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将构建的pBST2~6工程菌质粒用限制性内切酶BamHI/BglⅡ酶切,经琼脂糖凝胶电泳和电洗脱,回收147bp的目的ST1基因。随之将该基因分别重组到能有效表达K99菌毛抗原和LacZ酶的pGK99之K99基因BglⅡ位点和pUC18的BamHI位点中。通过ST1基因探针菌落原位杂交、特定酶切分析及DNA序列分析,筛选并鉴定出了理想重组子,从而构建出了能分别表达ST1融合基因产物的工程菌株pSK219和pXST1。 相似文献
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仙客来离体叶培养与植株再生 总被引:8,自引:0,他引:8
以仙客来叶片、叶柄及其不同部位为外植体进行诱导,结果幼叶基部(叶子基部与叶柄相连处的断口部分)诱导愈伤组织频率最高,可达100%。愈伤组织在N_6+BA2mg/1+2,4-D0.5mg/1培养基上培养,约40d左右可100%分化出不定芽,其不定芽数量一块愈伤组织最多可分化出30个以上。将幼苗移入1/2MS+NAA 0.5mg/1培养基中生根最好。 相似文献
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以原头节可溶性粗抗原经Sephadex G-200层析纯化抗原为包被抗原,兔抗羊IgG-HRP结合物为显色剂,建立检测羊脑多头蚴病血清抗体的Dot-ELISA,并以ELISA作平行对照。结果,粗抗原和层析纯化抗原检测86头份羊脑多头蚴病阳性血清,其敏感性分别为94.18%和93.02%,两种抗原的敏感性无显著差异;检测122头份绦虫蚴病阴性血清,18头份棘球蚴病阳性血清,35头份细颈囊尾蚴病阳性血清,其特异性分别为90.29%和95.43%。两种抗原的特异性差异显著。Dot-ELISA和ELISA两种方法的符合率为100%。层析纯化抗原比粗抗原的特异性有了明显提高,而敏感性没有降低。层析纯化抗原和操作术式都具有良好的重复性,Dot-ELISA和ELISA对比试验结果相近,且具简便、快速及不需要复杂设备等优点,是一种检测羊脑多头蚴病血清抗体的理想方法。 相似文献
35.
山羊子宫内肽能神经分布及妊娠时的变化 总被引:4,自引:1,他引:3
采用免疫组化方法,研究了山羊子宫内含P物质(SP)和含血管活性肠肽(VIP)神经的分布。结果,妊娠及未妊娠山羊子宫颈内有粗细不等的神经束行经于外膜和肌层中,神经分支形成丛状分布于血管壁,子宫颈部未见SP神经元胞体及VIP神经元胞体;未妊娠山羊子宫角内SP神经和VIP神经均呈丛状围绕血管并分布于血管壁;妊娠中期的孕角和非孕角均有胎盘形成,除胎盘内无神经分布外,SP神经及VIP神经同样分支形成丛状分布于血管壁。结果提示,山羊子宫内SP神经和VIP神经主要支配子宫内血管,妊娠时除胎盘内无神经分布外,SP神经及VIP神经的分布无明显变化。 相似文献
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猪在断奶后的生长期内,体内脂肪逐渐增加,和其它家畜相比,猪更倾向沉积体脂。但猪体脂的沉积还要受遗传、年龄、日粮营养水平等因素的影响。在饲粮消化能量(DE)水平保持在3000—3200Kcal/kg,蛋白质含量为14%—15%的饲养条件下,我们分别测定了纯系北京黑猪(肉脂兼用型,平均瘦肉率为51%)和纯系长白猪(瘦肉型猪、平均瘦肉率为62%)的某些脂肪合成酶活性和脂肪代谢的一些生化指标。北京黑猪(公母各半)脂肪组织(背膘)中苹果酸酶(ME),葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G—6—PDH),异柠檬酸脱氢酶(ICDH)三种NADPH—生成酶活性随体重增加而升高,差异极其显著(P<0.001)。体重90kg的酶活性比56kg约高三倍。脂纺组织中上述NADPH生成酶活性北京黑猪比长白猪(体重均为90kg,公母各半)高一倍(P<0.001)。给北京黑猪(30头,公母各半,起始体重为60kg)注谢重组猪生长激素(rPGH,每天每头2mg,连续注谢28天),除表现生长加快,脂肪率下降约21%—23%外,其脂肪组织中NADPH生成酶活性降低十分明显(P<0.001)。苹果酸酶,葡萄糖—6—磷酶脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶,三种酶总活性比对照组降低20%。血精中三酰甘油,游离脂肪酸,总胆固醇,高密度脂蛋白(HDL)胆固醇、乳糜微粒,极低密度脂蛋白(VLDL)胆固醇含量,6月龄时,北京黑猪明显高于长白猪(P<0.001—0.0005);而4月龄时,北京黑猪血清中三酰甘油,高密度脂蛋白胆固酶含量则均明显低于长白猪。北京黑猪血清中三酰甘油,高密度脂蛋白胆固醇含量,随月龄(4月龄—6月龄)增长而增加(P<0.0005)。而长白猪则相反,随月龄而呈下降趋势(P<0.05—0.0005)。两种猪的脂蛋白电泳和含量测定未见有年龄和品种间的差异。 相似文献
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38.
动物肠道免疫的构成与功能 总被引:1,自引:0,他引:1
肠道作为机体重要的组成部分,人们对它的认识长期集中在对营养物质的消化和吸收上。近年来随着对机体组织器官的深入研究和科研手段的进步,胃肠的研究工作也从单纯的养分消化向全方位发展。正常情况下,肠道可有效阻挡肠内500多种、浓度高达10^12个/g的肠道内寄生菌及其毒素向肠外组织移位,同时产生高效的细胞和体液免疫,防止内源性微生物及其毒素的侵害;对于无害抗原(食物或正常菌群),肠黏膜可下调免疫应答反应,保证机体及时获得养分, 相似文献
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对含伪狂犬病病毒Ea株BamH17片段的质粒pUC6.6进行亚克隆,构建了仅含Us9基因约0.6kb片段的重组质粒pSKMN0.6。双脱氧末端终止法进行双链测序,结果表明:Us9存在2种可能的同C-末端的编码形式,分别编码106或98个氨基酸残基,Us9基因与其下游的Us2(28K)基因之间存在约200bp的非转录区,将Ea株Us9基因序列同国外Rice株进行没源比较,发现二者在组成和结构上存在多处保守序列,尤其是潜在的酪氨酸磷酸化位点,C-端疏水性氨基酸以及由连续6个带正电荷的精氨酸残基组成的核定位信号序列,但在N-糖基化位点以及丝氨酸含量上存在较大差异。 相似文献
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