利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联技术构建产肠毒素大肠杆菌LT敲除菌株     

檀克勤  马现永  崔艺燕  田志梅  邓盾 《中国畜牧兽医》2020,47(3):666-675

本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）K88的热不稳定性肠毒素（heat-labile toxin，LT）基因进行无痕敲除并获得K88 LT^-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列，并构建包含LT边界、氯霉素筛选标记、sgRNA和LT同源臂的供体片段；将供体片段转化至ETEC K88，同时分别利用λ-Red同源重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统，对LT基因进行敲除；通过PCR验证获得了K88 LT^-缺陷菌株，并通过试验测定了敲除菌株的溶血能力和生长曲线。结果显示，λ-Red同源重组系统可成功地将LT基因替换为相应的供体片段，CRISPR/Cas9基因编辑系统可高效地对筛选标记进行删除，最终通过λ-Red和CRISPR/Cas9结合的基因编辑系统可成功对ETEC K88的LT基因进行无痕敲除。体外试验结果表明，K88 LT^-缺陷菌株的溶血能力丧失，并且生长速度比野生型菌株减缓，LT可能和ETEC K88的致病能力和生长性能有关。表明λ-Red和CRISPR/Cas9级联的基因敲除方法可用于LT毒素基因及其他一些大肠杆菌基因的敲除。K88 LT^-缺陷菌株的构建为下一步研究LT毒素的致病机制奠定基础。  相似文献   

饲料脂质对养殖鱼类品质的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

邓士秋  段青源  申屠基康 《水产科学》2011,30(5):301-306

目前,高脂饲料在鱼类养殖中的应用已越来越广泛。然而,目前全球每年鱼油产量虽然基本恒定,但水产饲料中鱼油的需求量却在持续上升,到2010年,鱼油的使用量将超出产量的70%。鱼油的有限供给和过量消耗,以及其中可能积蓄的二噁英和多氯联苯,使鱼类养殖业迫切需要采用其他脂肪源来代替饲料中的鱼油。然而,高脂饲料或用其他脂肪源替代饲料中的鱼油不仅影响养殖鱼  相似文献   

基于最优经济增长的中国各省区碳排放权盈亏分析     

邓吉祥  刘晓  王铮 《干旱区资源与环境》2015,29(4):36-40

在“共同但有区别的责任”原则下,综合考虑人均累计碳排放相等和差别原则,将中国碳排放划分为历史(1995-2010年)和未来(2011-2050年)两个时期,设计并分析中国各省区的减排框架.结果表明:1)历史时期,中国各省碳排放权呈北亏损,南盈余的基本分布格局;2)未来时期,中国各省碳排放权的分布格局变化不大,但亏损和盈余中心的亏损或盈余比重上升;3)两时期内,东部地区盈余比重显著上升,中部地区亏损比重显著上升;西部地区盈余比重显著下降.  相似文献   

基于径向基神经网络的非寿险公司财务预警研究     

邓庆彪  文辉 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2011,(1):25-29

选取我国保险行业中40家非寿险公司2006~2008年的混合非平衡面板数据作为研究样本，采用径向基神经网络模型从偿付能力、盈利能力、成长能力三个角度对非寿险公司财务预警进行研究。实证表明，此模型可以为管理层的财务预警提供更有有效的信息，并且在我国保险业具有样本量小，有效数据少的情况下，有着良好的运用前景。  相似文献   

益生菌大肠杆菌Nissle 1917抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果研究     

李金龙  邓欢  刘金艳  毛俊霞  王瑶  唐志如 《动物营养学报》2017,29(4)

本试验旨在研究益生菌大肠杆菌Nissle 1917(Ec N)抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果。采用体外法对Ec N进行生长曲线绘制和耐酸、耐胆盐、耐热性能的测定;以猪肠上皮细胞IPEC-J2细胞为体外细胞模型,考察了Ec N对该细胞的黏附率以及对致病菌大肠杆菌K88的黏附抑制率;同时通过蛋白质印迹法检测了Ec N对IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4的水平的影响。结果表明:1)Ec N对高酸、高胆盐和高温环境具有一定耐受能力。2)Ec N对IPEC-J2细胞的黏附作用以对数期最佳,黏附率达33.96%,显著高于迟缓期、稳定期和衰亡期(P0.05)。3)Ec N对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制效果,黏附抑制率达87.84%。4)Ec N还能上调IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4水平。结果提示,益生菌Ec N具有较好的抗逆性能,能够良好地黏附猪肠上皮细胞,对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制作用。  相似文献   

