草坪草,长期以来其品种改良主要依靠常规育种方法。植物基因工程技术的发展为高羊茅新品种选育提供了一种很有潜力的手段,目前国內外的许多公司和实验室都在利用转基因技术改良谊草种的耐逆性、病虫害和除草剂抗性以及品质等性状。本文从受体材料、转化方法、目标基因、影响因素、转基因遗传等多个方面综述了迄今为止高羊茅遗传转化研究所取得的进展。  相似文献