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为探究天津地区中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)“牛奶病”案例的病原,本研究采用流行病学调查、病原分离、18S rDNA基因序列分析、人工感染试验和免疫组织化学分析来明确病原种类及其组织分布特征、时序变化特征。结果表明:自然发病蟹的主要临床症状包括对外界刺激反应慢或基本不反应,头胸甲腔内蓄积乳白色血淋巴,头胸部及步足基部关节膜连接处肌组织呈不透明乳白色,肝胰腺呈白色半流体糜烂状。基于18S rDNA基因序列的系统发育分析表明,真菌分离株P13被鉴定为二尖梅奇酵母(Metschnikowia bicuspidata)。人工感染试验结果表明,真菌分离株P13能够在实验室条件下感染健康中华绒螯蟹[累积死亡率为(55.0±2.4)%],导致实验蟹呈现与自然发病蟹相似的临床症状,且能从实验蟹中再分离出二尖梅奇酵母。免疫组织化学分析结果表明,真菌分离株P13能够侵染中华绒螯蟹肝胰腺、后肠、鳃、心脏和肌组织,引起靶组织不同程度的病理损伤并呈现时序变化特征。综上所述,二尖梅奇酵母是天津地区中华绒螯蟹“牛奶病”的病原,本文也初步揭示了该病原的主要靶组织及组织分布特征和时序变化特征,为深入... 相似文献
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为了解军曹鱼NHE3与NKAα1a的序列特征、盐度胁迫下的基因表达模式以及相关miRNA的靶向调控作用,实验应用cDNA末端快速扩增技术克隆了NHE3与NKAα1a的全长cDNA序列;应用实时定量PCR (qPCR)技术分析了NHE3和NKAα1a的组织特异性和盐度适应性表达模式;采用双荧光素酶报告实验检测了NHE3和NKAα1a与相关miRNA的靶向调控关系。结果显示,军曹鱼NHE3与NKAα1a基因的开放阅读框长度分别为2 718和3 075 bp,分别编码905和1 024个氨基酸;NHE3、NKAα1a在鳃、肠、心脏等9种组织中均有表达,其中以鳃组织中的表达丰度最高。随着盐度升高,NHE3在鳃中表达量下降,低盐和高盐适应后均呈显著差异。NKAα1a基因表达量随着盐度升高出现不同趋势,在鳃和肠中受低盐和高盐影响后均显著上调,而高盐环境下其在体肾中的表达水平显著下调。在不同盐度适应过程中,NHE3、NKAα1a均以鳃组织中的表达水平最高。NHE3-pmirGLO-WT与miR-1335-3p共转染时,较对照组相对荧光素酶活性下降,并存在极显著差异;NKAα1a-pmirGLO-WT... 相似文献
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