不同种型布鲁菌标准株的比较基因组学研究     

钟志军  徐杰  于爽  王玉飞  周冬生  黄祥明  乔凤  曲勍  杨洋  罗永久  刘学涵  原慧  陈燕芬  黄克和  陈泽良  彭广能 《兽医大学学报》2013,(12):1783-1791

探究不同种型布鲁菌标准株的基因组构成差异。通过布鲁菌全基因组DNA芯片技术对19株不同种型布鲁菌标准株进行比较基因组学研究。结果显示：19株不同种型布鲁菌标准株之间存在大量缺失基因,同时发现一些基因以多拷贝形式存在。缺失基因的功能大致分为4类：信息储存和传递;胞内活动处理;营养代谢、功能未知或仅了解部分功能,共鉴定到这类基因211个。深入认识了19株不同种型布鲁茵标准株基因组组成上的差异,为我们进一步认识不同种以及亚型在毒力以及宿主特殊性提供了依据。大量缺失基因在19株布鲁菌标准株出现,构成了布鲁菌标准株不同种以及亚型之间的遗传学基础。  相似文献   

猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法的建立     

潘群兴  何孔旺  段治涛  黄克和 《江苏农业学报》2007,23(6):588-592

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列设计特异性引物,进行PCR反应,回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,再定向克隆到表达载体pET-32a中并转化大肠杆菌Rosetta,进行原核表达.表达产物经His-Bind蛋白纯化试剂盒纯化,平均浓度为1.10 mg/ml.以1.8 μg/ml蛋白包被酶标板,建立ELISA检测方法.建立的ELISA方法与北京世纪元亨公司试剂盒比较,两者检测结果符合率达85%以上.用该方法对常州某猪场36份母猪和156份10～160日龄猪群血清样品进行了检测,检测结果显示母猪阳性率为81.4%,仔猪阳性率随着日龄的增加而逐渐降低,之后由于受PCV-2的感染,阳性率逐渐升高.本试验建立的ELISA方法,具有较好的特异性、重复性和敏感性,可用于猪群PCV-2抗体的大规模检测.  相似文献   

肿瘤型马立克氏病临床病例的自由基生物学研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

黄克和  陈万芳 《南京农业大学学报》1995,18(2):90-94

本文报道了肿瘤型马立克氏病（ＭＤ）鸡血清、全血或组织中的总超氧化物歧化酶（Ｔ－ＳＯＤ）、锰超氧化物歧化酶（Ｍｎ－ＳＯＤ）、铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）牧谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）活性以及血清丙二配合（ＭＤＡ）含量。统计结果表明，与健康鸡相比，肿瘤型ＭＤ鸡血清中Ｔ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ与ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性以及红细胞中的ＣＡＴ活性均极显著降低（Ｐ＜０．０１）；肿  相似文献   

锌、铜对钼中毒绵羊免疫功能的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

杨自军  冉林武  王婷  张才  王宏伟  刘凤军  黄克和 《中国兽医学报》2009,29(2)

选择健康小尾寒羊20只,随机分为5组,每组4只,分别口服钼、铜和锌,Ⅰ组30 mg/(kg·d)钼,Ⅱ组30 mg/(kg·d)钼+15 mg/(kg·d)/铜、Ⅲ组30 mg/(kg·d)钼+15 mg/(kg·d)锌、Ⅳ组30 mg/(kg·d)钼+15 mg/(kg·d)铜+15 mg/(kg·d)锌、Ⅴ组单口服无离子水,试验期75 d.定期采血,测定血液T、B淋巴细胞百分率及其绝对值和血清α、γ球蛋白含量.结果表明,高剂量钼(钼≥30 mg/(kg·d))可引起绵羊T、B淋巴细胞百分率下降,造成免疫损伤.其中B淋巴细胞较敏感.30 mg/(kg·d)钼降低了血清γ球蛋白和α球蛋白含量.锌对钼中毒绵羊免疫功能有一定的保护作用,而铜的保护作用不明显;15 mg/(kg·d)锌和15 mg/(kg·d)铜协同对30 mg/(kg·d)钼所致绵羊的免疫损害有很好的保护效果.  相似文献   

表达小反刍兽疫病毒F蛋白的重组山羊痘病毒疫苗的研究     

曲林茂  陈伟业  胡倩倩  胡森  张倩  支海兵  黄克和  步志高 《中国预防兽医学报》2009,31(6)