饲粮添加硬脂酰乳酸钠对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及养分表观消化率的影响     

邓波  吴杰  郭红炳  吕金辉  徐子伟 《动物营养学报》2017,29(2)

本试验旨在研究硬脂酰乳酸钠(SSL)对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及养分表观消化率的影响。试验选择25日龄的断奶仔猪336头,按体重随机分为6组,每组7个重复,每个重复8头猪。各组仔猪饲粮中SSL添加水平分别为0(对照)、250、500、750、1 000和2 000 mg/kg,试验分2个阶段,每阶段21 d。试验测定仔猪生长性能,谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇等血清生化指标及能量、干物质、氮和粗脂肪表观消化率。结果表明:与对照组相比,1)饲粮中添加500、750和1 000 mg/kg SSL能显著降低仔猪第2阶段料重比(P0.05),添加1000 mg/kg SSL显著降低全期料重比(P0.05);2)饲粮中添加SSL有降低试验第42天仔猪血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性,增加血清高密度蛋白胆固醇含量及高密度蛋白胆固醇/低密度蛋白胆固醇值的趋势,且当添加水平为2 000 mg/kg时差异达到显著水平(P0.05);3)饲粮中添加SSL能显著提高粗脂肪表观消化率(P0.05),并且有提高氮及能量表观消化率的趋势,当添加水平为2 000 mg/kg时差异达到显著水平(P0.05)。结果提示,饲粮添加SSL能降低仔猪料重比,提高饲料养分尤其是粗脂肪的表观消化率。  相似文献   

黄色黏虫板诱杀技术在辣椒蚜虫绿色防控上的应用     

云天海  肖日新  黄文枫  邓长智  符坚  李相煌  吴海云 《湖北农业科学》2014,(1):79-80

进行了黄色黏虫板防控和诱杀辣椒(Capsicum annuum)蚜虫(Aphidoidea)成虫的试验。结果表明,黄色黏虫板对辣椒蚜虫成虫防控和诱杀效果较显著,每667 m2挂板21块,放置高度1 m,方向朝南的诱杀效果最好。它可减少药剂使用次数,对控制蚜虫种群密度具有显著作用和良好的应用前景。  相似文献   

广西东门林场森林资源现状和可持续发展策略   总被引：1，自引：0，他引：1  

莫继有  吴永富  兰俊  黎怀玲  吴兵  邓海群 《桉树科技》2011,(1):53-56

根据广西东门林场2009年森林资源二类调查的结果,分析东门林场森林资源现状、特点及存在的问题,并提出东门林场森林资源可持续发展的策略。  相似文献   

排放试验转毂加载方法研究     

邓涛  韩海硕  马传富  廖一橙 《拖拉机与农用运输车》2016,(4):34-36,41

在排放试验中,转毂通过功率吸收单元对车辆驱动轮施加阻力来模拟道路行驶阻力,施加阻力大小的设置直接影响到车辆发动机负荷,而负荷的大小则会影响到排放结果以及OBD(车载诊断)相关模块的诊断。主要介绍了两种常用的转毂加载方法(单点法阻力加载和滑行法阻力加载),以及UAES(联合汽车电子有限公司)排放室采用滑行法阻力设置转毂加载参数的流程,以期为排放和诊断结果的失效分析提供理论指导和借鉴。  相似文献   

地稔凝集素的提取及凝血活性的研究     

邓政东  程爱芳  李秀丽 《黑龙江农业科学》2015,(2):56-58

为研究和利用地稔的促凝血活性物质,以地稔为试材,提取地稔凝集素,研究pH、温度和糖等理化因素对凝血活性的影响。结果表明:经硫酸铵沉淀及透析提取的地稔凝集素具有红细胞凝集活性;碱性条件下,抑制作用明显,而酸性条件有较强促进作用;温度对凝集素凝血活性影响很小;半乳糖有明显促进作用。  相似文献