兔轮状病毒蚀斑特性研究     

崔尚金  王云峰 《中国养兔杂志》1996,(1):24-25

从哈尔宾自然腹泻幼兔的粪样中，成功地分离出一株兔轮状病毒（ＬａＲＶ，Ｎ５），经（ＭＡ１０４）细胞适应继代２４代，２４代细胞培养养蚀病斑滴度为１０＾９ＰＦｕ／ｍｌ蚀斑试验培养瓶在３７℃培养５天，形成直径为１～５ｍｍ的圆形蚀斑。  相似文献   

牛病毒性腹泻病毒链特异性SYBR Green荧光定量PCR方法的建立及应用   总被引：1，自引：1，他引：0  

刘存  邓永  梁琳  李金祥  张彦明  崔尚金 《畜牧兽医学报》2019,(10)

为了对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)复制过程中正、负链RNA进行定量检测,通过生物学软件DNAStar和Primer express 3.0设计BVDV正、负链RNA特异性反转录引物并在其5′端添加非病毒核苷酸标签序列以区分BVDV正、负链RNA。同时设计荧光定量PCR引物与非病毒核苷酸标签序列组成引物对,建立了BVDV链特异性荧光定量RT-PCR(ssRT-qPCR)方法,对其敏感性、重复性、特异性进行评估并利用所建立BVDV ssRT-qPCR对不同接毒剂量下BVDV在细胞内复制过程中正、负链RNA进行定量检测。结果表明,以构建的pMD18T-BV+和pMD18T-BV-质粒为标准品建立的BVDV正链特异性荧光定量RT-PCR方法[ss(+)RT-qPCR]和负链特异性荧光定量RT-PCR方法[ss(-)RT-qPCR]在10~2～10~7拷贝范围内具有良好的线性关系,线性相关系数分别为0.998 1和0.995 3;敏感性试验结果显示,ssRT-qPCR敏感性较好,ss(+)RT-qPCR最低检测下限为10拷贝,ss(-)RT-qPCR最低检测下限为100拷贝。重复性试验结果显示,所建立的ssRT-qPCR批内和批间的变异系数为均小于1%,方法重复性良好。特异性试验显示,所建立的ssRT-qPCR方法与牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒等不存在交叉反应,特异性较好。利用建立的ssRT-qPCR对不同感染剂量下细胞内BVDV正、负链RNA进行定量分析,结果显示以10、0.1 MOI剂量接种BVDV于MDBK细胞后,BVDV正、负链RNA变化呈现先升后降再逐渐上升的趋势。以1 MOI剂量感染MDBK细胞,BVDV正、负链RNA的动态变化趋势略有差异,整体呈上升趋势。10、1 MOI接毒剂量接种细胞后,BVDV正、负链RNA在感染后36 h基本维持稳定水平,以0.1 MOI接种细胞后BVDV正、负链RNA在感染后24 h即达到稳定水平。BVDV链特异性检测进一步验证了所建立方法的适用性。该研究建立了BVDV链特异性荧光定量RT-PCR方法并利用该方法对BVDV在细胞内复制过程中正、负链RNA的动态变化过程进行描述,为研究宿主蛋白抗病毒机制、BVDV基因组RNA复制及调控机制等研究提供了研究手段。  相似文献   

病毒遗传学分析及在疾病防制上的应用     

宋晓华  崔尚金  王凯波  闫林海 《中国预防兽医学报》2000,(Z1)

在人与动物发展的历史上，有很多种疾病至尽无法消灭，如肝炎、病毒性腹泻、流感、爱滋病等，其原因不是没有什么好的药物或疫苗，而是因为这些病毒变化的很快。由于遗传的选择性结果，病毒在不断的变化。病毒的遗传变化主要通过两个基本机制：突变和重组。突变产生在病毒基因组发生错误的时候，可使病毒产生微小的变化；而基因重组则是由于共感染使得病毒交换遗传信息的结果，从而创造了一个新病毒，使病毒产生很大的改变。１病毒的突变 病毒遣传物质的改变导致病毒蛋白功能的变化，从而产生新的病毒血清型或改变毒力的病毒。１．１突变的…  相似文献   

鸽圆环病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立及应用     

亓玉卓  梁琳  朱亚丽  梁瑞英  贾亚雄  单虎  崔尚金 《中国家禽》2021,(3):22-27

为建立一种针对鸽圆环病毒(PiCV)的快速诊断方法,试验根据PiCV的Rep保守基因序列,设计合成一对特异性引物,建立了PiCV荧光定量PCR检测方法,对其敏感性、特异性、重复性进行评价并利用该方法对临床样本进行检测。结果表明:在最佳反应条件下,所建立的PiCV荧光定量PCR方法在1.43×10²~1.43×10⁸copies/μL标准品范围内具有良好的线性相关性,线性相关系数为0.998;敏感性试验结果显示,该方法最低可检测到1.43×10²copies/μL标准品,是常规PCR检测方法的1000倍;特异性试验结果显示,该方法与其他常见的鸽病病原不发生交叉反应;重复性评价结果显示,批内与批间的变异系数均小于0.8%;所建立PiCV荧光定量PCR方法对临床鸽血清样品检测结果显示,PiCV阳性率达38.7%,高于常规PCR方法的检测阳性率(28.7%),说明该方法具有良好的适用性。研究结果PiCV的流行病学调查、病原学监测及定量研究奠定了基础。  相似文献   