本研究利用gpt筛选基因和eGFP报告基因纯化筛选重组小反刍兽疫病毒(PPRV)F基因的重组山羊痘病毒(rGPV-PPRV-F),并经过PCR鉴定.免疫荧光和蛋白印迹试验都证实重组病毒能够感染绵羊羔羊睾丸细胞并表达PPRV F蛋白.以2×106PFU的rGPV-PPRV-F皮内注射免疫山羊3只,并于首次免疫后第28 d以相同剂量进行二次免疫.分别于一免后21 d和二免后14 d采血后分离血清进行病毒中和试验.结果表明,一免后21 d山羊痘病毒(GPV)中和抗体效价依次为1:40、≥1:80、≥1:80,PPRV中和抗体效价依次别为1:20、1:40、1:20,全部阳转;二免后14 d,GPV中和抗体效价≥1:80,PPRV中和抗体效价依次为1:20、1:80、1:40.本研究为小反刍兽疫重组山羊痘疫苗的产业化奠定了基础.  相似文献   

硒对雏鸡T淋巴细胞转化和自然杀伤细胞活力的影响   总被引：17，自引：0，他引：17  

黄克和  陈万芳 《南京农业大学学报》1999,22(2):76-79

将１日龄罗曼系商品代蛋用健康公雏３６０羽随机均分成３组。对照组饲喂基础日粮,补硒Ⅰ组和补硒Ⅱ组在饲喂基础日粮的同时分别添加０．３和０．６ｍｇ／ｋｇ硒。分别于７,２１,３５和４９日龄采用微量全血培养３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定雏鸡外周血Ｔ淋巴细胞转化率,ＬＤＨ释放法测定ＮＫ细胞活力,荧光分析法测定血硒含量,化学法测定ＧＳＨ－Ｐｘ活性。定期称重并进行临床观察。结果表明,补硒能显著并持续地增强雏鸡外周血淋巴细胞对ＰＨＡ的应答能力和ＮＫ细胞活力。另外,还对全血淋转试验３Ｈ－ＴｄＲ掺入法进行了讨论。  相似文献   

高钙与高蛋白日粮诱发鸡痛风的尿液临床病理学研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

郭小权  黄克和  唐建霞 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2005,26(4):8-11

将120羽35日龄伊沙蛋鸡随机均分为对照组、高钙组、高蛋白组和高钙高蛋白组,进行30d的饲养试验。50日龄时测定分析鸡的尿液和尿沉渣。结果表明：高钙高蛋白组鸡发生了典型的内脏型痛风;与对照组和高蛋白组相比,高钙组和高钙高蛋白组鸡尿量显著增加,尿液pH值升高,尿液中钙、钠、钾和镁相对含量和24h尿钠总量显著降低;高钙组和高钙高蛋白组鸡尿液中尿酸、钙、无机磷、钾和镁的24h总量和高蛋白组尿液无机磷的相对含量以及尿酸和无机磷的24h总量显著高于对照组;对照组和高蛋白组鸡尿沉渣以球状晶体居多;高钙组鸡尿沉渣中以针状晶体较多;高钙高蛋白组鸡尿沉渣中针状及球状晶体含量相当。与对照组相比,高钙组尿沉渣中钙、磷含量升高,而钾、钠和镁含量均下降;高蛋白组和高钙高蛋白组尿沉渣中磷含量升高,而钙、钾和钠含量均下降。  相似文献   

伪狂犬活/灭活病毒接种小鼠诱导免疫效力及差异因子比较     

章晨昕  于晓明  侯立婷  张元鹏  乔绪稳  侯继波  黄克和  郑其升  陈瑾 《南京农业大学学报》2023,(1):106-111

[目的]本研究旨在比较活/灭活病毒进入体内后对免疫系统活化的差异，为免疫增强剂的筛选和评价建立高效动物模型。[方法]本试验利用伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株建立小鼠伪狂犬人工感染模型，筛选活/灭活病毒接种小鼠后免疫相关差异因子。将PRV Bartha-K61活毒以不同剂量、不同方式感染小鼠，通过计算小鼠存活率确定最佳感染剂量与感染方式；将筛选的最佳剂量的伪狂犬病毒活毒与相同剂量下灭活病毒按照前述筛选的最佳感染方式接种小鼠，利用ELISA试剂盒检测免疫7 d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IFN-β和IL-6水平；利用PRV gB ELISA检测免疫7 d后小鼠血清PRV特异性gB抗体水平；利用灭活PRV作为特异性抗原进行淋巴细胞增殖试验并计算各组淋巴细胞刺激指数(SI)。[结果]在保证小鼠存活的前提下，6～8周龄小鼠的PRV的安全感染剂量为5×10⁴ TCID50;同等剂量下，相比于肌肉和腹腔注射，皮下注射为最安全的感染方式；同等剂量的活毒和灭活病毒接种小鼠后，与灭活病毒组相比，活病毒感染7 d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IFN-β水平显著...  相似文献