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51.
多重PCR检测猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒 总被引:26,自引:0,他引:26
根据猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)3种病原体的基因保守序列,分别设计了与CSFV的E2基因、PPV的VP2基因和PRV的gⅡ基因序列互补的3对引物。用这3对引物对人为混合的样品中的PPV和PRV的DNA模板及CSFV反转录后的cDNA模板进行多重PCR扩增和多重PCR反应奈件的优化,结果同时得到3务与试验设计相符的288bp(CSFV)、575bp(PPV)700bp(PRV)特异性条带;敏感性检测结果表明,该多重PCR可以检测到14.5ng/L的CSFV、27.1pg/L的PPV、31.4ng/L的PRV的核酸模板。 相似文献
52.
三种PCR方法诊断猪伪狂犬病的比较研究 总被引:8,自引:0,他引:8
针对伪狂犬病毒gD基因的不同片段设计三对引物,分别进行PCR扩增用于猪伪狂犬病的诊断,扩增的三个片段的长度分别为262bp、217pb以及1203bp的全基因。通过比较发现,这三种PCB诊断方法均具有很高的特异性和敏感性,值扩增gD基因内部262bp的PCR诊断方法种具有突出优点,其退火与延伸合成一步,其操作可于1h内完成,敏感性更高,更适于猪伪狂犬病的快速诊断。 相似文献
53.
54.
聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定禽呼肠孤病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
从感染禽呼肠孤病毒的细胞中,以SDS和酚提取病毒核酸,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法将分节段的核酸分开,经银染色显示,呈3-3-1-3分布,此法可用于禽呼肠孤病毒的快速检测、鉴定。同样方法未能使传染性法氏囊病毒核酸显示。 相似文献
55.
56.
57.
58.
59.
小鼠H-Y单克隆抗体ELISA检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
以纯系 BAL B/ c雄性小鼠脾细胞腹腔注射免疫同系雌性小鼠 9次 ,获得的抗血清经雌、雄鼠脾细胞吸收后用于精子细胞毒性试验 ,测得 H- Y抗血清效价为 1/ 16 0。选取免疫应答最好的雌鼠脾细胞与 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,用精子细胞毒性方法筛选效价较高的细胞株制备腹水 ,建立优化的 EL ISA反应条件。优化后的 EL ISA反应条件为 :抗原4℃过夜 ,加 H- Y抗血清 37℃反应 12 0 m in,加 HRP- Ig G 37℃反应 30 min,加 TMB 2 5℃ 30 min。优化后的 EL ISA与常规 EL ISA比较 ,可以明显降低阴性吸光值 ,检测灵敏度从 1/ 32 0上升为 1/ 12 80 相似文献
60.
羊源链球菌的分群鉴定及多价灭活苗的研制 总被引:1,自引:0,他引:1
2000~2003年,从安阳、邯郸等6个地区采取280份羊的病料,从中分离到150株链球菌,对其中20株典型分离株进行了生化分群鉴定及兰氏分群A~G诊断试剂鉴定.结果表明,6个地区发生的羊的链球菌病主要由C群兽疫链球菌(7/20),D群(8/20),E群(2/20)引起.其分布无明显地域性.选择C、D、E群中各1株为菌种,制备多价链球菌灭活苗,通过免疫试验,保护率达92%以上,免疫期半年以上,疫苗4℃保存期1年以上,证明该灭活苗安全性好,免疫效果明显. 相似文献