猪传染性萎缩性鼻炎流行特点、危害状况、诊断与防治净化     

崔尚金 《猪业科学》2009,26(6):22-28

猪传染性萎缩性鼻炎(AR)是世界性分布的一种广泛流行的严重接触性上呼吸道传染病,临床以打喷嚏、鼻骨变形、鼻甲骨萎缩或消失以及鼻中隔弯曲等为特征.AR作为隐性疾病,临床上不表现明显的全身症状或死亡,但给养猪业带来的经济损失是商品猪耗料增加7%～9%,日增重下降3%～17%,出栏延迟30 d左右.患猪萎缩的鼻甲骨或弯曲的鼻中隔改变了鼻腔的进出气流,降低鼻腔的自然防疫保护屏障功能,使外界环境中悬浮物(包括某些病原体)吸入到鼻道底部、鼻窦和下呼吸道,从而引发与支原体肺炎的协同继发感染.在当前众多的猪呼吸系统疾病中,AR所造成的经济损失应该受到关注.  相似文献   

养殖企业(户)土法制作、应用自家疫苗的缺点和风险——潜藏巨大散毒隐患     

崔尚金 《中国动物保健》2007,(11):15-19

导读由于自家苗在制备过程中不能对病毒进行彻底的灭活,因此在使用过程中很容易导致病原体的进一步传播,使传染原扩大。自家苗中未灭活的细菌或病毒达到一定数量,就可能造成这些病原体在动物群中的流行,而且这种流行属于人工感染后的流行,病原体的致病力比自然感染时更强,也更难以控制,由此形成恶性循环。自家苗灭活不全的另一个最大害处,就是导致猪群产生免疫耐受。低剂量的病毒感染是免疫耐受的重要诱因。如果用于制作自家苗的病料中含有少量猪瘟等能够引起猪群免疫耐受的病原体,这些病毒含量低至不足以引起疾病的流行,但却可能诱导猪群产生免疫耐受,使病毒在猪群中持续存在,呈非典型流行或散发流行。  相似文献   

甲壳素、油乳剂和蜂胶对鸡新城疫疫苗免疫调节作用的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

张莉  尹燕博  崔尚金  简子健  邓普辉  刘尚高 《中国预防兽医学报》2004,26(2):136-138

本实验以肉用AA雏鸡和蛋用罗曼雏鸡为实验动物,从细胞免疫和体液免疫首次研究了甲壳素对鸡新城疫疫苗的免疫调节作用,并与油乳剂和蜂胶佐剂加以比较,以观察不同免疫佐剂对鸡新城疫的免疫调节作用.试验结果表明,三种佐剂的疫苗在肉鸡组免疫后5～10 d,蛋鸡组免疫后5～15 d,甲壳素疫苗组HI抗体效价显著高于其它组;在肉鸡组免疫后15～37 d,蛋鸡组免疫后22～50 d,油乳剂疫苗组HI抗体效价显著高于其它组.用三种不同佐剂的疫苗免疫后,肉鸡和蛋鸡甲壳素疫苗组的细胞免疫水平显著高于其它组.  相似文献   

猪断奶后多系统衰竭综合征诊断方法的系列研究   总被引：10，自引：0，他引：10  

崔尚金  全艳平  李曦  蔡阳  符芳  胡守萍  付德霞  吴东来  曲连东 《中国预防兽医学报》2004,26(2):146-149

本研究对猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)的诊断方法临床症状和病理变化、病毒的分离与鉴定、聚合酶链式反应(PCR)、间接免疫荧光试验(IFA)、间接酶联免疫吸附试验(IELISA)、免疫组织化学试验(IHC)等进行了系列研究,这些方法适用于猪断奶后多系统衰竭综合征的诊断.  相似文献   

猪断乳后多系统衰竭综合征诊断技术研究进展     

曲连东  崔尚金 《畜牧兽医科技信息》2005,(11):16-19

猪断乳后多系统衰竭综合征（PMWS）是一种由猪圆环病毒2型（porcinecircovirus2，PCV-2）引起的新病。PMWS主要感染1—5月龄猪，发病率为4％-30％，致死率为70％-80％。断乳猪和生长猪临床表现为进行性消瘦、呼吸困难、皮肤苍白、黄疸、腹泻和体表淋巴结肿大。多种组织发生广泛的肉芽肿性炎症，肉芽肿性淋巴结炎、间质性肺炎、肝炎、间质性肾炎和胰腺炎。病理组织学变化主要是淋巴细胞组织不同程度的衰竭萎缩，淋巴细胞减少。世界许多养猪国家都发生了本病，我国也有流行。PMWS严重影响猪的生长发育，没有有效的治疗方法，尚无有效疫苗可供应用，因此本病的正确诊断尤为重要，现将有关进展综述如下。  相似文献   

候鸟发生禽流感的警示     

李敏  崔尚金 《畜牧兽医科技信息》2005,(6):7-11

5月4日，农业部接到青海省农牧厅报告，在青海省刚察县泉吉乡年乃索麻村部分候鸟发生死亡，国家禽流感参考实验室5月18日从死鸟体内分离到H5N1亚型禽流感病毒。截止5月26日，已有包括斑头雁、鱼鸥等在内的超过1000只候鸟死亡。青海省已依照动物防疫法律法规规定，采取紧急防控措施，对疫区进行严密封锁和严格消毒，防止家禽、人员与野生禽鸟接触，对疫区周围以及候鸟迁徙路线所经区域所有易感家禽进行紧急免疫。  相似文献