猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究     

刘思国  彭永刚  王牟平  王春来  宫强 《中国预防兽医学报》2004,26(6)

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础.  相似文献   

瘦肉型猪(PIC344)精液碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

国锦琳  刘克武  岳碧松  张志和  侯容  李佳  陶科  黄跃武 《畜牧兽医学报》2004,35(1):37-41

用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE SepharoseFF和SephacrylS 200柱层系,从瘦肉型猪(PIC344)精液中提取出碱性磷酸酶。纯化倍数11 46,比活为81 23U/mg蛋白。提取液经PAGE和SDS PAGE检测,呈现一条带。该酶相对分子质量为90 12KD,亚基分子质量为48 41KD,该酶为两个相同亚基组成。等电点为8 19,最适pH值9 5,最适温度为40℃,以磷酸苯二钠为底物测得Km值为3 98×10-4mol/L。经分析,Cu2 、Cd2 为酶的抑制剂,Ni2 、Ca2 、Mg2 为该酶的激活剂。选用CuSO4、Cd(NO3)2作酶的抑制类型判断,结果表明,CuSO4为非竞争性抑制,抑制常数为1 32×10-3mol/L,Cd(NO3)2为竞争性抑制,抑制常数为3 33×10-4mol/L。  相似文献   

仙居鸡染色体G带和Ag-NORs的研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

陈国宏  李碧春  徐琪  张学余  吴信生  刘莉  嵇宝华 《畜牧兽医学报》2004,35(2):141-145

运用改进的鸡外周血淋巴细胞培养——空气干燥法，分析了仙居鸡染色体G带和Ag—NORs。G带研究结果表明：前10对大型染色体可分为30个区，144条带，同时对G带带型特征进行了具体描述，并绘制了G带模式图。Ag—NORs处理发现：仙居鸡的Ag—NORs常分布于1p、3p、4p、Zp、2q上，均数为3．26，众数为3。不同个体间以及同一个体的不同细胞间。Ag—NORs数目存在多态性；此外研究还发现Ag—NORs联合现象。  相似文献   

捕食线虫性真菌18S rDNA基因序列与种系发生关系研究     

杨莲茹  杨晓野  刘珍莲  汪明  考桂兰  刘海成  刘军 《畜牧兽医学报》2004,35(3):329-333

对捕食线虫性真菌——少孢节丛孢菌A1分离株(Arthrobotrys oligospora A1)的18S rDNA基因序列进行了研究。结果表明：其18S rDNA全基因序列为1769bp，在进化树上与同种国外分离株A．oligospora var oligospora 1最为接近，同源性为94．7％。这与二者都具有捕食性结构—菌网的特点相一致。证实捕食线虫性真菌的捕食性结构与捕食线虫性真菌种系发生有关。从少孢节丛孢菌3个分离菌株(Arthrobotrys oligospora A1、A．oligospora 1、A．oligospora2)的进化树及同源性来看。不同国家地区的丛孢菌属(Arthrobotrys)分离株确实存在差异。  相似文献   

猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究   总被引：4，自引：3，他引：4  

冯书堂  董晓  刘立新  牟玉莲  况玲  陈红平  张莉  张勇  张青峰 《畜牧兽医学报》2004,35(5):477-480

从五指山猪(WSZP)近交系第8～13代培育群中，先后选用21头5～10月龄青年母猪，分别于授精后25～30d采集胎儿106个，进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM F10(1:1)为基础培养液，按添加或不添加生长因子，将培养液分为A、B、C3种，并以STO细胞作饲养层，在38℃、5.0％CO2和湿润的气相中进行培养建系。结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株，其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存。并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究。研究发现：不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响，不同培养液对EG细胞建系效果不同，STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一。EG细胞系的初步建立，为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能。  相似文献   

