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71.
GPV野毒株的分离及PCR检测方法的应用 总被引:8,自引:2,他引:6
在本实验中,用根据CPVHI标准毒核苷酸VP1-VP3和VP3两个区段基因序列设计的2特异性引物CRP1/CRP2和CF1/CF2,用该2对引物对从鹅细小病毒野毒感染的病鹅分离的GPV野毒株进行PCR检波,结果2对引物CRP1/CRP2和CF1/CF2,均能特异性地扩增出与预期片段大小相符的0.6bp和1.6bp两个片段,回归试验的结果表明,该CFV野毒株的感染潜伏期为8d,病程为1~3d,致死率达100%。 相似文献
72.
73.
鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达 总被引:8,自引:2,他引:6
根据鹅细小病毒GPVH1株基因组核苷酸序列设计了一对引物,对其结构蛋白VP1与VP3非重叠核苷酸序列进行PCR扩增,并克隆到表达性载体pGEX-6p-1,经酶切鉴定筛选出阳性克隆,并转化到大肠杆菌BL21(ED3)plysS进行原核表达,并用SDS—PAGE鉴定,结果表明融合蛋白在表达性细菌BL21中重获得了高效表达。 相似文献
74.
75.
该研究主要对杜洛克、大白猪、长白猪进行屠宰测定和背最长肌氨基酸含量及组成分析。结果表明,杜洛克、大白猪、长白猪的屠宰率分别为76.32%、76.54%、77.27%;眼肌面积分别为43.07 cm~2、53.96 cm2、50.94 cm~2;胴体瘦肉率分别为63.96%、64.84%、66.84%;背最长肌中的氨基酸总量分别为23.33%、23.26%、23.69%;鲜味氨基酸含量分别为17.05%、16.99%、17.34%;必需氨基酸含量分别为8.96%、8.98%、9.14%;3个品种猪的肌肉中均以谷氨酸含量最高,其次为天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、精氨酸等,而胱氨酸、蛋氨酸含量最低。 相似文献
76.
77.
本研究以新疆地区不同规模牛场荷斯坦牛2012~2013年的体尺体重记录为研究材料,以4个生长性状(体高、体斜长、胸围、体重)为研究对象,采用SAS8.1软件GLM过程分析不同规模牛场和年龄对各性状的影响。结果表明:不同牛场对荷斯坦牛体高、体斜长、胸围有极显著影响(P0.01),对体重没有显著影响(P0.05);不同年龄对荷斯坦牛体高、胸围有极显著影响(P0.01),对体重有显著影响(P0.05),对体斜长没有显著影响(P0.05);荷斯坦牛的体高、胸围和体重随着年龄的增加呈上升趋势,尤其是在3~5岁增长较快。通过分析不同规模牛场和年龄对荷斯坦牛体尺体重的影响,旨在促使牛场合理加强不同年龄阶段荷斯坦牛的饲养管理水平,从而维持适当的体尺体重,提高奶牛生产性能。 相似文献
78.
利用DNAStar Protean功能筛选AP1和AP2主要抗原结构域,引入15位柔性多肽,通过重叠延伸PCR技术串联融合AP1、AP2主要抗原域基因,PCR扩增串联体基因片段,将其克隆至pET-30a(+)载体,转化BL21(DM3)细胞,进行高效表达,目的蛋白经亲和层析纯化后进行Western blot鉴定。PCR扩增出320bp的AP1和759bp的AP2主要抗原域,经重叠延伸PCR获得了1 065bp的AP1、AP2串联体基因片段,DNA测序结果表明,无碱基的缺失、突变和移码。构建的重组表达载体经诱导能够可溶性表达,目的蛋白相对分子质量大小约46 000,纯化后重组蛋白的纯度96%,Western blot分析重组融合蛋白结果表明,能够被兔源抗无乳链球菌阳性血清所识别。重叠延伸PCR获得了AP1、AP2主要抗原域串联体,构建了pET-30a(+)/AP1+AP2重组表达载体,诱导目的蛋白呈可溶性表达,表达产物具有良好的免疫反应原性,为进一步研究基于AP1、AP2蛋白的致病机制,检测制剂及疫苗奠定了试验基础。 相似文献
79.
为建立一种快速准确高效的检测奶牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿抗原相应抗体的检测方法,本研究以牛乳腺炎无乳链球菌Ia型PI-2a菌毛岛屿辅助蛋白AP1、AP2及骨架蛋白BP 3基因串联表达的重组蛋白为ELISA包被抗原,通过方阵滴定法优化反应条件,建立了奶牛乳腺炎无乳链球菌抗体的间接ELISA检测方法。优化后抗原的最佳包被量为5.0μg/孔,血清样品最佳稀释倍数为1∶40,酶标二抗最佳稀释倍数为1∶5 000。对S.agalactiae、S.pyogens、E.coli、S.aureus、S.epidermidis阳性血清进行检测结果显示,后4种阳性对照血清未出现阳性反应,表明该方法具有良好的特异性;对已知牛无乳链球菌阳性血清倍比稀释后进行检测时,当稀释倍数达到1:12 800时仍出现阳性结果,表明该方法具有较高的敏感度;重复性试验显示批内变异系数为2.41%~8.89%,批间试验变异系数为7.53%~10.46%;用该方法对426份临床样品进行奶牛无乳链球菌抗体检测,结果显示,其样品阳性检出率为45.07%。本研究首次基于乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿三联重组蛋白建立的间接ELISA方法为奶牛无乳链球菌的快速检测提供了一种准确、可靠的检测方法。 相似文献
80.
本文针对机械式自动变速器的控制电路系统原理进行分析,对输入信号的采集以及具体执行机构的控制效果进行研究。在此基础上,提出与其相关的一些程序的具体开发和利用,为更好的推动机械加工行业的发展提供有效参考。 相似文献