禽流感病毒夹心ELISA快速检测方法的研究   总被引：21，自引：1，他引：21  

肖运才  李自力  胡思顺  石德时  许青荣  程峰  刘梅  毕丁仁  王桂枝 《畜牧兽医学报》2004,35(5):536-541

以禽流感病毒(AIV)湖北分离株(H9N2亚型)提纯物为免疫原，制备出鸡抗AIV和兔抗AIV抗体，经用琼脂扩散法测得效价分别为1:32和1:16。以纯化的鸡抗AIVIgG为包被抗体，兔抗AIVIgG为第二抗体，建立了检测AIV抗原的夹心ELISA法。结果表明，鸡抗AIVIgG的最佳包被浓度为1μg/mL，兔抗AIV IgG的最适工作浓度为5μg/mL；对已知的阳性样品，用夹心ELISA法测得的病毒滴度比血球凝集滴度高16倍以上，且能检出其它亚型的禽流感病毒；与新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、鸡痘病毒、马立克氏病病毒等无交叉反应，说明本方法有很高的特异性及敏感性。对14个鸡场送检的、患有呼吸道疾病或有腹膜炎、眼炎、产蛋下降、怀疑为禽流感感染的病鸡进行了检测，结果有7个鸡场为阳性。本方法的建立为禽流感病鸡群的临床检验提供了一种方便、敏感、快速的检测方法。  相似文献   

体外试验中不同粗精比对山羊瘤胃细菌氨态氮利用效率的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

赵国琦  丁健  孙龙生  张艳云  刘大林  贾亚红  陈小连 《畜牧兽医学报》2004,35(6):640-645

利用体外发酵法研究了4种粗精比(10∶0、8∶2、6∶4和4∶6)底物对山羊瘤胃细菌产量、15NH3-N利用效率的影响。结果表明:混合培养液的pH值与氨态氮浓度在8h内急剧下降,而后至24h呈缓慢下降;经24h培养的细菌产量在8∶2、6∶4和4∶6组中差异不显著(P>0.05),但都极显著地高于10∶0组(P<0.01);细菌体15N丰度以8∶2及4∶6组较高,显著高于10∶0和6∶4组(P<0.05);细菌体15N富集量以8∶2组最高,底物547.43μg15N中有120.44μg被细菌体富集,显著高于10∶0组(P<0.05),但6∶4、4∶6组与10∶0组间差异均不显著(P>0.05)。细菌赖氨酸的相对百分组成随精饲料比例的增加而显著增加,胱氨酸在粗饲料组(10∶0)显著高于其它组,但各精饲料添加组间差异不显著,组氨酸以8∶2组为最高,显著高于10∶0组,但与其它精饲料添加组间差异不显著(P>0.05)。  相似文献   

微卫星DNA在动物亲子鉴定中的应用及研究进展     

吴艳  侯水生  肖红卫  刘小林 《现代畜牧兽医》2004,(10):38-39

本文概述了微卫星DNA进行亲子鉴定的基本原理与方法,将其用于亲子鉴定的优点以及研究进展,最后对未来的应用进行了展望。  相似文献   

司帕沙星在雏鸡体内药代动力学及残留的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘明春  佟恒敏  朱文波  孙相志  何剑斌  赵玉军 《现代畜牧兽医》2004,(11):37-39

选用30日龄健康海兰鸡65只,按5mg／kg体重口服给予司帕沙星,定期采样,以高效液相色谱法测定血浆、肝、肾、心、肺和肌肉中司帕沙星的含量,研究司帕沙星在鸡体内的药动学与残留。结果表明:司帕沙星在血液中经时过程符合一级吸收二室开放模型,其主要动力学参数如下:t1／2α0.9585h,t1／2β11.7447h,tmax0,6514 h,Cmax0.5271 μg／ml,AUC1.7908mg／L／h。肾脏、心脏的药时数据符合一级吸收二项指数方程,其主要动力学参数分别为:t1/2Ka0.3733 h、0.1530h,t1／2k1.3007 h、2.1013h,tmax1.01420h、0.6239 h,Cmax2.1104μg／ml、1.6721 μg／ml,AUC6.51764 mg／L／h、6.2286mg／L／h。司帕沙星在肝脏、肺脏、肌肉中的经时过程符合一级吸收三项指数方程,主要动力学参数分别为t1/2α0.3672 h、0.6156 h、1.5835 h,t1/2β3.9998 h、15.0271 h、12.0103h,tmax0.7458 h、0.7322 h、1.3726 h,Cmax4.4709μg／ml、2.5267μg／ml、0.9760μg／ml,AUC20.893 mg／L／h,27.242 mg／L／h、9.7943mg/L/h。建议司帕沙星在鸡体内的休药期为7d。  相似文献   

Relationship between wheat yield and Suaeda glauca coverage on fields with different soil Na concentrations in China     

NOBUMASA ICHIZEN  TAKAYOSHI NISHIO  JINGYU SUN  XIAOJING LIU 《Weed Biology and Management》2004,4(3):168-170

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